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申请/专利权人：深圳华大生命科学研究院

摘要：确定多种物质与细胞作用关系的方法，包括：提供第一液滴、第二液滴、第三液滴和微井阵列芯片，微井阵列芯片上有多个微井组合，每个微井组合包括一个大微井110和多个与大微井110相邻且连通的小微井120，大微井110的孔径大于小微井120的孔径S100；先将第二液滴加入微井阵列芯片内并落入大微井110内，再将第一液滴加入微井阵列芯片内并落入多个小微井120内S200；使第一液滴和第二液滴发生融合，将微井阵列芯片进行细胞培养S300；细胞培养完成后，将第三液滴加入空出的小微井120内，第三液滴将与细胞培养后的第一融合液滴发生融合，得到第二融合液滴S400；将第二融合液滴进行破乳，收集磁珠，将磁珠上携带的核酸进行建库和测序，基于测序结果确定多种物质与细胞作用关系S500。

主权项：一种确定多种物质与细胞作用关系的方法，其特征在于，包括：1提供第一液滴、第二液滴、第三液滴和微井阵列芯片；其中，所述第一液滴为含有多个不同分子编码液滴的混合液滴，所述第二液滴为含有单个细胞的液滴，所述第三液滴为含有单个测序磁珠、细胞裂解液和断裂试剂的液滴，每个所述分子编码液滴中含有一种物质及与其匹配的编码核酸分子和索引磁珠，所述微井阵列芯上有多个微井组合，每个所述微井组合包括一个大微井和多个与所述大微井相邻且连通的小微井，所述大微井的孔径大于小微井的孔径；2先将所述第二液滴加入所述微井阵列芯片内并落入大微井内，再将所述第一液滴加入所述微井阵列芯片内并落入多个小微井内；3使所述第一液滴和第二液滴发生融合，得到第一融合液滴，所述第一融合液滴占据在所述大微井内，所述小微井空出，将所述微井阵列芯片进行细胞培养；4所述细胞培养完成后，将所述第三液滴加入所述空出的小微井内，将所述第三液滴与所述细胞培养后的第一融合液滴发生融合，在所述第三液滴中的细胞裂解液作用下发生细胞破裂，细胞内的核酸分子与所述编码核酸分子一同被测序磁珠所捕获，同时，在所述第三液滴中的断裂试剂作用下所述索引磁珠上的索引序列将断裂下来，也被测序磁珠所捕获，得到第二融合液滴，收集所述第二融合液滴；5将所述第二融合液滴进行破乳，收集测序磁珠，将所述测序磁珠上携带的核酸和索引序列进行建库和测序，基于测序结果确定多种物质与细胞作用关系。

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