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申请/专利权人:天津大学
摘要:本发明公开了一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法,包括:步骤S1,以质粒pUC‑tho为模板扩增得到Ptho;步骤S2,以集胞藻6803基因组为模板扩增得到Pcpc560;步骤S3,以质粒pUC‑PAL为模板扩增得到pal;步骤S4,以质粒pUC‑cscB为模板扩增得到cscB;步骤S5,以整合型质粒Pcp3031为模板扩增得到Trbcl;步骤S6,将Pcpc560、pal、Trbcl进行融合,并与表达载体pSI‑SPE进行连接,将形成的重组表达载体转入聚球藻7942中,得到可生产反式肉桂酸的菌株7942‑PAL;步骤S7,将Ptho、cscB、Trbcl进行融合,并与表达载体pSⅡ‑CM进行连接,形成的重组表达载体转入可生产反式肉桂酸的菌株7942‑PAL中,得到光驱合成蔗糖和反式肉桂酸的菌株7942‑CP。能够仅依靠光照和CO2,就能实现蔗糖和反式肉桂酸的同时生物合成。
主权项:1.一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法,其特征在于,包括:步骤S1,以质粒pUC-tho为模板扩增得到茶碱诱导型启动子Ptho;步骤S2,以集胞藻6803基因组为模板扩增得到强启动子Pcpc560;步骤S3,以质粒pUC-PAL为模板扩增得到拟南芥苯丙氨酸裂解酶基因pal;步骤S4,以质粒pUC-cscB为模板扩增得到大肠杆菌W蔗糖转运蛋白基因cscB;步骤S5,以整合型质粒Pcp3031为模板扩增得到终止子Trbcl;步骤S6,将强启动子Pcpc560、拟南芥苯丙氨酸裂解酶基因pal、终止子Trbcl进行融合,并与表达载体pSI-SPE进行连接,将形成的重组表达载体1转入聚球藻7942中,得到可生产反式肉桂酸的菌株7942-PAL;步骤S7,将茶碱诱导型启动子Ptho、大肠杆菌W蔗糖转运蛋白基因cscB、终止子Trbcl进行融合,并与表达载体pSⅡ-CM进行连接,形成的重组表达载体2转入可生产反式肉桂酸的菌株7942-PAL中,即可得到光驱合成蔗糖和反式肉桂酸的菌株7942-CP。
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百度查询: 天津大学 一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法
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