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申请/专利权人:江南大学
摘要:本发明公开了核酸编辑工具及其应用,属于基因工程和生物诱变技术领域。本发明基于RNA聚合酶在转录过程中解旋dsDNA,将胞苷脱氨酶pmCDA1、尿嘧啶糖基化酶抑制剂UGI逐步与RNA聚合酶融合,构建高效诱变质粒,将pmCDA1、UGI定位在瞬时ssDNA周围,实现C→T碱基转换,最终使谷氨酸棒杆菌基因组突变率提高3157.38倍。本发明构建的高效诱变质粒成功用于筛选耐受氧化应激的谷氨酸棒杆菌突变株,也对筛选其他抗压力胁迫突变体具有重要指导意义。由于RNA聚合酶的高度保守性,这种方法很容易应用在其他谷氨酸棒杆菌亚种或其他微生物中。
主权项:1.一种核酸编辑工具,其特征在于,所述核酸编辑工具包括以下组件:a胞苷脱氨酶;bRNA聚合酶亚基;所述RNA聚合酶亚基选自RNA聚合酶的α、β、β’亚基中的至少一种;所述胞苷脱氨酶通过第一连接肽与所述RNA聚合酶亚基连接组成融合蛋白。
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百度查询: 江南大学 核酸编辑工具及其应用
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