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申请/专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
申请日：2022-04-22
公开（公告）日：2023-10-31
公开（公告）号：CN116973494A
主分类号：G01N30/60
分类号：G01N30/60;G01N30/88
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2023.11.17#实质审查的生效;2023.10.31#公开
摘要：本发明涉及一种基于亲水作用色谱偶联微升流速的液相色谱串联二级质谱的糖基化蛋白质组学分析方法。具体是取用生物样本后通过变性酶解蛋白获得肽段，除盐后提交至配置有点击麦芽糖微球填料的亲水作用色谱柱的液相色谱仪中用于富集样品中的完整糖肽，随后将富集后的样品提交至微升流速的液相色谱串联二级质谱进行完整糖肽的检测。本发明通过一定规格的色谱柱在特定的微升流速的液相色谱仪中分析生物样本的糖基化蛋白质组学，分析方法的重现性高，并且适合长期稳定运行，这种连续且自动化地富集大量样本的N‑糖肽的新方法有潜力应用于大规模的临床糖基化蛋白质组学研究。
主权项：1.亲水作用色谱偶联微升流速色质联用的糖基化蛋白质组学分析方法，其特征在于：具体步骤如下：取生物样本，在变性剂中还原、烷基化处理；随后补加缓冲液，加入胰蛋白酶，酶解蛋白；酶解后酸化溶液并除盐，除盐后冻干酶解肽段；将酶解肽段重新复溶于富集上样液中，提交至配置有亲水作用色谱柱的液相色谱仪中，进行糖肽富集，监测流出曲线，收集糖肽馏分，冻干糖基化肽段；将糖基化肽段重新复溶于质谱上样液中，提交至配置有C18色谱柱、微升流速的液相色谱串联二级质谱中，进行色质联用分析方法的分离和检测，最后获得的raw文件用糖肽检索软件进行定性和定量分析。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国科学院大连化学物理研究所 亲水色谱偶联微升流速色质联用的糖蛋白质分析方法
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