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一种基于CRISPR/Cas13a的ABO血型基因型鉴定方法及所用组合物 

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申请/专利权人:中国人民解放军军事科学院军事医学研究院

摘要:本发明公开了一种基于CRISPRCas13a的ABO血型基因型鉴定方法及所用组合物。本发明属于生物检测领域,具体涉及一种基于CRISPRCas13a的ABO血型基因型鉴定方法及所用组合物。本发明用于血型基因分型检测的组合物,包含特异于待检测核酸的引物组A和引物组B、特异于待检测核酸的crRNA‑6‑261‑G2、crRNA‑6‑261‑D3crRNA‑7‑796‑C1、crRNA‑7‑796‑A3、Cas13a蛋白和荧光报告探针,其中引物组A由引物ABO‑6‑T7‑F1、ABO‑6‑R1组成;引物组B由引物ABO‑7‑T7‑F1、ABO‑7‑R1组成。

主权项:1.用于血型基因分型检测的组合物,其特征在于,所述组合物包含特异于待检测核酸的引物组A和引物组B、特异于待检测核酸的crRNA组1和crRNA组2、Cas13a蛋白和荧光报告探针;所述引物组A由引物ABO-6-T7-F1、引物ABO-6-R1组成;所述引物组B由引物ABO-7-T7-F1、引物ABO-7-R1组成;所述crRNA组1由crRNA-6-261-G2、crRNA-6-261-D3组成;所述crRNA组2由crRNA-7-796-C1、crRNA-7-796-A3组成;所述荧光报告探针是一端连有荧光基团,另一端连有淬灭基团的单链RNA;所述引物ABO-6-T7-F1为如下b1或b2:b1序列表的序列2所示的单链DNA分子;b2将序列2经过核苷酸的取代和或缺失和或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子;所述引物ABO-6-R1为如下b3或b4:b3序列表的序列7所示的单链DNA分子;b4将序列7经过核苷酸的取代和或缺失和或添加且与序列7具有相同功能的DNA分子;所述引物ABO-7-T7-F1为如下b5或b6:b5序列表的序列19所示的单链DNA分子;b6将序列19经过核苷酸的取代和或缺失和或添加且与序列19具有相同功能的DNA分子;所述引物ABO-7-R1为如下b7或b8:b7序列表的序列27所示的单链DNA分子;b8将序列27经过核苷酸的取代和或缺失和或添加且与序列27具有相同功能的DNA分子;所述待检测核酸的crRNA-6-261-G2为如下c1或c2:c1序列表的序列13所示的单链DNA分子;c2将序列13经过核苷酸的取代和或缺失和或添加且与序列13具有相同功能的DNA分子;所述待检测核酸的crRNA-6-261-D3为如下c3或c4:c3序列表的序列17所示的单链DNA分子;c4将序列17经过核苷酸的取代和或缺失和或添加且与序列17具有相同功能的DNA分子;所述待检测核酸的crRNA-7-796-C1为如下c5或c6:c5序列表的序列35所示的单链DNA分子;c6将序列35经过核苷酸的取代和或缺失和或添加且与序列35具有相同功能的DNA分子;所述待检测核酸的crRNA-7-796-A3为如下c7或c8:c7序列表的序列40所示的单链DNA分子;c8将序列40经过核苷酸的取代和或缺失和或添加且与序列40具有相同功能的DNA分子;所述荧光报告探针的单链RNA的核苷酸序列为序列表中的序列FAM-UUUUU-BHQ1。

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百度查询: 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种基于CRISPR/Cas13a的ABO血型基因型鉴定方法及所用组合物

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