申请/专利权人：江苏安科华捷生物科技有限公司

申请日：2021-02-03

公开（公告）日：2024-05-31

公开（公告）号：CN112725535B

主分类号：C12Q1/70

分类号：C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.31#授权;2024.03.26#专利申请权的转移;2021.05.21#实质审查的生效;2021.04.30#公开

摘要：本发明公开了同时检测全长与截短的HBVpgRNA荧光定量PCR试剂盒及其应用，所述试剂盒包括PCR反应液Ⅰ，PCR反应液Ⅰ包括SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5和SEQIDNO:6所示的特异性引物，以及SEQIDNO:7、SEQIDNO:8和SEQIDNO:9所示的探针。本发明同时检测出血液中存在的全长与截短HBVpgRNA的含量，可以为临床医生评价核苷酸类药物NAs在CHB抗病毒治疗效果和预测停药后复发风险方面提供更多的参考数据。本发明通过对HBV8种基因型A‑HPreCC与X保守区域分别设计引物探针，并在体系中加入简并引物，特异性高，可有效降低检测脱靶概率。本发所述内标与PreCC区共用一对扩增引物，但内标与靶序列有各自的探针，以指示每个PCR反应管扩增情况，避免假阴性或部分抑制结果的出现。

主权项：1.同时检测全长与截短的HBVpgRNA荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括PCR反应液Ⅰ，PCR反应液Ⅰ包括SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5和SEQIDNO:6所示的特异性引物，以及SEQIDNO:7、SEQIDNO:8和SEQIDNO:9所示的探针；其中，SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3和SEQIDNO:7为PreCC区引物或探针，SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6和SEQIDNO:8为X区引物或探针，SEQIDNO:9为与PreCC区共用一对扩增引物的内标探针；所述特异性引物和探针在扩增体系中的终浓度为：SEQIDNO:1为0.3μM；SEQIDNO:2为0.1μM；SEQIDNO:3为0.3μM；SEQIDNO:4为0.36μM；SEQIDNO:5为0.36μM；SEQIDNO:6为0.12μM；SEQIDNO:7为0.15μM；SEQIDNO:8为0.2μM；SEQIDNO:9为0.1μM；所述试剂盒包括竞争性内标，内标与PreCC区共用一对扩增引物，所述内标为假病毒。

全文数据：

权利要求：

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