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一种基于RPA-CRISPR/Cas12a的产气荚膜梭菌的快速检测试剂盒 

申请/专利权人:佛山科学技术学院

申请日:2024-04-01

公开(公告)日:2024-06-28

公开(公告)号:CN118256502A

主分类号:C12N15/113

分类号:C12N15/113;C12Q1/689;C12Q1/6848;C12N15/11;C12R1/145

优先权:

专利状态码:在审-公开

法律状态:2024.06.28#公开

摘要:本发明公开了一种RPA‑CRISPRCas12a检测体系的crRNA,还提供了包括该crRNA的试剂盒,本发明将种内保守、种间特异的片段的cpb基因、cpe基因以及netB基因作为检测的靶基因,整体操作便捷,RPA恒温扩增与CRISPRCas反应在一管中进行且温度一致,反应过程中无需调节温度和挪动反应管,整体检测时间短,成本低,无需昂贵仪器设备,降低了气溶胶污染的可能性,具有显著的灵敏度以及精准度。

主权项:1.一种RPA-CRISPRCas12a检测体系的crRNA,其特征在于,所述crRNA为rRNA1-crRNA25中的至少一种,所述rRNA1-crRNA25包括cpe基因、cpb基因以及NetB基因中的至少一种,其中,cpe基因包括:crRNA1:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUGAAUUUAUACAAGCAUCUG;crRNA2:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUAGAAUAUGGAUUUGGAAUA;crRNA3:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUUGUAUUUUGUUCUCCUAUA;crRNA4:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUAUGGUAAUAUCUCUGAUGAU;crRNA5:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUGAAUUUCUCAUGGUAAUAUC;crRNA6:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUAUAGCUUGAUACUUUCUAUA;crRNA7:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUAAUAUACAUAUUCAUUUGG;crRNA8:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUAUGAUUGGCGUUCUUCUAA;crRNA9:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUAGUCCAAGGGUAUGAGUUAG;crRNA10:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUCACUUAACAAUUACAGCUAC;crRNA11:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUUCAAAUAAUUUUAAUAAUC;crRNA12:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUCCAGUAGCUGUAAUUGUUA;cpb基因包括:crRNA13:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUCUAAUUCUACUGCAAUUAAU;crRNA14:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUCGGUUAGAUACUCGAUUUCU;crRNA15:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUCAUUUUCAUUAAUACUUUCA;crRNA16:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUGGAAUACUAUCAACUAUUUU;crRNA17:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUAUUUUUAGGAAUACUAUCA;crRNA18:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUAUCCCAUUGUAUUGGAUAC;crRNA19:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUAACCUCCUAUUUUGUAUCCC;NetB基因包括:crRNA20:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUAAGUUUCAGGCCAUUUCAU;crRNA21:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUAUAAGUUUCAGGCCAUUUC;crRNA22:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUAUUAUUAUUUACAUCAGCA;crRNA23:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUAGGCGGUAAUAUAUCUGUU;crRNA24:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUAUAGGCGGUAAUAUAUCUG;crRNA25:GGGUAAUUUCUACUAAGUGUAGAUUUCAUAGCUUAUAGUAUUUU。

全文数据:

权利要求:

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