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申请/专利权人:广东省农业科学院果树研究所
摘要:本发明属于植物育种和基因工程技术领域,具体涉及一种高效快捷的南方常见果树遗传转化方法。本发明首先将含有目的基因和报告基因的表达载体转入发根农杆菌,重悬后制成用于侵染的浸润液,然后在果树上选取活体枝条或树干,环割形成环形创面后,用浸润液侵染创面,最后包裹处理的伤口遮光培养,直至创面处长出表达报告基因的转基因根。通过本发明的方法可以在荔枝、龙眼、柑橘、芒果等南方常见果树的枝条上实现遗传转化。同时,本发明方法完全不依赖植物组织培养,且突破了依赖种子进行遗传转化的限制。另外,本发明方法操作难度低、转化效率高,为南方常见果树的选育和品种改良提供了重要的研究手段。
主权项:1.一种高效快捷的南方常见果树遗传转化方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、将含有目的基因的表达载体转入发根农杆菌并活化,所述表达载体中还含有报告基因;S2、用农杆菌侵染液重悬含目的基因的发根农杆菌,将OD600调节至0.4-0.8,并将pH调至5.6-5.8,得到用于侵染的浸润液,所述农杆菌侵染液由MS、乙酰丁香酮和SilwetL-77组成;S3、在果树上选取活体枝条或树干,环割枝条或树干,并清除部分形成层形成环形创面;S4、吸取S2的浸润液侵染S3的创面,然后包裹处理后的伤口遮光培养,直至创面处长出表达报告基因的转基因根。
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权利要求:
百度查询: 广东省农业科学院果树研究所 一种高效快捷的南方常见果树遗传转化方法
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