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外泌体在胸主动脉夹层/动脉瘤中的作用 

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申请/专利权人:苏州大学

摘要:本发明涉及生物医学领域,特别涉及外泌体在胸主动脉夹层动脉瘤中的作用。正常小鼠组在30天内的生存率是100%,使用BAPN药物诱导小鼠建立主动脉夹层动脉瘤组的生存率在第三周初时开始降低,到实验周期4周时,总体生存率维持在50%,而在此基础上,注射外泌体组,我们可以看到小鼠生存率在第三周后略微降低,到实验周期4周时,生存率维持在70%。由以上数据,我们可以得出注射外泌体后,显著延缓了胸主动脉夹层动脉瘤的发生。

主权项:1.外泌体在制备预防、延缓和或治疗胸主动脉夹层动脉瘤的药物或制剂中的应用;所述外泌体的构建方法包括如下步骤:步骤1:将处于对数生长期、生长状态良好的UMSC细胞,与胎牛血清混合后离心,去除先前存在于血清中的外泌体,使用含有10%不含外泌体胎牛血清的α-MEM培养基培养48h,待细胞密度达到90%时收集培养基的上清,传代;步骤2:取步骤1收集的所述上清,离心,除去死的细胞和碎片,收集上清;步骤3:取步骤2收集的所述上清,与外泌体分离试剂混匀后4℃条件下抽提24h,获得抽提液;步骤4:取步骤3获得的抽提液离心,收集沉淀,经PBS重悬,测定外泌体的浓度;将测好浓度的外泌体置于-80℃超低温保存;步骤1中所述离心具体为:以110000g的速度离心7h;步骤2中所述离心具体为:以2000g的速度离心30min;步骤4中所述离心具体为:4℃,以13000g的速度离心1h;步骤3中所述外泌体分离试剂包括PEG4000;所述外泌体分离试剂与所述上清的体积比为1:2;所述外泌体的施用方式为内眦静脉施用,每次施用剂量100μL,每周注射3次;所述胸主动脉夹层动脉瘤动物模型的诱导剂为β-氨基丙腈BAPN;所述胸主动脉夹层动脉瘤动物模型的构建方法中,第一周和第二周BAPN浓度为6mgmL,第三周和第四周BAPN浓度增大至8mgmL。

全文数据:

权利要求:

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