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申请/专利权人：浙江海洋大学

摘要：本发明涉及安康鱼皮多肽技术领域，针对以海洋鱼类为原料制备的多肽的分子量较大且含苦腥味的问题，本发明提供一种安康鱼皮肽的制备方法，将安康鱼皮经脂肪酶与异丙醇配合脱脂，并经高温煅烧贻贝粉脱除腥臭味，协同脱除免疫调节肽的苦腥味，然后经酸性环境、脉冲电场和硼氢化钠、醋酸硼氢化钠协同削弱鱼皮蛋白分子间的交联程度，强化鱼皮蛋白的溶胀，然后再经对鱼皮蛋白分解作用弱的蛋白提取酶分离提取鱼皮蛋白，然后利用专一性高的蛋白分解酶分解鱼皮蛋白制成安康鱼皮肽，分子量在1000～3500Da的比重高，与鱼皮蛋白相比，收率可达78wt%左右，分子量均匀，而且无苦腥味，鱼皮利用率高，并免疫活性高，可应用在免疫调节方面。

主权项：1.一种安康鱼皮肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将回收的安康鱼的鱼皮下脚料清洗干净、剪片，然后脱脂处理；（2）将脱脂后鱼皮投入分散有高温煅烧贻贝粉的水中浸没、脱味，然后过筛、冲洗回收鱼皮；（3）把鱼皮加入到水中浸泡，并加酸液调节pH值为3.8～5.2，施加低压脉冲电场；（4）过筛鱼皮、匀浆，然后加入蛋白提取酶和10～15倍重量的水混合，搅拌酶解，离心分离上清液得到鱼皮蛋白液，然后灭酶活性；（5）向鱼皮蛋白液中加入蛋白分解酶处理、灭酶活性、然后经超滤膜截留分子量1000～3500Da的多肽分子得到安康鱼皮肽；步骤（2）中高温煅烧贻贝粉经以下过程制成：将贻贝壳清洗干净后粉碎至60～80目，然后与碳酸钠、硅烷偶联剂按质量比1:0.03～0.05:0.1～0.2混合在1200～1300℃煅烧3～5h，降温后加入到0.05～0.1wt%的黄原胶水溶液中，并加入贻贝壳质量0.07～0.1wt%的胡敏素分散均匀，然后浓缩并冷冻干燥得到高温煅烧贻贝粉；步骤（3）中的低压脉冲电场的电压为80～100V，频率为40～50Hz；步骤（4）中蛋白提取酶为胰凝乳蛋白酶或曲霉菌丝氨酸蛋白酶，添加的蛋白提取酶的酶活力为5000～10000Ug，添加量为鱼皮的1～3wt%，提取时间8～12h，提取温度50～60℃；步骤（5）中蛋白分解酶为胃蛋白酶，酶活力为30000～50000Ug，添加量为鱼皮蛋白液的3～7wt%，分解的pH值为2～4，分解温度为40～50℃，分解时间3～5h。

全文数据：一种安康鱼皮肽的制备方法及所制备的安康鱼皮肽的免疫调节应用技术领域本发明涉及安康鱼皮多肽技术领域，具体涉及一种安康鱼皮肽的制备方法及所制备的安康鱼皮肽的免疫调节应用。背景技术具有免疫调节活性的多肽可通过影响免疫器官生长发育、免疫细胞活性与功能以及免疫分子表达、合成和释放而参与机体特异性和非特异性免疫功能的调节，对维持机体免疫功能正常和健康具有重要作用。一般多肽的分子量越小，免疫调节活性越高。目前具有免疫调节活性的多肽的获得依靠化学合成、DNA重组表达以及从生物体组织器官中提取等途径。其中海洋生物资源中富含免疫调节的活性肽，多有从鳕鱼、大马哈鱼、黄姑鱼等提取多肽的研究。但是具体的提取过程还存在若干问题，比如海洋鱼类体内具有的腥臭味使提取的肽带有苦味或者苦腥味，同时直接采用酶提取得到的产物中鱼蛋白含量高、多肽含量低，而且所得多肽的分子量较大，生物活性一般。安康鱼又名蛤蟆鱼、结巴鱼等，是遍布于世界的温带海洋中50米到100米深的海底的海洋鱼类，在我国沿海海域均有产出。安康鱼可食用，肉质富含胶质，具有极高的营养价值，而且安康鱼低脂肪、低热量，富含维他命A、D、E，对保持视力、治疗咳嗽、预防肝脏疾病有着很好的功效。安康鱼肝味道鲜美，被称为“海中鹅肝”。但是安康鱼在加工过程中会产生较多的鱼皮、鱼骨、鱼鳍等下脚料，其中丟弃的安康鱼皮约占下脚料的4～5％。鱼皮中含丰富的蛋白，是制备多肽的较佳原料。因此如何利用安康鱼的鱼皮制取多肽并使获得的多肽保留较高的生物活性不仅可扩展有免疫调节活性的多肽的来源，而且能够合理利用加工下脚料，提高安康鱼的经济价值。中国授权专利公告号CN102286588B，专利名称甲鱼肽的制备方法，公开了以甲鱼为原料，利用碱性蛋白酶或中性蛋白酶提取甲鱼肽的制备方法。该甲鱼肽制备方法直接经酶解制备多肽，得到的产物中甲鱼蛋白的含量较高，而且多肽分子量较大，同时该方法无法脱除海洋鱼类的腥臭味，因此不适宜直接用于安康鱼皮肽的制备。发明内容针对目前以海洋鱼类为原料制备具有免疫调节活性的多肽的分子量较大且含有苦腥味的问题，本发明的目的在于提供一种安康鱼皮肽的制备方法，以安康鱼加工的鱼皮下脚料为原料，得到的安康鱼皮肽的分子量较小，而且无苦腥味，食用口感较佳，能够合理利用加工下脚料，提高安康鱼的经济价值。同时本发明还提供了制备的安康鱼皮肽在免疫调节方面的用途。本发明提供如下的技术方案：一种安康鱼皮肽的制备方法，包括以下步骤：1将回收的安康鱼的鱼皮下脚料清洗干净、剪片，然后脱脂处理；2将脱脂后鱼皮投入分散有高温煅烧贻贝粉的水中浸没、脱味，然后过筛、冲洗回收鱼皮；3把鱼皮加入到水中浸泡，并加酸液调节pH值为3.8～5.2，施加低压脉冲电场；4过筛鱼皮、匀浆，然后加入蛋白提取酶和10～15倍重量的水混合，搅拌酶解，离心分离上清液得到鱼皮蛋白液，然后灭酶活性；5向鱼皮蛋白液中加入蛋白分解酶处理、灭酶活性、然后经超滤膜截留分子量1000～3500Da的多肽分子得到安康鱼皮肽。本发明的安康鱼皮肽的制备方法中先将安康鱼皮脱脂、然后高温煅烧贻贝粉脱除腥臭味。由于安康鱼的鱼皮蛋白分子之间具有经离子键的静电作用和席夫碱交联连接，鱼皮蛋白分子之间并不容易断键提取，因此将脱脂、脱味后的鱼皮经酸性环境和低压脉冲电场协同作用去除安康鱼皮的鱼皮蛋白之间的离子键和静电作用，削弱鱼皮蛋白分子间的交联程度，使鱼皮蛋白发生溶胀，然后经蛋白提取酶充分提取，使安康鱼皮中的鱼皮蛋白尽可能的溶出，再经专一性高的蛋白分解酶进行分解，这样得到的多肽的断链程度均匀，分子量均匀，生物活性高，所得鱼皮肽的分子量多在1000～3500Da，无腥臭味，而且鱼皮利用率高。作为本发明方法的优选，步骤4中蛋白提取酶为胰凝乳蛋白酶或曲霉菌丝氨酸蛋白酶，添加的蛋白提取酶的酶活力为5000～10000Ug，添加量为鱼皮的1～3wt％，提取时间8～12h，提取温度50～60℃。经发明人研究发现，胰凝乳蛋白酶、曲霉菌丝氨酸蛋白酶对安康鱼皮的鱼皮蛋白分解制备鱼皮多肽的作用较弱，分解效率低，但是能够破坏鱼皮蛋白尾端的肽链，使鱼皮蛋白从安康鱼皮中分离提取，而且恰由于低鱼皮蛋白分解作用保证了鱼皮蛋白的完整性，有助于蛋白分解酶分解得到的多肽分子量均匀，多肽产率高，免疫调节活性强。作为本发明方法的优选，步骤5中蛋白分解酶为胃蛋白酶，添加的胃蛋白酶的酶活力为30000～50000Ug，添加量为鱼皮蛋白液的3～7wt％，分解的pH值为2～4，分解温度为40～50℃，分解时间3～5h。目前有采用胰蛋白酶进行鱼皮多肽提取的研究，但是发明人经过实验发现，采用胃蛋白分解酶在较高的酶活力下能够有效、均匀分解安康鱼的鱼皮蛋白，得到的多肽的分子量为1000～3500Da的所占比重较高，多肽具有较高的免疫活性。作为本发明方法的优选，步骤1的脱脂过程如下：将鱼皮与水混合后加维生素E分散均匀，然后加脂肪酶30～40℃脱脂2～4h，再加异丙醇溶液再次脱脂1～3h，过筛鱼皮并用水冲洗至无异丙醇味，维生素E加入量为鱼皮的0.5～1wt％，脂肪酶加入量为鱼皮的1.2～2wt％，脂肪酶活力为30000～50000Ug，异丙醇溶液浓度为25～32wt％。现有以鱼皮为原料制备多肽过程中多用纯的异丙醇或者脂肪酶脱脂，但异丙醇消耗量比较大，脱脂时间长，一般不低于24小时；而脂肪酶脱脂生成的不饱和脂肪酸容易氧化加重后序制备的多肽的苦腥味。发明人将脂肪酶脱脂和异丙醇脱脂配合使用，并在脱脂过程中加入维生素E，维生素E具有抗氧化能力，并且溶解在脂肪酶脱脂形成的脂肪中，防止不饱和脂肪酸氧化，这样先后经脂肪酶、异丙醇配合脱脂处理，脱脂较为彻底，脱脂时间缩短，且本申请中只需25～32wt％异丙醇溶液，异丙醇消耗减少。作为本发明方法的优选，步骤3中所用酸液为酒石酸与水杨酸的混合水溶液，酒石酸与水杨酸的质量比为3～5:1，浸泡温度≤38℃。酒石酸有较强的抗氧化性，在溶胀安康鱼的鱼皮蛋白的同时避免蛋白被氧化破坏，水杨酸则起到抗菌抑菌效果，协同酒石酸酸，保护安康鱼的鱼皮蛋白。同时将浸泡温度设置在不高于38℃，经研究发现能有效保持鱼皮蛋白分子的完整性和活性，有利于后续蛋白分解酶的分解，提高得到的多肽的活性和分子量均匀。作为本发明方法的优选，步骤3中的低压脉冲电场的电压为80～100V，频率为40～50Hz。低压脉冲电场协同强化酸，使安康鱼的鱼皮蛋白溶胀，但是电场的强度不易过高，否则容易导致鱼皮蛋白的变性。作为本发明方法的优选，步骤3还包括向调节pH值后的水中加入硼氢化钠或醋酸硼氢化钠，加入量为鱼皮的0.1～0.5wt％。加入低量的硼氢化钠或者醋酸硼氢化钠能够消除鱼蛋白分子间的席夫碱，协同酸浸泡和低压脉冲电场，破坏安康鱼的鱼皮蛋白分子间的交联，加强鱼皮蛋白的溶胀，从而提高蛋白提取酶的提取效率以及多肽的含量。作为本发明方法的优选，步骤2中高温煅烧贻贝粉经以下过程制成：将贻贝壳清洗干净后粉碎至60～80目，然后与碳酸钠、硅烷偶联剂按质量比1:0.03～0.05:0.1～0.2混合在1200～1300℃隔氧煅烧3～5h，降温后加入到0.05～0.1wt％的黄原胶水溶液中，并加入贻贝壳质量0.07～0.1wt％的胡敏素分散均匀，然后浓缩并冷冻干燥得到高温煅烧贻贝粉。贻贝壳的主要成分是碳酸钙和一定量的碱金属化合物、碱土金属化合物，碳酸钙经高温煅烧后分解形成的氧化钙与碱土金属化合物、碱金属化合物形成低熔点固相共熔物，并经碳酸钠进一步强化，能够形成更加丰富的孔隙，并且强度得到增强，而且贻贝壳与硅烷偶联剂经隔氧煅烧形成交联互穿网络，使煅烧贝壳粉中产生较多的孔隙和吸附位点，有效吸附鱼皮中的腥臭物质、脱脂得到的脂肪酸等，脱除原料腥臭味，而胡敏素因富含羟基和羧基，脱除苦涩味并能络合重金属离子，同时胡敏素不溶于水中可以脱附后用水清洗并重复使用。本发明的安康鱼皮肽的制备方法中，将安康鱼皮经脂肪酶与异丙醇配合脱脂，并经高温煅烧贻贝粉脱除腥臭味，协同脱除制备的鱼皮肽的苦腥味，然后经酸性环境、脉冲电场和硼氢化钠、醋酸硼氢化钠协同削弱安康鱼的鱼皮蛋白分子间的交联程度，强化鱼皮蛋白的溶胀，然后再经对鱼皮蛋白分解作用弱的蛋白提取酶分离提取鱼皮蛋白，然后利用专一性高的蛋白分解酶分解鱼皮蛋白制成安康鱼皮肽，分子量在1000～3500Da，收率可达鱼皮蛋白的78wt％左右，分子量均匀，免疫活性高，而且无苦腥味，鱼皮利用率高。一种经上述制备方法所制得的安康鱼皮肽在免疫调节方面的应用。本发明的制备方法得到的安康鱼皮肽的分子量在1000～3500Da的比重高，收率可达鱼皮蛋白的78wt％左右，具有较高的免疫调节活性。本发明的有益效果如下：本发明的制备方法得到的安康鱼皮肽的分子量较集中分布在1000～3500Da，相对鱼皮蛋白的收率可达78wt％左右，分子量均匀，而且无苦腥味，鱼皮利用率高，提高安康鱼的经济价值，而且具有较高的免疫活性，可应用在免疫调节上，扩展了免疫调节活性的多肽的来源。具体实施方式下面就本发明的具体实施方式作进一步说明。如无特别说明，本发明中所采用的原料均可从市场上购得或是本领域常用的，如无特别说明，下述实施例中的方法均为本领域的常规方法。实施例1一种安康鱼皮肽的制备方法，包括以下步骤：1将回收的安康鱼的鱼皮下脚料清洗干净、剪片，然后将鱼皮与水混合后加维生素E分散均匀，然后加脂肪酶30℃脱脂4h，再加浓度为25wt％异丙醇溶液再次脱脂2h，过筛鱼皮并用水冲洗至无异丙醇味，维生素E加入量为鱼皮的0.5wt％，脂肪酶加入量为鱼皮的1.6wt％，脂肪酶活力为30000Ug；2将脱脂后鱼皮投入分散有高温煅烧贻贝粉的水中浸没、脱味，然后过筛、冲洗回收鱼皮，其中高温煅烧贻贝粉经以下过程制成：将贻贝壳清洗干净后粉碎至60～80目，然后与碳酸钠、硅烷偶联剂按质量比1:0.03:0.1混合在1300℃煅烧3h，降温后加入到0.05wt％的黄原胶水溶液中，并加入贻贝壳质量0.07wt％的胡敏素分散均匀，浓缩并冷冻干燥得到高温煅烧贻贝粉；3把鱼皮加入到水中，加酒石酸与水杨酸的混合水溶液调节pH值为5.2，酒石酸与水杨酸质量比为3:1，同时施加80V、频率为40Hz低压脉冲电场，浸泡5小时，浸泡温度38℃；4过筛鱼皮、匀浆，然后加入胰凝乳蛋白酶和10倍重量的水混合，在50℃搅拌酶解提取时间12h，胰凝乳蛋白酶添加量为鱼皮的1wt％，酶活力为7000Ug，然后离心分离上清液得到鱼皮蛋白液，然后灭酶活性；5调节鱼皮蛋白液的pH值为4，然后向鱼皮蛋白液中加入3wt％的胃蛋白酶，在40℃搅拌分解时间3h，再灭酶活性，然后先经500u的超滤膜截留，冲洗后将洗脱液经3500u的超滤膜截留，洗脱后浓缩洗脱液并喷雾得到分子量1000～3500Da的多肽即为安康鱼皮肽，经测试，与将鱼皮蛋白液直接浓缩喷雾后的鱼皮蛋白相比，收率73.2wt％，且无苦腥味。经上述方法制备的安康鱼皮肽应用在免疫调节方面。其中采用MTT法检测安康鱼皮肽对RAW264.7细胞的生长与增殖影响来表现该安康鱼皮肽的免疫调节活性，检测方法如下：将密度约为1×104个mL的RAW264.7细胞悬液接种至96孔板，200μL孔。培养12h后弃培养液，设空白对照组和加药组浓度分别为50μgmL、100μgmL、150μgmL和200μgmL，即实施例1所制备的安康鱼皮肽的浓度培养RAW264.7细胞，每个组设6个平行孔。分别培养24h和48h后弃上清液，并向每个孔中加入200μL含10％MTT的PBS，继续常规孵育4h。孵育结束，去除孔中液体，然后每孔加150μL的DMSO，充分振荡10min。在酶标仪490nm波长处测定各孔处的吸光度A，计算出细胞增殖率。细胞增殖率公式如下：IR＝[对照组A值－加药组A值对照组A值]×100％。结果如表1所示。其中当安康鱼皮肽的浓度为200μgmL，作用时间为48h时，安康鱼皮肽对RAW264.7细胞的增殖率可达99.3％，安康鱼皮肽表现出较好的免疫调节作用。表1安康鱼皮肽RAW264.7细胞的增殖率的影响％，与24h作用时间比较，P＜0.05。实施例2一种安康鱼皮肽的制备方法，包括以下步骤：1将回收的安康鱼的鱼皮下脚料清洗干净、剪片，然后将鱼皮与水混合后加维生素E分散均匀，然后加脂肪酶38℃脱脂2h，再加异丙醇溶液再次脱脂1h，过筛鱼皮并用水冲洗至无异丙醇味，维生素E加入量为鱼皮的0.8wt％，脂肪酶加入量为鱼皮的1.2wt％，脂肪酶活力为40000Ug，异丙醇溶液浓度30wt％；2将脱脂后鱼皮投入分散有高温煅烧贻贝粉的水中浸没、脱味，然后过筛、冲洗回收鱼皮，其中高温煅烧贻贝粉经以下过程制成：将贻贝壳清洗干净后粉碎至60～80目，然后与碳酸钠、硅烷偶联剂按质量比1:0.04:0.2混合在1200℃煅烧5h，降温后加入到0.08wt％的黄原胶水溶液中，并加入贻贝壳质量0.08wt％的胡敏素分散均匀，浓缩并冷冻干燥得到高温煅烧贻贝粉；3把鱼皮加入到水中并加酒石酸与水杨酸的混合水溶液调节pH值为4.3，酒石酸与水杨酸的质量比为4:1，施加100V、频率为50Hz低压脉冲电场，浸泡2小时，浸泡温度30℃；4过筛鱼皮、匀浆，然后加入曲霉菌丝氨酸蛋白酶和15倍重量的水混合，在55℃搅拌酶解提取时间8h，曲霉菌丝氨酸蛋白酶的添加量为鱼皮的3wt％，酶活力为10000Ug，然后离心分离上清液得到鱼皮蛋白液，然后灭酶活性；5调节鱼皮蛋白液的pH值为3，然后向鱼皮蛋白液中加入5wt％的胃蛋白酶，在45℃搅拌分解时间4h，再灭酶活性，先经1000u的超滤膜截留，然后冲洗后将洗脱液经3500u的超滤膜截留，洗脱后浓缩洗脱液，并喷雾得分子量1000～3500Da的多肽分子，即为安康鱼皮肽，经测试，与将鱼皮蛋白液直接浓缩喷雾后的鱼皮蛋白相比，收率75.1wt％，且无苦腥味。经上述方法制备的安康鱼皮肽应用在免疫调节方面。通过与实施例1相同条件的MTT法进行检测得到的安康鱼皮肽对RAW264.7细胞的生长与增殖影响效果相近，当安康鱼皮肽浓度为200μgmL，作用时间48h时，安康鱼皮肽对RAW264.7细胞的增殖率可达99.4％，安康鱼皮肽表现出较好的免疫调节作用。实施例3一种安康鱼皮肽的制备方法，包括以下步骤：1将回收的安康鱼的鱼皮下脚料清洗干净、剪片，然后将鱼皮与水混合后加维生素E分散均匀，然后加脂肪酶40℃脱脂3，再加浓度32wt％异丙醇溶液再次脱脂3h，过筛鱼皮并用水冲洗至无异丙醇味，维生素E加入量为鱼皮的1wt％，脂肪酶加入量为鱼皮的2wt％，脂肪酶活力为50000Ug；2将脱脂后鱼皮投入分散有高温煅烧贻贝粉的水中浸没、脱味，然后过筛、冲洗回收鱼皮，其中高温煅烧贻贝粉经以下过程制成：将贻贝壳清洗干净后粉碎至60～80目，然后与碳酸钠、硅烷偶联剂按质量比1:0.05:0.13混合在1200℃煅烧3h，降温后加入到0.1wt％的黄原胶水溶液中，并加入贻贝壳质量0.1wt％的胡敏素分散均匀，浓缩并冷冻干燥得到高温煅烧贻贝粉；3把鱼皮加入到水中并加酒石酸与水杨酸的混合水溶液调节pH值为3.8，酒石酸与水杨酸的质量比为5:1，施加100V、频率为50Hz低压脉冲电场，浸泡3小时，浸泡温度32℃；4过筛鱼皮、匀浆，然后加入胰凝乳蛋白酶和15倍重量的水混合，在60℃搅拌酶解提取时间9h，胰凝乳蛋白酶添加量为鱼皮的2.6wt％，酶活力为5000Ug，然后离心分离上清液得到鱼皮蛋白液，然后灭酶活性；5调节鱼皮蛋白液的pH值为2，然后向鱼皮蛋白液中加入7wt％的胃蛋白酶，在50℃搅拌分解时间5h，再灭酶活性，先经1000u的超滤膜截留，然后冲洗后将洗脱液经3500u的超滤膜截留，洗脱后浓缩洗脱液，并喷雾得到分子量1000～3500Da的多肽分子即为安康鱼皮肽，经测试，与将鱼皮蛋白液直接浓缩喷雾后的鱼皮蛋白相比，收率76.8wt％，且无苦腥味。经上述方法制备的安康鱼皮肽应用在免疫调节方面。通过与实施例1相同条件的MTT法进行检测得到的安康鱼皮肽对RAW264.7细胞的生长与增殖影响效果相近，当安康鱼皮肽浓度为200μgmL，作用时间48h时，安康鱼皮肽对RAW264.7细胞的增殖率可达99.5％，安康鱼皮肽表现出较好的免疫调节作用。实施例4一种安康鱼皮肽的制备方法，与实施例1的不同之处在于，步骤3还包括向调节pH值后的水中加入硼氢化钠或醋酸硼氢化钠，加入量为鱼皮的0.1wt％。所得分子量1000～3500Da的安康鱼皮肽相对安康鱼皮的鱼皮蛋白的收率为77.4％，且无苦腥味。经上述方法制备的安康鱼皮肽应用在免疫调节方面。通过与实施例1相同条件的MTT法进行检测得到的安康鱼皮肽对RAW264.7细胞的生长与增殖影响效果相近，当安康鱼皮肽浓度为200μgmL，作用时间48h时，安康鱼皮肽对RAW264.7细胞的增殖率可达99.4％，安康鱼皮肽表现出较好的免疫调节作用。实施例5一种安康鱼皮肽的制备方法，与实施例1的不同之处在于，步骤3还包括向调节pH值后的水中加入硼氢化钠或醋酸硼氢化钠，加入量为鱼皮的0.5wt％。所得分子量1000～3500Da的安康鱼皮肽相对安康鱼皮的鱼皮蛋白的收率为77.8％，且无苦腥味。经上述方法制备的安康鱼皮肽应用在免疫调节方面。通过与实施例1相同条件的MTT法进行检测得到的安康鱼皮肽对RAW264.7细胞的生长与增殖影响效果相近，当安康鱼皮肽浓度为200μgmL，作用时间48h时，安康鱼皮肽对RAW264.7细胞的增殖率可达99.5％，安康鱼皮肽表现出较好的免疫调节作用。

权利要求：1.一种安康鱼皮肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将回收的安康鱼的鱼皮下脚料清洗干净、剪片，然后脱脂处理；（2）将脱脂后鱼皮投入分散有高温煅烧贻贝粉的水中浸没、脱味，然后过筛、冲洗回收鱼皮；（3）把鱼皮加入到水中浸泡，并加酸液调节pH值为3.8～5.2，施加低压脉冲电场；（4）过筛鱼皮、匀浆，然后加入蛋白提取酶和10～15倍重量的水混合，搅拌酶解，离心分离上清液得到鱼皮蛋白液，然后灭酶活性；（5）向鱼皮蛋白液中加入蛋白分解酶处理、灭酶活性、然后经超滤膜截留分子量1000～3500Da的多肽分子得到安康鱼皮肽。2.根据权利要求1所述的安康鱼皮肽的制备方法，其特征在于，步骤（4）中蛋白提取酶为胰凝乳蛋白酶或曲霉菌丝氨酸蛋白酶，添加的蛋白提取酶的酶活力为5000～10000Ug，添加量为鱼皮的1～3wt%，提取时间8～12h，提取温度50～60℃。3.根据权利要求1所述的安康鱼皮肽的制备方法，其特征在于，步骤（5）中蛋白分解酶为胃蛋白酶，酶活力为30000～50000Ug，添加量为鱼皮蛋白液的3～7wt%，分解的pH值为2～4，分解温度为40～50℃，分解时间3～5h。4.根据权利要求1或2或3所述的安康鱼皮肽的制备方法，其特征在于，步骤（1）的脱脂过程如下：将鱼皮与水混合后加维生素E分散均匀，然后加脂肪酶30～40℃脱脂2～4h，再加异丙醇溶液再次脱脂1～3h，过筛鱼皮并用水冲洗至无异丙醇味，维生素E加入量为鱼皮的0.5～1wt%，脂肪酶加入量为鱼皮的1.2～2wt%，脂肪酶活力为30000～50000Ug，异丙醇溶液浓度为25～32wt%。5.根据权利要求1所述的安康鱼皮肽的制备方法，其特征在于，步骤（3）中所用酸液为酒石酸与水杨酸的混合水溶液，酒石酸与水杨酸的质量比为3～5:1，浸泡温度≤38℃。6.根据权利要求1所述的安康鱼皮肽的制备方法，其特征在于，步骤（3）中的低压脉冲电场的电压为80～100V，频率为40～50Hz。7.根据权利要求1或5或6所述的安康鱼皮肽的制备方法，其特征在于，步骤（3）还包括向调节pH值后的水中加入硼氢化钠或醋酸硼氢化钠，加入量为鱼皮的0.1～0.5wt%。8.根据权利要求1或2或3或5所述的安康鱼皮肽的制备方法，其特征在于，步骤（2）中高温煅烧贻贝粉经以下过程制成：将贻贝壳清洗干净后粉碎至60～80目，然后与碳酸钠、硅烷偶联剂按质量比1:0.03～0.05:0.1～0.2混合在1200～1300℃煅烧3～5h，降温后加入到0.05～0.1wt%的黄原胶水溶液中，并加入贻贝壳质量0.07～0.1wt%的胡敏素分散均匀，然后浓缩并冷冻干燥得到高温煅烧贻贝粉。9.一种如权利要求1至8任一所述的制备方法所制得的安康鱼皮肽在免疫调节方面的应用。

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