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申请/专利权人：东南大学
摘要：本发明公开了基于编码Tn5转座酶的多路复用空间转录组全长测序文库的构建方法（CBTi‑seq），本发明对Tn5转座子ME核心序列末端修饰编码序列标签，通过裸酶包埋制备编码Tn5转座酶，该转座酶能够在打断dsDNA的同时，将编码添加在片段末端，从而可以将多样本的内部片段收集至单管中，统一进行测序文库构建。并且不同编码Tn5转座酶可以根据实际需要，灵活组合使用，从而实现用更低的实验成本满足更高的通量需求，并且分开发出针对单个样本和多个样本的CBTi‑seq测序文库构建流程，通过与Smart‑seq2以及3’Targeting技术比对，证明CBTi‑seq技术的优越性。
主权项：1.基于编码Tn5转座酶的多路复用空间转录组全长测序文库构建方法，其特征在于，包括以下步骤：1将Tn5转座子的ME核心序列与部分互补的Am或Bn序列通过退火结合得到产物，再通过Tn5裸酶包埋制备编码Tn5转座酶；2将样本裂解后捕获得到mRNA，然后进行逆转录和PCR扩增得到RT-PCR产物，加入步骤1得到的编码Tn5转座酶进行打断，反应结束后，加入文库扩增反应体系进行文库PCR扩增，加入磁珠进行纯化即得。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 东南大学 基于编码Tn5转座酶的多路复用空间转录组全长测序文库的构建方法
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