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申请/专利权人：黄淮学院
摘要：本发明涉及一种FGF21基因缺失斑马鱼的构建方法及应用，属于动物模型领域。野生型斑马鱼中FGF21蛋白含有194个氨基酸，而FGF21基因缺失斑马鱼中仅含95个氨基酸。FGF21基因缺失斑马鱼表型为幼鱼期延迟发育进度、成鱼期肝脏发育缺陷。相对于现有技术，本发明通过CRISPRCas9技术成功敲除了斑马鱼的FGF21基因，并通过遗传筛选获得了能够稳定遗传的F3代纯合子突变体，表型可模拟人类疾病的病症，进而用于研究分子遗传病的病理机制、筛选治疗疾病的化学药、开发基因治疗的生物药。
主权项：1.一种肝脏发育缺陷或早期发育迟缓的斑马鱼模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：1）根据CRISPRCas9，在FGF21基因第3外显子确定了FGF21基因的靶点，序列为5’GGAGCTGCGTTCAGTCAAAG3’，在靶点序列前端添加启动子序列，在靶点后端添加gRNA识别序列，合成FGF21-gRNA序列；2）对FGF21-gRNA进行体外转录，提取纯化；3）将纯化的FGF21-gRNA和Cas9蛋白显微注射至斑马鱼一细胞期的胚胎，培养获得FGF21纯合子突变体；所述的肝脏发育缺陷或早期发育迟缓的斑马鱼模型是通过CRISPRCas9靶向基因敲除斑马鱼FGF21基因的3号外显子第217号碱基A得到的。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 黄淮学院 一种FGF21基因缺失斑马鱼的构建方法及应用
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