申请/专利权人:广州知易生物科技有限公司
申请日:2021-06-15
公开(公告)日:2024-06-14
公开(公告)号:CN113234770B
主分类号:C12P19/04
分类号:C12P19/04;C12N1/20;C08B37/00;C12R1/01
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.06.14#授权;2021.08.27#实质审查的生效;2021.08.10#公开
摘要:本发明涉及一种脆弱拟杆菌荚膜多糖A的制备方法,所述的制备方法包括以下步骤:制备pH≤5的脆弱拟杆菌的菌悬液,加热提取,收集提取液得到荚膜多糖A的粗糖溶液。与现有技术相比,本发明具备如下有益效果:发明人意外地发现,对pH≤5的脆弱拟杆菌的菌悬液进行加热提取,能有效促进荚膜多糖A从脆弱拟杆菌菌体中脱落从而提取获得荚膜多糖A。相比于传统的苯酚水法,本申请能在避免使用苯酚的情况下获得荚膜多糖A,毒害性低。并且,采用本发明制备方法,脆弱拟杆菌荚膜多糖A的得率明显得以提升。
主权项:1.一种脆弱拟杆菌荚膜多糖A的制备方法,其特征在于,所述的制备方法由以下步骤依序组成:1制备pH为2.5~4.0的脆弱拟杆菌的菌悬液,加热提取,收集提取液得到荚膜多糖A的粗糖溶液;加热提取采用的温度为90℃~110℃;加热提取的时长为1.0h~2.5h;2对所述粗糖溶液进行超滤并收集截留液的步骤;以及3对所述截留液进行离子交换层析并对收集到的洗脱液进行超滤的步骤;阴离子交换层析采用DEAESepharoseFastFlow离子交换柱层析柱,16mm×200mm;洗脱方式为采用含0.2M氯化钠的Tris-HCl溶液进行梯度洗脱;洗脱液pH为5.0~9.0,洗脱液流速为15mLmin~25mLmin。
全文数据:
权利要求:
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