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申请/专利权人：江苏大学
摘要：本发明涉及一锅级联酶反应合成虎杖苷的方法，属于生物工程及生物合成技术领域。本发明首先构建表达糖基转移酶UGT109A3与大豆蔗糖合成酶GmSUS的表达载体，然后转化大肠杆菌表达得到糖基转移酶和大豆蔗糖合成酶；然后以白藜芦醇为底物和蔗糖为原料，在酶的催化下合成虎杖苷。本发明的方法利用糖基转移酶和蔗糖合酶偶联的级联反应，一锅反应合成虎杖苷，既可以很好地解决化学反应副产物环境污染等问题，又可以解决以往生物合成中利用UGT导致抑制作用这一自限制，达到高效合成虎杖苷的目的。
主权项：1.一锅级联酶反应合成虎杖苷的方法，其特征在于，所述的方法包括如下步骤：将白藜芦醇、蔗糖、UDP混合，加入Tris-HCl缓冲液，将反应体系在搅拌状态下反应一段时间，反应过程中通过分批间歇补料的方式加入糖基转移酶、蔗糖合成酶和白藜芦醇；得到虎杖苷；其中所述白藜芦醇的添加方式为将白藜芦醇溶解在DMSO中，间歇补料添加。
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