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一种高产2 '-岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌及其构建方法与应用 

申请/专利权人:合曜生物科技(南京)有限公司

申请日:2024-03-13

公开(公告)日:2024-06-28

公开(公告)号:CN118256536A

主分类号:C12N15/70

分类号:C12N15/70;C12N15/90;C12N1/21;C12P19/24;C12P19/18;C12P19/00;C12R1/19

优先权:

专利状态码:在审-公开

法律状态:2024.06.28#公开

摘要:本发明公开了一种高产2'‑岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌及其构建方法与应用。所述方法包括对大肠杆菌进行如下方式的改造:过表达GDP‑L‑岩藻糖的从头合成途径基因,引入不同来源的岩藻糖基转移酶基因,增加futC的拷贝数,引入乳糖转运蛋白Lac12,敲除竞争途径的lacZ、wcaJ、poxB、lon基因,过表达磷酸戊糖通路PPP上的zwf、prs基因,过表达GTP再生途径基因及其上游嘌呤操纵子基因,敲除purR基因且弱化purA基因。本发明构建的产2'‑岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌在摇瓶中发酵72小时后的2′‑FL产量可达11.1gL,在5L发酵罐中发酵72h后的2′‑FL产量可达46gL。

主权项:1.一种产2′-岩藻糖基乳糖重组菌的构建方法,包括将manA基因、manB基因、manC基因、gmd基因、flc基因和futC基因导入大肠杆菌中的步骤。

全文数据:

权利要求:

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