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一种酸稳定性和可溶表达量提高的羧肽酶A突变体 

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申请/专利权人:中国农业大学

摘要:本发明涉及酶工程技术领域,具体涉及一种酸稳定性和可溶表达量提高的羧肽酶A突变体。本发明通过计算机辅助设计,对现有牛胰腺羧肽酶A的氨基酸序列PDBID:1M4L进行分子改造,获得突变体L203H。本发明制备的突变体L203H具有OTA降解活性,72h内在pH6.0下对1μgmL的OTA降解率为98.76%。与现有野生型羧肽酶A相比,该突变体的最适pH从8.0降到6.0,可溶表达量从5.25mgmL提高到16.56mgmL,有效地提高了其酸稳定性和可溶表达量,在食品农产品以及饲料的脱毒领域中具有广阔的应用前景。

主权项:1.一种酸稳定性和可溶表达量提高的牛胰腺羧肽酶A突变体,其特征在于,以氨基酸序列SEQIDNo.1所示的牛胰腺羧肽酶A为亲本酶,至少发生以下三种序列修饰中的一种,将第203位的亮氨酸突变为组氨酸,在氨基酸序列SEQIDNo.1的N端添加小分子泛素相关修饰物SUMO促溶标签的氨基酸序列SEQIDNo.2,在氨基酸序列SEQIDNo.1的C端添加10个长度的His纯化标签,最终完整的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国农业大学 一种酸稳定性和可溶表达量提高的羧肽酶A突变体

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