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申请/专利权人：宏基因组学公司
申请日：2022-11-23
公开（公告）日：2024-06-28
公开（公告）号：CN118265783A
主分类号：C12N9/22
分类号：C12N9/22;C12N15/10;C12N15/11
优先权：["20211124 US 63/282,999","20211215 US 63/289,981","20220629 US 63/356,908"]
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.28#公开
摘要：本公开提供了核酸内切酶系统，以及使用此类酶或其变体的方法，所述核酸内切酶系统源自未经培养的微生物，所述核酸内切酶系统包含小古菌相关SMART核酸酶系统。
主权项：1.一种经工程化的核酸酶系统，其包括：a核酸内切酶，所述核酸内切酶包括RuvC结构域和HNH结构域，其中所述核酸内切酶源自未经培养的微生物；以及b经工程化的向导核糖核酸结构，所述经工程化的向导核糖核酸结构被配置成与所述核酸内切酶形成复合物，所述经工程化的向导核糖核酸结构包括：i向导核糖核酸序列，所述向导核糖核酸序列被配置成与靶脱氧核糖核酸序列杂交；以及ii核糖核酸序列，所述核糖核酸序列被配置成与所述核酸内切酶结合；其中所述核酸内切酶的分子量为约96kDa或更少、约80kDa或更少、约70kDa或更少或约60kDa或更少，并且其中：1所述核酸内切酶包括精氨酸富集区或具有PF14239同源性的结构域，所述精氨酸富集区或所述具有PF14239同源性的结构域与来自SEQIDNO:1-198、221-459、463-612、617-668、674-675、975-1002、1260-1321中的任一者或其变体的精氨酸富集区或具有PF14239同源性的结构域具有至少70％、至少75％、至少80％或至少90％序列同一性；2所述核酸内切酶包括REC结构域，所述REC结构域与来自SEQIDNO:1-198、221-459、463-612、617-668、674-675、975-1002、1260-1321中的任一者或其变体的REC结构域具有至少70％、至少75％、至少80％或至少90％序列同一性；或3所述核酸内切酶包括与SEQIDNO:1-198、221-459、463-612、617-668、674-675、975-1002、1260-1321中的任一者或其变体具有至少70％、至少75％、至少80％或至少90％序列同一性的序列。
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