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申请/专利权人：中国科学院生态环境研究中心;国科大杭州高等研究院
申请日：2024-04-07
公开（公告）日：2024-06-07
公开（公告）号：CN118147048A
主分类号：C12N5/073
分类号：C12N5/073;C12N5/09;C12N5/071
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.25#实质审查的生效;2024.06.07#公开
摘要：本申请公开了一种基于水凝胶体系的体外胎盘屏障模型构建方法，属于生物组织模型构建技术领域。该方法包括水凝胶的制备、胎盘屏障仿生模型的构建、细胞接种与培养三个步骤。本实验使用甲基丙烯酰化明胶和普通明胶的混合水凝胶作为生物材料，使用负载人绒毛膜肿瘤细胞的水凝胶混合体系模拟胎盘屏障中的细胞滋养层，使用人脐静脉内皮细胞模拟胎儿腔室，人绒毛膜肿瘤细胞模拟母体合胞体。该模型具有三层结构，模拟了滋养层和内皮层的结合，重现了妊娠前期胎盘屏障的典型结构，具有胎盘相关激素分泌及物质转运等关键功能，对于研究母体和胎儿之间的物质转运具有重要意义。
主权项：1.一种基于水凝胶体系的体外胎盘屏障模型构建方法，其特征在于：包括如下步骤：1水凝胶的制备：取所需质量的GelMA放入离心管，然后取光引发剂标准溶液加入到上述离心管中，再称取所需质量的明胶，在70℃水浴的条件下避光加热溶解60min，期间振荡数次；将配制好的水凝胶溶液放置于37℃培养箱中保存，使用前用0.22μm无菌针头过滤器灭菌；2体外胎盘屏障模型的构建：收集BeWob30细胞并将步骤1中的所述水凝胶溶液37℃预热后重悬，配制负载细胞的水凝胶；使用移液枪在培养皿细胞培养小室中沉积所述负载细胞的水凝胶，形成单层圆饼状的结构，使该结构在面光源下通过紫外光交联；交联后，在顶部接种BeWob30细胞，六天后，将所述负载细胞的水凝胶倒置，在所述负载细胞的水凝胶的另一侧播种HUVEC细胞；3模型的培养：按需在培养皿细胞培养小室中加入相应的完全培养基，放入37℃培养箱中培养。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国科学院生态环境研究中心;国科大杭州高等研究院 一种基于水凝胶体系的体外胎盘屏障模型构建方法
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