申请/专利权人：黄启明

申请日：2022-03-15

公开（公告）日：2024-05-10

公开（公告）号：CN115305233B

主分类号：C12N5/0775

分类号：C12N5/0775;C12N5/071;C12N5/0797;C12N5/079;C12N5/073;A01N1/02;A61K35/28;A61K35/50;A61K35/44;A61K35/36;A61K35/54;A61K35/51;A61K35/33;A61K35/30;A61K35/32;A61K35/407;A61K35/39;A61K35/55

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.10#授权;2022.11.25#实质审查的生效;2022.11.08#公开

摘要：本发明公开了一种大豆苷元与芹菜素复合琼脂糖‑胶原蛋白水凝胶，由大豆苷元、大豆芹菜素和任选的细胞因子复合在琼脂糖‑胶原蛋白中制得；本发明提供了由其制成的干细胞培养基质材料，含重组人血白蛋白、乙醇胺、尼克酰胺和牛磺酸在内的无血清培养添加物，以及在低氧分压条件下用于培养干细胞的方法。模拟干细胞在机体内微环境，从原代培养开始培养人干细胞，具有更佳的干细胞干性和生物学活性，并由此制备了其干细胞来源细胞外囊泡。大豆苷元与芹菜素复合琼脂糖‑胶原蛋白水凝胶的干细胞培养基质材料和无血清培养添加物，在低氧分压条件下用于培养人干细胞、制备干细胞及其细胞外囊泡的生物制剂，以及生产治疗疾病的药物组合物。

主权项：1.一种大豆苷元与芹菜素复合琼脂糖-胶原蛋白水凝胶，其特征在于，将大豆苷元、大豆芹菜素和任选的细胞因子复合在琼脂糖-胶原蛋白中制备的水凝胶；所述大豆苷元与芹菜素复合琼脂糖-胶原蛋白水凝胶对干细胞增殖具有协同效应，增殖倍数至少达到690倍；其制备方法为：1先将胶原蛋白与低熔点琼脂糖溶液混合制备琼脂糖-胶原蛋白溶液：将胶原蛋白与低熔点琼脂糖溶液混合后，将混合液的pH值调为7.4，在10℃-37℃下制备琼脂糖-胶原蛋白溶液；2然后将大豆苷元、大豆芹菜素和任选的细胞因子与该琼脂糖-胶原复合溶液进行复合：将添加细胞因子到胶原蛋白中在细胞培养器上形成水凝胶；选择温敏性好的胶原蛋白；大豆苷元与芹菜素复合琼脂糖-胶原蛋白水凝胶的制备步骤如下：第1步，称取1-10μgmL胶原蛋白置于烧杯中，加入40-200倍重量0.05-0.5molL有机酸溶液，在蠕动泵作用下使溶液反复通过50-400目筛网使其达到均匀状态；第2步，加入低熔点琼脂糖：向步骤1制备的胶原蛋白溶液中加入1-10μgmL低熔点琼脂糖，继续在蠕动泵作用下使溶液反复通过50-400目筛网以达到均匀状态；第3步，加入大豆苷元和芹菜素：向步骤2制备的胶原蛋白溶液中加入大豆苷元和芹菜素，继续在蠕动泵作用下使溶液反复通过50-400目筛网以达到均匀状态；第4步，pH调节：将步骤3制备出的溶液置于0-10℃低温中，采用超滤法进行溶液置换，在超滤过程中加入超纯水或pH6.8的缓冲液，连续超滤直至透过液pH与加入的超纯水或缓冲液的pH之间的差值低于0.2；第5步，辐照：将步骤4制备的样品分装后进行辐照。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 黄启明 大豆苷元与芹菜素复合琼脂糖-胶原蛋白水凝胶三维培养干细胞及细胞外囊泡的制备与用途

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