买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：浙江大学

摘要：本发明涉及一种用于粪便和肠道内容物的87种胆汁酸的提取及定量检测的方法，旨在提供更全面的临床诊断指标，弥补现有总胆汁酸这一单指标的不足，并提供更准确可靠的定性和定量结果；通过在前处理过程中添加助剂AAA‑10，有效解决了粪便和肠道内容物样本的结合型胆汁酸水解的问题，确保了定量结果的准确性。本发明还通过巧妙运用质谱碰撞能量，采用平行反应监测pMRM策略，包括原型通道、验证通道Val和高能量通道HICE三种监测方式平行检测，实现一次进样的情况下，对极高和低浓度的胆汁酸全谱的准确定量。此外，通过优化液相色谱的条件，实现在15min的洗脱条件下，有效分离胆汁酸的所有同分异构体，本发明首次报道了牛磺α‑鼠胆酸和牛磺β‑鼠胆酸的液相色谱的基线分离。

主权项：1.一种粪便和肠道内容物的87种胆汁酸的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）在粪便和肠内容物样本中，依次加入助剂AAA-10和磁珠，匀浆；（2）将步骤（1）得到的悬浊液冷冻干燥，依次加入含稳定同位素内标的预冷提取液和磁珠，匀浆；（3）将步骤（2）得到的提取液，进行高速离心并取上清液；所述87种胆汁酸为：β-熊果胆酸、脱氢胆酸、7,12-二酮石胆酸、熊果胆酸、7-脱氢胆酸、12-脱氢胆酸、muro-胆酸、β-熊去氧胆酸、3-脱氢胆酸、β-猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、猪去氧胆酸、6-酮石胆酸、β-去氧胆酸、7-酮石胆酸、脱氢去氧胆酸、脱氢鹅去氧胆酸、23-去甲去氧胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、别石胆酸、异石胆酸、异去氧胆酸、石胆酸、脱氢石胆酸、β-胆酸、ω-鼠胆酸、α-鼠胆酸、非胆酸、β-鼠胆酸、猪胆酸、别胆酸、胆酸、β-鹅去氧胆酸、7-酮石胆酸、12-酮石胆酸、原胆酸、β-脱氢鹅去氧胆酸、β-脱氢去氧胆酸、甘氨脱氢胆酸、甘氨猪胆酸、甘氨熊去氧胆酸、甘氨猪去氧胆酸、甘氨胆酸、甘氨鹅去氧胆酸、甘氨去氧胆酸、甘氨石胆酸、牛磺脱氢胆酸、牛磺ω-鼠胆酸、牛磺α-鼠胆酸、牛磺β-鼠胆酸、牛磺猪胆酸、牛磺熊去氧胆酸、牛磺去氧胆酸、牛磺胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、牛磺去氧胆酸、牛磺石胆酸、猪胆酸-3-磺酸、胆酸-7-磺酸、熊去氧胆酸-3-磺酸、胆酸-3-磺酸、猪去氧胆酸-3-磺酸、鹅去氧胆酸-3-磺酸、鹅去氧胆酸-7-磺酸、去氧胆酸-3-磺酸、异石胆酸-3-磺酸、石胆酸-3-磺酸、甘氨猪胆酸-3-磺酸、甘氨熊去氧胆酸-3-磺酸、甘氨猪去氧胆酸-3-磺酸、甘氨胆酸-3-磺酸、甘氨鹅去氧胆酸-3-磺酸、甘氨去氧胆酸-3-磺酸、甘氨石胆酸-3-磺酸、牛磺熊去氧胆酸-3-磺酸、牛磺猪去氧胆酸-3-磺酸、牛磺胆酸-3-磺酸、牛磺鹅去氧胆酸-3-磺酸、牛磺石胆酸-3-磺酸、鹅去氧胆酸-3-葡糖苷、鹅去氧胆酸-24-葡糖苷、去氧胆酸-24-葡糖苷、去氧胆酸-3-葡糖苷、酪氨胆酸、苯丙氨胆酸、亮氨胆酸；所述助剂AAA-10具有式（1）所示的结构： 式（1）；所述预冷提取液为乙腈：甲醇：异丙醇，体积比为80:10:10。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 浙江大学 粪便和肠道内容物的87种胆汁酸的提取及定量检测方法