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申请/专利权人：新疆畜牧科学院生物技术研究所(新疆畜牧科学院中国-澳大利亚绵羊育种研究中心)
申请日：2023-11-14
公开（公告）日：2024-02-13
公开（公告）号：CN117551701A
主分类号：C12N15/90
分类号：C12N15/90;C12N15/877;C12N15/12
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.03.01#实质审查的生效;2024.02.13#公开
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种利用电转和同源重组技术编辑绵羊MSTN基因的方法，将同源重组基因编辑材料电转至绵羊受精卵中，所述同源重组基因编辑材料包括如SEQIDNO.1所示的MSTN‑Tx‑sgRNA序列、如SEQIDNO.2所示的MSTN‑Tx‑ssODN序列和Cas9核酶，可实现MSTN基因3’UTR6723位点碱基G精准突变为A，可高效快速获得MSTN基因3’UTR点突变的基因型绵羊胚胎。
主权项：1.一种利用电转和同源重组技术编辑绵羊MSTN基因的方法，其特征在于，包括以下步骤：将编辑绵羊MSTN基因同源重组组分溶解于Opti-MEM中形成电转材料，将电转材料电转至体外受精时间为4-10h的绵羊受精卵中，电转处理后的受精卵移至胚胎培养液中继续培养；其中，所述编辑绵羊MSTN基因同源重组组分包括如SEQIDNO.1所示的MSTN-Tx-sgRNA序列、如SEQIDNO.2所示的MSTN-Tx-ssODN序列和Cas9核酶，电转材料中所述MSTN-Tx-sgRNA终浓度为50-100ngμL，所述Cas9核酶终浓度为100-200ngμL，所述MSTN-ssODN终浓度为50-100ngμL。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 新疆畜牧科学院生物技术研究所(新疆畜牧科学院中国-澳大利亚绵羊育种研究中心) 一种利用电转和同源重组技术编辑绵羊MSTN基因的方法
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