申请/专利权人：江苏大学

申请日：2024-03-08

公开（公告）日：2024-05-28

公开（公告）号：CN118090855A

主分类号：G01N27/327

分类号：G01N27/327

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.06.14#实质审查的生效;2024.05.28#公开

摘要：本发明属于生物传感器技术领域，具体涉及一种基于金纳米粒子‑激光诱导石墨烯电极的MC‑LR生物传感器的制备方法及其应用。本发明首先设计一种金纳米粒子‑激光诱导石墨烯Au‑LIG的传感基底，然后通过激光直写技术在聚酰亚胺PI上生成Au‑LIG，实现经典三电极体系的一体化集成，并为DNA固定提供结合位点；最后结合一步退火合成的电化学探针标记的cDNA‑Apt复合结构，缩短了传感器构建步骤，并增强探针信号；构建以Au‑LIG为传感基底的比率电化学生物传感器，实现MC‑LR的灵敏、精准检测。

主权项：1.一种基于金纳米粒子-激光诱导石墨烯电极的MC-LR生物传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1将氯金酸溶于去离子水中，经超声处理后得到氯金酸溶液；随后，将壳聚糖溶于冰醋酸溶液中，经超声处理后得到壳聚糖溶液；最后，将氯金酸溶液和壳聚糖溶液混合，经再次超声处理后，得到氯金酸-壳聚糖溶液；2将PI膜贴敷于基板材料表面，然后对PI膜进行清洗处理，得到清洗后的PI膜；所述清洗处理的步骤为：依次使用丙酮和无水乙醇对PI膜表面进行清洁，再使用等离子体清洗机对PI膜进行处理，得到清洗处理后的PI膜；再将步骤1制备的氯金酸-壳聚糖溶液滴加到清洗处理后的PI膜表面，经干燥后使氯金酸-壳聚糖溶液转变为透明的氯金酸薄膜附着于PI膜表面，即得到PI膜基底；3按照设计的平面三电极基底图案，首先控制激光在步骤2PI膜基底表面扫描直写，得到工作电极和其连接的导电条；然后移除PI基底表面的氯金酸透明薄膜，对去除氯金酸透明薄膜后的PI膜基底再次进行激光诱导，得到参比电极、对电极以及与参比电极和对电极连接的导电条；最后使用PI膜对导电条进行封装，得到Au-LIG基一体化电极，即金纳米粒子-激光诱导石墨烯电极，记为Au-LIG；所设计的平面三电极基底图案，包括三工作电极、参比电极和对电极；其中工作电极为圆形，在其外侧为弧形的参比电极和对电极，参比电极和对电极沿同一圆周布置，参比电极的长度小于对电极，且参比电极和对电极的一端开口相对，互不连接，另一端与工作电极的底部处于同一水平线；在工作电极、参比电极和对电极的下端分别连接有导电条，导电条长度一致且互相平行；工作电极、参比电极和对电极组成传感区，三条导电条组成导线区；4取4种单链DNA，分别记为S1、S2、S3和Apt；然后分别用TE缓冲液溶解4种单链DNA，得到4种单链DNA的TE溶液，分别记为S1溶液、S2溶液、S3溶液和Apt溶液；再使用TM缓冲液进行稀释，得到4种单链DNA的TM稀释液，分别记为S1稀释液、S2稀释液、S3稀释液和Apt稀释液；随后，将S1稀释液与三2-羧乙基膦混合，得到S1-TCEP稀释液；最后，将S1-TCEP稀释液、S2稀释液、S3稀释液和Apt稀释液混合得到混合液，再将混合液进行加热反应，加热反应后再进行退火，得到cDNA-Apt复合物溶液，记为cDNA-Apt；5在Au-LIG的工作电极区域修饰步骤4制备的cDNA-Apt，修饰后进行孵育；孵育后再次修饰6-巯基-1-己醇，室温孵育一段时间后得到基于金纳米粒子-激光诱导石墨烯电极的微囊藻毒素-LR生物传感器，记为Au-LIGcDNA-AptMCH。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江苏大学 基于金纳米粒子-激光诱导石墨烯电极的MC-LR生物传感器的制备方法及其应用

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