申请/专利权人：北京百普赛斯生物科技股份有限公司

申请日：2020-12-23

公开（公告）日：2021-01-22

公开（公告）号：CN112255420A

主分类号：G01N33/68(20060101)

分类号：G01N33/68(20060101);G01N33/569(20060101);G01N21/45(20060101);G01B11/06(20060101)

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2021.03.05#授权;2021.02.09#实质审查的生效;2021.01.22#公开

摘要：本发明提供一种利用BLI技术检测新型冠状病毒中和性抗体的方法，先将同一浓度的人ACE2蛋白捕获到生物传感器表面上，再将新型冠状病毒棘突蛋白RBD分别与不同浓度的待测中和性抗体预混，再将各混合液分别与捕获到生物传感器表面上的人ACE2蛋白接触，根据基于BLI技术的分子互作仪器检测到的干涉光谱的相对位移强度变化计算抑制率，绘制抑制曲线，计算IC50。本发明操作简单，快速高效，检测全过程无需包被和反复加样、洗板，15min内即可得到实验结果。检测反应在黑色孔板中进行，可实现大批量样品的新冠中和抗体的检测，与传统定性检测不同，通过计算IC50值，可以快速比较不同新冠中和性抗体的抑制能力。

主权项：1.利用BLI技术检测新型冠状病毒中和性抗体的方法，其特征在于，先将同一浓度的人ACE2蛋白捕获到生物传感器表面上，再将新型冠状病毒棘突蛋白RBD分别与不同浓度的待测中和性抗体预混，得到不同浓度的混合液，然后将各混合液分别与捕获到生物传感器表面上的人ACE2蛋白接触，根据基于BLI技术的分子互作仪器检测到的干涉光谱的相对位移强度变化来检测新型冠状病毒中和性抗体的抑制效率；通过计算抑制率，绘制抑制曲线，计算IC50值，从而比较不同新冠中和性抗体的抑制能力；基于BLI技术的分子互作仪器的检测参数设置如下：运行以下程序：①Baseline60-180s，基线步骤；②Loading180-300s，传感器捕获人ACE2蛋白；③Baseline260-180s，基线步骤；④Association180-300s，传感器上的ACE2蛋白结合预混的新冠棘突蛋白RBD和新冠中和性抗体，检测此步骤最终的结合信号；⑤Dissociation0-20s，解离步骤；转速：1000rpm；运行温度：30℃；采集频率：Standardkinetics5.0Hz，averagingby20；人ACE2蛋白溶液的浓度为2-10μgmL，按每孔200μL加入到分析样品阵列孔中；将50-100nM待测中和性抗体溶液按1.5-2倍浓度梯度稀释，然后将不同浓度的待测中和性抗体溶液分别与50nM新型冠状病毒棘突蛋白RBD溶液按等体积混合，得到不同浓度的混合液，然后将各混合液按每孔200μL分别加入到分析样品阵列孔中。

全文数据：

权利要求：

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