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申请/专利权人：翌圣生物科技(上海)股份有限公司
摘要：本发明提供一种表达FcγRIIIa和NFAT‑Luc报告基因的Jurkat细胞的构建方法，其特征在于，通过构建NFAT‑Luc以及FcγRIIIa的慢病毒表达质粒载体，将慢病毒表达质粒载体配合慢病毒包装质粒分别转染至293v细胞中，获得携带有FcγRIIIa或NFAT‑Luc的病毒颗粒；再感染Jurkat细胞而成。还公开了制得的Jurkat细胞及应用。本发明构建了稳定表达FcγRIIIa（CD16a）受体和由NFAT应答元件驱动表达的萤火虫萤光素酶的效应细胞JurkatNFATFcγRIIIa，可用于检测抗体药物的ADCC生物学活性。
主权项：1.一种表达FcγRIIIa和NFAT-Luc报告基因的Jurkat细胞的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：1构建NFAT-Luc的慢病毒表达质粒载体，以及FcγRIIIa的慢病毒表达质粒载体，其中FcγRIIIa基因序列如SEQIDNo.2所示；2将步骤1中所述的两种慢病毒表达质粒载体配合慢病毒包装质粒分别转染至293v细胞中，获得携带有FcγRIIIa或NFAT-Luc的病毒颗粒；3用携带FcγRIIIa的病毒颗粒感染Jurkat细胞；4对流式细胞仪筛选得到的阳性细胞株进行博来霉素加压筛选；5用携带NFAT-Luc的病毒颗粒感染步骤（4）筛选出的Jurkat细胞；6对流式细胞仪筛选得到的阳性细胞株进行嘌呤霉素加压筛选；7加压筛选后的细胞进行单克隆化，筛选出单克隆阳性细胞株。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 翌圣生物科技(上海)股份有限公司 表达FcγRIIIa和NFAT-Luc报告基因的Jurkat细胞的构建方法及应用
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