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生产聚乳酸的基因工程菌株及生产聚乳酸的方法 

申请/专利权人:上海肆芃科技有限公司

申请日:2021-09-29

公开(公告)日:2024-06-28

公开(公告)号:CN118256415A

主分类号:C12N1/21

分类号:C12N1/21;C12N15/74;C12N15/54;C12N15/53;C12N15/52;C12P7/625;C12R1/01

优先权:

专利状态码:在审-公开

法律状态:2024.06.28#公开

摘要:本发明提供了一种生产聚乳酸的基因工程菌株,其包括:将已改性的D‑乳酸脱氢酶基因、已改性的丙酰辅酶A转移酶基因和已改性的聚羟基脂肪酸酯合酶基因合成目的基因,并优化了丙酰辅酶A转移酶的启动子、聚羟基脂肪酸酯合酶的启动子,过表达了乙酰辅酶A合酶,弱化乙酸激酶的表达,敲弱脂肪酸途径的关键酶乙酰辅酶A羧化酶、酮基合成酶、β‑酮脂酰‑ACP合酶Ⅲ的基因,得到重组质粒并导入工程菌株中得到工程细胞菌株。该工程细胞菌株采用高密度发酵策略,使得蓝细菌生物量有了提高,解决了现有技术中生产聚乳酸只能用糖来源的原料问题,有望同时解决塑料污染和温室气体二氧化碳过度排放的问题,具有非常大的潜在工业化应用价值。

主权项:1.一种生产聚乳酸的基因工程菌株,其特征在于:包括:1将已改性的D-乳酸脱氢酶基因、已改性的丙酰辅酶A转移酶基因和已改性的聚羟基脂肪酸酯合酶基因通过引物合成目的基因,将所述目的基因与载体双酶切,经纯化后,转化大肠杆菌感受态细胞,得到重组质粒;2提取所述重组质粒的DNA,并导入蓝细菌SynechococcuselongatusPCC7942中,提取,验证,得到工程细胞菌株;步骤1中,所述合成目的基因之前,进行了不同的代谢工程策略,包括优化了丙酰辅酶A转移酶的启动子、聚羟基脂肪酸酯合酶的启动子;过表达了乙酰辅酶A合酶,弱化了乙酸激酶的表达;敲弱了脂肪酸途径的关键酶乙酰辅酶A羧化酶、酮基合成酶、β-酮脂酰-ACP合酶Ⅲ的基因。

全文数据:

权利要求:

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