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申请/专利权人：上海交通大学
摘要：本发明公开了一种基于通用碱基的新型DNA酶促从头合成方法。本发明提供了一种人工DNA从头合成的方法，包括：制备生物素修饰的由通用碱基序列和特定碱基序列组成的DNA模板和互补引物；所述互补引物与所述特定碱基序列反向互补；将生物素修饰的DNA模板和链霉亲和素磁珠结合；将互补引物退火到DNA模板上，作为引发链；利用能识别通用碱基为模板的DNA聚合酶进行DNA酶促合成反应；期间，使用经修饰的dNTP进行可逆终止反应，控制合成的DNA序列；反应完成后，将酶促合成产物从DNA模板上剥离下来；检测。本发明所提供的人工DNA从头合成的方法是使用有模板聚合酶的酶促合成方法，可以极大的增加合成效率和降低合成成本。
主权项：1.一种人工DNA从头合成的方法，包括如下步骤：（A1）制备带有生物素修饰的DNA模板和互补引物；所述DNA模板是自5’端到3’端依次为通用碱基序列和特定碱基序列的单链核苷酸；所述互补引物为能够与所述特定碱基序列反向互补的单链核苷酸；（A2）将所述带有生物素修饰的DNA模板和链霉亲和素磁珠结合；（A3）将所述互补引物退火到与链霉亲和素磁珠结合的所述DNA模板上，得到进行酶促反应的引发链；（A4）在所述引发链基础上，利用能够识别通用碱基为模板的DNA聚合酶进行有模板的DNA酶促合成反应；期间，所使用的dNTP为经修饰的dNTP；通过使用所述经修饰的dNTP进行可逆终止反应，从而控制合成的DNA序列；（A5）反应完成后，将酶促合成产物从所述DNA模板上剥离下来；（A6）检测所述酶促合成产物。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 上海交通大学 一种基于通用碱基的新型DNA酶促从头合成方法
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