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申请/专利权人：广东美味鲜调味食品有限公司

摘要：本发明公开了一种检测含淀粉食品及其生产原料对淀粉破坏力的方法，包括以下步骤：1制备糊化淀粉液；2样品处理；3培养；4显色；5镜检计数；6标准曲线的绘制；7结果报告。本发明方法可以良好消除干扰、显著提高灵敏度、量化评估淀粉酶含量、同步评估常温与中高温破坏力、应用范围广泛。

主权项：1.一种检测含淀粉食品及其生产原料对淀粉破坏力的方法，其特征在于，包括以下步骤：1制备糊化淀粉液采用无菌操作，取糊化淀粉用无菌纯水配成淀粉浆，在80℃～90℃加热10～25min后稀释制成糊化淀粉占比为1～3wt％的糊化淀粉液；2样品处理对于含淀粉食品，采用无菌操作，称取样品，加1～3质量倍纯水稀释并混匀后高速离心，取上清液作为下一步培养用样；对于淀粉类型的生产原料，采用无菌操作，先参照生产加工条件制成预处理淀粉糊，再称取淀粉糊，加1～3质量倍纯水稀释并混匀后高速离心，取上清液作为下一步培养用样；对于非淀粉类型的生产原料，采用无菌操作，先参照生产加工条件制成预处理原料样，再作为下一步培养用样；3培养采用无菌操作，向两个培养瓶中分别加入20～100g步骤2中制备的培养用样，再各加入0.3～2.0g步骤1中制备的糊化淀粉液，加盖，混匀，制成待培养液，在25±2℃和46±2℃培养箱中各放入一瓶待培养液，培养36～48h，同时用纯水替代培养用样进行空白培养，培养期间，间歇式充分摇匀样品2～3次；4显色向步骤3的每个培养瓶中分别加入0.8～3mL碘溶液，混匀，显色，然后高速离心，弃去上层清液，保留管底余液和沉淀物，用吸管反复吸放，将管内余物混匀，作为镜检用液；5镜检计数取步骤4的镜检用液制片，用显微镜观察其中的淀粉颗粒的形态并计数，呈正常皱缩形态的计为未变形粒，呈包括舒展、膨胀、变薄透、碎裂的已变形态的计为变形粒，已经消溶无完整粒的计为完全酶解，计算变形粒占比X％与x％，x＝X-X0，X％与X0％分别为样品培养和空白培养的变形粒占比，要求对三个以上的视野进行统计，用于统计的淀粉颗粒合计数不少于1000个，空白培养液的变形粒占比X0％＜2.0；6标准曲线的绘制以无菌操作，用耐高温α-淀粉酶原液制备淀粉酶水溶液，添加至无酶基底样中，制成系列浓度的加酶样，按步骤1～5操作，在46±2℃培养后镜检计算变形粒占比，以加酶样中淀粉酶含量yppb与对应的变形粒占比x％制作标准曲线，得出回归方程，相关系数R要求≥0.99，亦即R2要求≥0.98；7结果报告进行样品检测时，将变形粒占比x％代入回归方程，按回归方程计算出相当的耐高温α-淀粉酶含量报告样品对淀粉破坏力。

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