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一种藜麦中降压活性多肽的制备方法及应用 

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申请/专利权人:河北北方学院

摘要:本发明公开了一种藜麦中降压活性多肽的制备方法及应用,该制备方法包括以下步骤:1藜麦蛋白的提取;2藜麦多肽制备;3离子交换层析;4葡聚糖凝胶SephadexG‑15分离纯化;5RP‑HPLC分离纯化,获得目的多肽。本发明通过上述技术获得具有血管紧张素转换酶ACE抑制活性的多肽。通过质谱鉴定筛选得到的四条多肽氨基酸序列均为未被报道过的新肽段。多肽具有ACE抑制活性,有助于降低血压,对于高血压患者具有潜在的辅助治疗作用。本申请的制备工艺采用的酶解条件和层析技术能够高效地从藜麦中分离出具有生物活性的多肽,提高了制备工艺的效率。

主权项:1.一种藜麦中降压活性多肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:1藜麦蛋白的提取:将藜麦打碎磨粉过60目筛,与醋酸溶液按质量体积比1:5比例混合,浸提后离心,收集上清液,旋转蒸发和冷冻干燥,得到藜麦蛋白;2藜麦多肽制备:将藜麦蛋白复溶成底物浓度为5%的溶液,加入木瓜蛋白酶,调节pH为6.2,在55.7℃下酶解3h,100℃水浴锅中灭酶10min,冷却后离心,收集上清液;3离子交换层析:使用0.002molL的Tris-Hcl缓冲液和初始缓冲液+0.3molLNaCl等度洗脱,流速3mLmin,进样量2mL,280nm波长处检测吸光度,收集各洗脱峰并测定各洗脱峰的ACE抑制率;4葡聚糖凝胶SephadexG-15分离纯化:将样品加在凝胶柱中,用超纯水进行洗脱,进样量2mL,流速3mLmin,收集各洗脱峰并测定ACE抑制率;5RP-HPLC分离纯化:使用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱,乙腈甲酸水溶液进行梯度洗脱,洗脱条件为流动相A乙腈,B含0.1%甲酸的超纯水,梯度洗脱:洗脱梯度:2%~56%B12min,56%~95%B4min,95%~95%B5min,95%~2%B2min,2%~2%B2min。检测波长280nm柱温35℃,进样量100μL,流速1mL·min-1,自动进样,手动收集各峰处的液体,组分分别浓缩,并测定ACE抑制率。

全文数据:

权利要求:

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