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申请/专利权人:成都蓉生药业有限责任公司
摘要:本发明属于生物技术领域,具体涉及一种BaEV包膜假型慢病毒的纯化方法。该纯化方法包括如下步骤:(1)浓缩BaEV包膜假型慢病毒澄清液,离心,弃上清,得到慢病毒沉淀;(2)将慢病毒沉淀用缓冲液重悬,加入全能核酸酶酶切,得到粗纯样品;(3)将粗纯样品经层析纯化,得到精纯样品;(4)将精纯样品进行超滤浓缩,除菌,得到纯化后的BaEV包膜假型慢病毒。利用本发明方法纯化得到的BaEV包膜假型慢病毒的感染滴度和滴度回收率明显提高,能够有效降低宿主细胞蛋白、宿主细胞DNA以及内毒素残留。本发明纯化方法在有效去除杂质的同时不影响纯化后慢病毒活性,可用于制备高滴度和高纯度的BaEV假型慢病毒产品。
主权项:1.一种BaEV包膜假型慢病毒的纯化方法,其特征在于,所述纯化方法包括如下步骤:步骤1:浓缩BaEV包膜假型慢病毒澄清液,离心,弃上清,得到慢病毒沉淀;步骤2:将慢病毒沉淀用缓冲液重悬,加入全能核酸酶酶切,得到粗纯样品;步骤3:将粗纯样品经层析纯化,得到精纯样品;所述层析为MustangQXT膜层析囊式滤器层析或DEAE纤维素层析;步骤4:将精纯样品进行洗滤浓缩,除菌,得到纯化后的BaEV包膜假型慢病毒。
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