龙图腾网&IPTOP
- 微信扫码登录
- 账号密码登录
- 短信登录/注册
买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！
申请/专利权人：中国医学科学院输血研究所
摘要：本发明公开了基于三代测序的RHD、RHCEmRNA全长的测定方法及试剂盒，属于生物技术领域，解决现有技术不能测定RHD、RHCEmRNA全长，不能检测低水平剪切体、不能对转录本相对定量的问题。本发明测定方法包括：mRNA的抽提及cDNA逆转录；PCR扩增；三代测序文库构建及上机测序；测序数据过滤与质控；转录本的表达量分析。本发明的试剂盒包括有同时扩增RHD、RHCE转录本全长的引物。本发明成功利用长链单分子测序技术对RHD、RHCE基因进行全长转录本测序，检测出RhD阳性和Del型样本中RHD、RHCE基因的多种转录本，并可对不同转录本的表达水平进行相对定量，为揭示RH血型变异的分子机制提供了新方法。本发明的同步检测方法可以一步得到两个基因的结果，简化了实验流程，丰富检测结果。
主权项：1.一种基于三代测序的RHD、RHCEmRNA全长的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.mRNA的抽提及cDNA逆转录：提供不同样本的mRNA，再逆转录成cDNA；S2.PCR扩增：设计能同时扩增RHD、RHCEmRNA全长的扩增引物，采用该引物对步骤S1所得的cDNA进行扩增；S3.三代测序文库构建及上机测序：将步骤S2所得的PCR产物纯化、定量、末端修复、连接标签、添加测序接头后再次纯化，完成文库的构建；将上述cDNA测序文库经三代测序平台测序；S4.测序数据过滤与质控对测序所得的短片段和低质量数据进行剪切与过滤，以及去除50bp接头序列得到有效数据，过滤条件为200bp＜所测序列长度＜3000bp，测序质量Qscore＞7；最后再对过滤后的有效数据进行质控，得到RHD、RHCEmRNA全长信息。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国医学科学院输血研究所 基于三代测序的RHD、RHCE mRNA全长的测定方法及试剂盒
免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。
主营中国专利交易买卖与专利转让许可,高校科技成果推广与科技成果转化,知识产权运营管理与平台开发,科技人才专家库与科技猎头等科技服务
开放平台
担保交易
惠及多方
会员特惠
专属平台
适合多方
数据共享
功能齐全
皖公网安备 34010402703815号