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申请/专利权人：浙江农林大学;杭州昌西公社农业科技有限公司

摘要：本发明公开了一种长梗黄精多糖定向酶解得到低聚糖的制备方法，包括以下步骤：1原料预处理；2粗多糖提取；3长梗黄精多糖定向酶解。本发明通过超声辅助酶法得到长梗黄精粗多糖后，采用纤维素酶或者纤维素酶和果胶酶的复合酶通过酶膜耦合反应器进行先定向酶解反应，后定向酶解联合膜过滤循环反应得到长梗黄精低聚糖，具有产率高且聚合度低、产物分布均匀的优势，克服了常规长梗黄精低聚糖提取率低、提取物质分布不均匀的缺点，并且反应条件温和易控制，操作简便，适合工业化批量生产。本发明制备得到的长梗黄精低聚糖分子量低，粘度高，水溶性好，可作为添加剂应用在食品、保健品等中，具有良好的应用前景。

主权项：1.一种长梗黄精多糖定向酶解得到低聚糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1原料预处理：将长梗黄精清洗去须并切成小块烘干，粉碎，于40-60目筛子过筛得到长梗黄精粉末；按照料液比1g:8mL-1g:10mL于长梗黄精粉末加入无水乙醇，浸泡、搅拌12-24h，抽滤，抽滤得到的固体粉末烘干至干燥状态，得到脱脂后的长梗黄精粉末；2粗多糖提取：按照料液比1g:20mL-1g:30mL将步骤1中的脱脂后的长梗黄精粉末与水混合，使用盐酸溶液调节pH为5.0-6.0，以脱脂后的长梗黄精粉末质量为基准，于50-60℃下加入1-2wt％的纤维素酶和木瓜蛋白酶的复合酶，以纤维素酶酶活为10000Ug、木瓜蛋白酶酶活为2000Umg计，纤维素酶和木瓜蛋白酶的质量比为1:1，搅拌酶解1-3h，酶解后迅速升温灭酶，灭酶后在室温、超声功率300-500W、超声频率21-22.5kHz的超声条件下超声0.5-1.5h，离心，取上清液加入3-4倍体积无水乙醇于2-8℃静置12-24h，离心，获得多糖沉淀，加水复溶，真空冷冻干燥，得到长梗黄精粗多糖粉末；3长梗黄精多糖定向酶解：将步骤2中的长梗黄精粗多糖粉末溶于水配成2-5gL的长梗黄精粗多糖溶液，离心，收集上清液过0.45μm水系微孔滤膜，得到样品溶液；将样品溶液加入酶膜耦合反应器的反应罐中，先定向酶解反应，后定向酶解联合膜过滤循环反应，反应温度为50-60℃，pH为5.0-6.0，酶膜耦合反应器的超滤系统采用的超滤膜截留分子量为1000-2000Da，进液即反应罐到超滤系统的压力为1.0-2.0MPa，具体操作如下：于反应罐中插入搅拌头开始搅拌，整个反应过程中保持搅拌，开酸泵使用盐酸溶液调节样品溶液pH为5.0-6.0，后打开温度开关控制温度至50-60℃后，以长梗黄精粗多糖粉末的质量为基准，加入1-3wt％的定向酶，所述定向酶为纤维素酶，以纤维素酶酶活为10000Ug计，或者为纤维素酶和果胶酶的复合酶，以纤维素酶酶活为10000Ug、果胶酶酶活为50000Ug计，纤维素酶和果胶酶的质量比为1:1，定向酶解反应20-40min后，打开反应罐与超滤系统相连接的硅胶管和超滤系统，反应罐与超滤系统相连接的硅胶管包括反应罐流向超滤系统的第一硅胶管和超滤系统流向反应罐的第二硅胶管，反应罐中流出的液体通过第一硅胶管进入超滤系统进行膜分离，透过超滤膜的液体收集起来，未透过超滤膜的液体即大于超滤膜截留分子量的液体通过第二硅胶管返回至反应罐继续参与定向酶解联合膜过滤循环反应，定向酶解联合膜过滤循环反应至反应罐中没有液体结束；将收集的透过超滤膜的液体真空冷冻干燥，得到长梗黄精低聚糖。

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