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申请/专利权人：宁波大学

摘要：本发明公开了一种铜铁纳米酶介导的胆固醇氧化酶紫外比色生物传感方法及其应用，具体步骤如下：1通过简单的溶剂热法一步合成了具有过氧化酶活性的Cu‑CuFe2O4纳米酶；2显色底物为3,3’,5,5’‑四甲基联苯胺TMB时，在Cu‑CuFe2O4纳米酶的作用下，TMB被H2O2氧化形成蓝色的oxTMB，在652nm处有最大吸光度，吸光度随着H2O2浓度的增加而变大，因此，基于Cu‑CuFe2O4纳米酶的比色生物传感方法可以用于H2O2选择性分析；3COD氧化胆固醇的过程中会生成H2O2，而Hg2+会抑制这一进程，间接实现对胆固醇Cholesterol和胆固醇氧化酶COD的分析检测。基于以上方面，构建了一种基于Cu‑CuFe2O4纳米酶的H2O2、Cholesterol和COD比色生物传感器，具有操作简便、成本低廉、特异性好、灵敏度高等优点。

主权项：1.一种铜铁纳米酶介导的胆固醇氧化酶紫外比色生物传感方法及其应用，其机理如下：本发明采用简单的溶剂热法一步合成了具有过氧化酶活性的Cu-CuFe2O4纳米酶，在它存在的前提下，TMB被H2O2氧化形成蓝色的oxTMB，在652nm处有最大吸光度，且在恒定TMB浓度下吸光度随着H2O2浓度的增加而变大，因此，基于Cu-CuFe2O4纳米酶的比色生物传感方法可以用于H2O2选择性分析；其次，以H2O2-TMB显色反应为基础，胆固醇Cholesterol在胆固醇氧化酶COD的存在下被氧化以产生H2O2，在一定浓度CODCholesterol的存在下，CholesterolCOD的水平决定了产生的H2O2的含量，通过oxTMB吸光度的强弱作为信号输出，可以获得一系列不同浓度的CholesterolCOD对应的吸光度。最后，当加入抑制剂Hg2+时，COD活性被抑制，无法氧化Cholesterol生成H2O2，实现了COD抑制剂的筛选。通过UV-vis测定，可以建立吸光度与H2O2、Cholesterol、COD或Hg2+浓度之间的定量关系，根据两者之间的关系，可以确定待测样品中H2O2、Cholesterol、COD或Hg2+的含量，实现了对H2O2、Cholesterol、COD或Hg2+的分析检测。基于以上，构建了一种简单、高灵敏、高选择性的H2O2、Cholesterol、COD或Hg2+紫外比色分析方法。

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