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申请/专利权人：南京农业大学
摘要：本发明提供了一种基于CRISPRCas12a的肉类新鲜度比色生物传感器的构建及应用；本发明通过序列挖掘获得了作为引导假单胞菌属的特异性crRNA，序列为：5'‑UAAUUUCUACUAAGUGUAGAUCUGUGUAGCGGUGAAAUGCGUAG‑3'，并采用了一种新型方式合成酶标记磁珠探针，联合制备出一套完整的检测试剂盒。基于Cas12a‑crRNA的高特异性识别切割机制和优化的比色响应方法，该检测试剂盒可精准识别3.7至8.7logCFUml范围内的假单胞菌数量，联合细菌数量和比色响应的OD值与颜色色度中的B值构建了定量假单胞菌的标准对照卡，可在1.5小时内准确评价肉类新鲜度。
主权项：1.一种基于CRISPRCas12a的肉类新鲜度比色生物传感器的构建方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：（1）以假单胞菌属的16SrRNA基因序列为靶标，确定特异性的crRNA；（2）使用磁性纳米粒子、单链DNA配体和辣根过氧化物酶合成CRISPRCas12a酶标记磁珠探针；（3）将步骤（1）获取的crRNA序列与步骤（2）获取的酶标记磁珠探针进行组合，即可。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 南京农业大学 一种基于CRISPR/Cas12a的肉类新鲜度比色生物传感器的构建及应用
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