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一种用于靶向敲除鸡TRIM45基因的sgRNA、TRIM45敲除细胞系及其应用 

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申请/专利权人:扬州大学

摘要:本发明公开了一种用于靶向敲除鸡TRIM45基因的sgRNA、TRIM45敲除细胞系及其应用,所述sgRNA的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。本发明设计了一种特异性靶向TRIM45第一个外显子的sgRNA,通过CRISPR‑Cas9技术成功敲除鸡成纤维细胞TRIM45基因。通过检测蛋白和mRNA表达都证实敲除细胞构建成功,虽然TRIM45敲除细胞的形态未发生明显变化,但接触抑制能力明显减弱,首次获得稳定传代的TRIM45敲除的鸡源细胞系。本发明构建的TRIM45敲除细胞系,在不同感染那时间点均显著增强了ALV‑J复制水平,能够用于提高未来ALV‑J疫苗的抗原表达量。本发明构建的TRIM45敲除细胞系,也能够显著抑制IBDV的复制水平,是具有IBDV抗性表型的细胞系,为IBDV的致病机制研究和抗病毒育种提供生物材料。

主权项:1.一种用于靶向敲除鸡TRIM45基因的sgRNA,其特征在于,所述sgRNA的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 扬州大学 一种用于靶向敲除鸡TRIM45基因的sgRNA、TRIM45敲除细胞系及其应用

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