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申请/专利权人:杭州佰辰医学检验所有限公司
摘要:本发明涉及一种血管紧张素检测试剂盒及其制备方法,所述试剂盒包括校准品、质控品、内标储备液、内标稀释液和淋洗液、流动相储备液、洗脱液、吸附剂和孵育液,所述校准品、质控品内分别加有血管紧张素稳定剂,所述洗脱液和血管紧张素稳定剂分别为含氨基酸的酸性溶液;所述吸附剂为特异性磁微粒吸附剂。本发明能使血管紧张素更加稳定,经检测母液、校准品、内标和质控品的稳定性可达到一年以上,无需频繁配置,易于生产和保存;同时,本发明可高效自动化和特异性的分离和提纯血样中的血管紧张素,具有提取回收率高、检测下限低、方法准确性和精密度高、无需使用对人体和环境有害的有机试剂等特点。
主权项:1.一种血管紧张素检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括校准品、质控品、内标储备液、内标稀释液和淋洗液、流动相储备液、洗脱液、吸附剂和孵育液,所述校准品、质控品内分别加有血管紧张素稳定剂,所述洗脱液和血管紧张素稳定剂分别为含氨基酸的酸性溶液;所述吸附剂为特异性磁微粒吸附剂;所述校准品为:加有血管紧张素稳定剂的若干个浓度的血管紧张素I和II;质控品为:加有血管紧张素稳定剂的若干个浓度的血管紧张素I和II;内标储备液为:1.2~3.5μgmL血管紧张素I-13C6,15N、0.45~0.95μgmL血管紧张素II-13C6,15N;内标稀释液和淋洗液为:PBS缓冲液,pH6.8-7.4;流动相储备液为:1~10mmolL乙酸铵、体积分数为5~20%的甲酸水溶液;吸附剂为:特异性磁微粒吸附剂,其以硅胶或磁微粒为基质,键合相结构为: ,X为包含羧基、磺酸基、亚磺酸基、硫羧酸基或酚羟基中的一种;硅胶颗粒或磁微粒粒径为1~100μm;孵育液包括孵育液A和孵育液B,孵育液A为:80~120mmolL苯甲基磺酰氟;孵育液B为:107.6~137.8gL三羟甲基氨基甲烷、64~86gL乙二胺四乙酸,加入冰乙酸调pH4.0~5.5;所述氨基酸为苯丙氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、色氨酸、组氨酸、赖氨酸、精氨酸中的一种或二种以上任意组合,浓度为0.1~10mmolL;酸为三氟乙酸、甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸中的一种,体积分数为0.1~10%。
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