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申请/专利权人:觅瑞(杭州)生物科技有限公司;杭州觅因生物科技有限公司
摘要:本发明公开了一种改进的miRNAqPCR检测方法,通过配置miRNA检测体系,并按照下列反应程序依次进行反应:miRNA逆转录步骤,将miRNA样本逆转录合成cDNA;DNA聚合酶热启动步骤,激活DNA聚合酶;低温退火延伸步骤,使正向引物与cDNA结合;PCR循环步骤,完成DNA扩增。本发明在常规qPCR程序的步骤下增加低温退火延伸步骤,来解决常规qPCR程序正向引物与cDNA结合效率低的问题,本发明开发的miRNA检测通用程序显著提高了miRNA检测性能,检测灵敏度大幅度提升。
主权项:1.一种改进的miRNAqPCR检测方法,其特征在于,所述检测方法包括配置miRNA检测体系,然后按照下列反应程序依次进行反应:(1)miRNA逆转录步骤,将miRNA样本逆转录合成cDNA;(2)DNA聚合酶热启动步骤,激活DNA聚合酶;(3)低温退火延伸步骤,使正向引物与cDNA结合;(4)PCR循环步骤,完成DNA扩增。
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