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一种呼吸道病毒多联检核酸快速检测方法及试剂盒 

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申请/专利权人:南京迪飞医疗器械有限公司;迪飞医学科技(南京)有限公司

摘要:本发明涉及一种呼吸道病毒多联检核酸快速检测方法及试剂盒,属于病原体检测技术领域。本发明筛选分析来自世界各地的上千个甲、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒基因组,设计可兼容甲型流感病毒H1N1H3N2、乙型流感病毒YV系、呼吸道合胞病毒AB亚型、腺病毒BE亚属的特异性引物探针序列,通过调试RAPID反应,实现引入人源内参控制采样准确性与病原同时检测的多联检检测体系,通过结合同时检测三种分子标记的胶体金侧向流试纸条,实现单一反应多联检扩增后产物的可视化检测。

主权项:1.一种用于重组酶等温扩增检测的引物组,其特征在于,其中包含有用于扩增甲、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒的靶标区域的引物对,引物对包括如下引物:用于扩增甲型流感病毒的靶标区域的引物对,其核苷酸序列分别是:TCAGGCCCCCTCAAAGCCGAGATCGCGCAG;CAAAGCGTCTACGCTGCAGTCCTCGCTCACT;用于扩增乙型流感病毒的靶标区域的引物对,其核苷酸序列分别是:AATGCTCAGTAATTGTCCACCAGGAGGGATCAG;GGCTGTCTCTGGTTATTCTTTCAGTCATAGCCA;用于扩增呼吸道合胞病毒的靶标区域的引物对,其核苷酸序列分别是:ACATTTGATAACAATGAAGAAGAATCTAGC;TTCTATCATTTCTTCTCTTAGACCAACCAT;用于扩增腺病毒的靶标区域的引物对,其核苷酸序列分别是:CGGATCTTTCCAACCCTGTATGCCATCTTCCAG;GTACTTGTTGAAGAGAGCCTCGGCGTCCTCAAG;所述的引物组中还包括对人源内参RNaseP进行扩增的引物对,其核苷酸序列分别是:TCCACATCCGAGTCTTCAGGGTCACACCCAA;ATATGGCAATAGTTACAGACCGCATACACAC;其中还包括:用于特异性显示甲型流感病毒的探针,其核苷酸序列是:5'FAM-GATCTTGAGGCTCTCATGGAATGGCTAAAGACAidSpGACCAATCTTGTCACCT-C3Spacer;用于特异性显示乙型流感病毒的探针,其核苷酸序列是:5'TAMRA-ATGACTGTGACAGGAGACAATACTAAATGGAATidSpAATGCTTAAATCCAAG-C3Spacer;用于特异性显示呼吸道合胞病毒的探针,其核苷酸序列是:5'TAMRA-GATAATATAACAGCAAGATTAGATAGGATTGATGAidSpAAATTAAGTGAAATA-C3Spacer;用于特异性显示腺病毒的探针,其核苷酸序列是:5'FAM-TCGCTCACCAGAAGTTGTTTGTATCACAAGAGCidSpAAGATCAACTTCAGCGC-C3Spacer;用于特异性显示人源内参RNaseP的探针,其核苷酸序列是:5'DIG-TCCGTGATATGGCTCTTCGCATGCTGAGTACTGGidSpCCTCGGACCAGAGCCA-C3Spacer。

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