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申请/专利权人:北京鑫诺美迪基因检测技术有限公司
摘要:本发明公开了一种血液和尿液中微量DNA电化学提取方法。以丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、海藻酸钠、瓜尔胶、羧甲基木聚糖、细菌纤维素和去离子水为原料制备导电水凝胶预凝液,与玻碳电极反应制备复合电极,收集样品进行前处理得到样品处理液,将复合电极浸入样品处理液中,采用电化学工作站,对工作电极施加电刺激以捕获DNA,得到吸附DNA后的凝胶修饰电极,最后将吸附DNA后的凝胶修饰电极取出,浸入Tris溶液中,施加相反的电刺激以释放凝胶修饰电极中捕获的DNA,得到提取的DNA产物。本发明的DNA电化学提取方法可以提取人血液和尿液中微量的游离DNA,用于PCR检测的样品。
主权项:1.一种血液和尿液中微量DNA电化学提取方法,其特征在于,按照如下步骤进行:1制备导电水凝胶预凝液:将丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、海藻酸钠、瓜尔胶、羧甲基木聚糖、细菌纤维素和去离子水加入到容器中混合,搅拌混匀6min~12min,加入过硫酸铵,搅拌混匀6min~12min,最后加入四甲基乙二胺混匀,制成导电水凝胶预凝液;2制备复合电极:将戊二醛水溶液滴到玻碳电极上反应,得到交联后的玻碳电极,将步骤1制备的导电水凝胶预凝液滴到交联后的玻碳电极表面反应,得到复合电极;3收集样品,将样品进行前处理,得到样品处理液;4将步骤2制备的复合电极浸入步骤3得到的样品处理液中,搅拌后,采用电化学工作站,对工作电极施加恒定电刺激以捕获DNA,得到吸附DNA后的凝胶修饰电极;5将步骤4吸附DNA后的凝胶修饰电极取出,浸入Tris溶液中,施加与步骤4相反的恒定电刺激以释放凝胶修饰电极中捕获的DNA,得到提取的DNA产物。
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