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申请/专利权人：贵州大学
摘要：本发明涉及基因编辑领域，特别是涉及一种基于CRISPR‑Cas9的大蜡螟基因编辑方法。本发明利用CRISPR‑Cas9显微注射技术建立了大蜡螟胚胎期基因编辑方法，具体为在大蜡螟卵粒中显微注射含有sgRNA和Cas9蛋白的编辑溶液，之后进行孵育和靶基因突变检测，将所得突变体与野生型大蜡螟进行交配，重复2次，再将所得突变体进行自交得到纯合突变体。本发明首次在大蜡螟上实现了基于CRISPR‑Cas9的基因编辑，并构建了基于CRISPR‑Cas9的大蜡螟突变品系，该发明填补了大蜡螟基因编辑的技术空白，同时为今后利用该技术对大蜡螟进行相关的科学研究打下了良好的基础。
主权项：1.一种基于CRISPR-Cas9的大蜡螟基因编辑方法，其特征在于，包括以下步骤：S1确定靶基因的sgRNA，并合成靶基因的sgRNA；S2收集大蜡螟卵粒，注射编辑溶液后，对所得注射卵进行孵育，得到G0代幼虫；所述编辑溶液包括所述sgRNA和Cas9蛋白；S3对所述G0代幼虫进行靶基因突变检测，得到G0代突变个体；S4将所述G0代突变个体与野生型大蜡螟进行交配得到G1代个体，并对所述G1代个体进行靶基因突变检测，得到G1代突变个体；S5重复2次步骤S4，得到G3代突变个体；S6将所述G3代突变个体进行自交后得到G4代个体，并对所述G4代个体进行靶基因突变检测，得到G4代突变个体；S7将所述G4代突变个体进行自交，得到纯合突变体。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 贵州大学 一种基于CRISPR-Cas9的大蜡螟基因编辑方法
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