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申请/专利权人：江苏萤火虫环境科技有限公司;中国科学院南京土壤研究所
申请日：2022-11-20
公开（公告）日：2024-01-30
公开（公告）号：CN116138165B
主分类号：A01H4/00
分类号：A01H4/00;A01H9/00
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.01.30#授权;2023.06.09#实质审查的生效;2023.05.23#公开
摘要：一种铅镉修复植物华中蹄盖蕨的孢子繁殖方法。该方法建立了包括孢子采收与贮存、外植体消毒与接种、孢子萌发、配子体增殖培养、孢子体诱导培养、孢子苗移栽与管理等步骤的完整孢子快速繁殖体系。其中，配子体增殖培养基经优化后，在不发生分化的前提下实现了绿色球状体的高效增殖，一个月即可增殖7.3‑10.2倍，且绿色球状体诱导率达100%；采用组织培养和不完全组织培养方法，优化了“孢子体诱导培养”技术步骤，2‑3个月即可长出幼孢子体，孢子体诱导率可达80%。本发明提供的方法，有效提高了绿色球状体增殖和孢子体诱导的效率和质量，推进了华中蹄盖蕨快繁体系的建成和产业化培养，可为华中蹄盖蕨应用于矿区重金属污染土壤修复及植被恢复提供大量种苗和种质资源。
主权项：1.一种铅镉修复植物华中蹄盖蕨的孢子繁殖方法，其特征在于，将消毒过的孢子接种于孢子萌发培养基，4-8周萌发，28-31天后，原叶体长到不低于0.5cm，逐渐形成绿色球状体GGB；将GGB切1cm3小块，接种于GGB增殖培养基上培养一个月；增殖培养的GGB，切分成1cm3小块，采用如下1）-2）任一步骤诱导孢子体：1）转接孢子体诱导培养基进行无菌培养，诱导分化过程中，采用孢子体继代培养基培养，每两周继代一次，2-3个月后开始长出幼孢子体；2）移栽于草炭土泥炭土基质上，置于自然条件下培养，2-3个月后开始长出幼孢子体，待幼孢子体长至1-5cm即可移栽、炼苗；所述孢子萌发培养基为：MS+30gL蔗糖+8.5gL琼脂+1mgLGA3；GGB增殖培养基为：12MS+30gL蔗糖+8.0gL琼脂；孢子体诱导培养基为：MS+30gL蔗糖+8.5gL琼脂+0.5mgL6-BA+0.5mgLNAA；孢子体继代培养基为：MS+30gL蔗糖+8.5gL琼脂+0.5mgL6-BA+0.5mgLNAA，pH均为5.80-5.90；所述草炭土泥炭土基质的有机质含量不低于50wt.%，颜色呈深褐色至黑色，粒径≤6mm。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江苏萤火虫环境科技有限公司;中国科学院南京土壤研究所 一种铅镉修复植物华中蹄盖蕨的孢子繁殖方法
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