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申请/专利权人：苏州新芽基因生物技术有限公司
摘要：本发明提供了一种抑制残留AAV载体质粒和质粒骨架转录活性的方法。具体的，本发明提供了一种包含转录抑制元件的核酸构建体，其中所述转录抑制元件通过抑制AAV载体质粒中ITR的转录活性，用于抑制AAV载体质粒残留和质粒骨架反向包装所产生的转录产物。还提供了包含所述核酸构建体的重组AAV载体质粒，以及使用所述重组AAV载体质粒制备得到的AAV产品。本发明从根源上解决了AAV产品中的质粒残留和质粒反向包装导致的非特异转录以及未知转录产物的翻译带来的安全性风险。
主权项：1.一种核酸构建体，其特征在于，所述核酸构建体包含转录抑制元件，所述转录抑制元件通过抑制AAV载体质粒中ITR的转录活性，用于抑制AAV载体质粒残留和质粒骨架反向包装所产生的转录产物；所述核酸构建体从5'端至3'端具有如下式I所示的结构：Y1-5'ITR-Y2-Z1-Y3-3'ITR-Y4I式中，Y1，Y2，Y3，Y4各自独立地为无或转录抑制元件，且Y1，Y2，Y3，Y4不同时为无，Y1和Y4不同时为无；其中，Y2和Y4为正向的转录抑制元件，Y1和Y3为反向的转录抑制元件，所述反向的转录抑制元件为所述正向的转录抑制元件的反向互补序列；Z1为目的基因表达盒，其包括一个或多个启动子序列和一个或多个目的基因编码序列；“-”各自独立地为连接序列，其中，“Y1-5'ITR-Y2”和“Y3-3'ITR-Y4”区段中所述连接序列的长度为0-150nt；其中，所述转录抑制元件为含有终止密码子的polyAsignal加尾信号序列；并且，所述含有终止密码子的polyAsignal加尾信号序列从5'端至3'端具有如下式A所示的结构：S-PA其中，S为终止密码子序列；P为polyAsignal加尾信号序列，“-”为磷酸二酯键。
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权利要求：
百度查询： 苏州新芽基因生物技术有限公司 一种抑制残留AAV载体质粒和质粒骨架转录活性的方法
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