申请/专利权人：江南大学

申请日：2023-05-08

公开（公告）日：2024-06-07

公开（公告）号：CN116660238B

主分类号：G01N21/65

分类号：G01N21/65

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.07#授权;2023.09.15#实质审查的生效;2023.08.29#公开

摘要：本发明提供了一种基于免标记SERS金属纳米探针的黄曲霉毒素亚型分析方法。本发明通过在AuNPs表面修饰不同的强配体分子2‑巯基苯并咪唑‑5‑羧酸MBIA和4,5‑二苯基‑2‑咪唑硫醇DPI来调节界面能力，从而实现在AuNPs上生长附加域Ag岛或Au帽的目标。获得的Au‑AgJanusNPs和Au‑mushroomNPs均表现出来源于配体的强SERS信号，且两者之间具有互不干扰的特征峰。利用这些优异性质，将这两种检测探针与Fe3O4@AuNPs进行组装，可实现对AFB1和AFB2的同时检测。而且，由于目标分子与适配体的特异性结合，Fe3O4@AuNPs之间从聚集到分散的状态还可以实现对AFM1的准确检测。所构建的组装体既可以充当SERS传感器，又可充当磁性弛豫传感器，可以实现在复杂食品基质中对黄曲霉毒素的亚型分析。

主权项：1.一种基于免标记SERS金属纳米探针的黄曲霉毒素亚型分析方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将Au-AgJanusNPs和AumushroomNPs分别与黄曲霉毒素的适配体AFB1-Apt和AFB2-Apt孵育过夜，固液分离取固相，并将固相分散在溶剂中，得到Au-AgJanusNPsAFB1-Apt溶液和Au-mushroomNPsAFB2-Apt溶液；（2）将Fe3O4@AuNPs等分成两份，其中一份与AFM1的适配体AFM1-Apt以及AFB1适配体互补链AFB1-Apt-C混合孵育过夜，另一份与AFM1适配体互补链AFM1-Apt-C以及AFB2适配体互补链AFB2-Apt-C混合孵育过夜，将两份反应液固液分离取固相，并将固相分散在溶剂中得到混合溶液；（3）将步骤（1）中Au-AgJanusNPsAFB1-Apt溶液和Au-mushroomNPsAFB2-Apt溶液和步骤（2）所得混合溶液孵育后最终得到用于黄曲霉毒素亚型分析的组装体，将其与待检测溶液在缓冲溶液中混合反应，反应后磁性分离取固相，并检测固相的SERS信号强度或T2值强度，实现黄曲霉毒素的定性和定量分析；步骤（1）中所述Au-AgJanusNPs的制备方法如下：将AuNPs溶液与MBIA在50-70℃下混合孵育，并加入对苯二酚和银盐溶液，静置反应2-6h后，获得Au-AgJanusNPs；步骤（1）中所述Au-mushroomNPs的制备方法如下：将AuNPs溶液与DPI在50-70℃下混合孵育，并加入NaOH、DHN和HAuCl4溶液，静置反应12h以上，获得Au-mushroomNPs；步骤（1）中所述黄曲霉毒素的适配体AFB1-Apt的序列为-SH-CH26-GTTGGGCACGTGTTGTCTCTCTGTGTCTCGTGCCCTTCGCTAGGCCCACA；AFB2-Apt序列为-SH-CH26-AGCAGCACAGAGGTCAGATGCTGACACCCTGGACCTTGGGATTCCGGAAGTTTTCCGGTACCTATGCGTGCTACCGTGAA；步骤（2）中AFM1的适配体AFM1-Apt的序列为-SH-CH26-ACTGCTAGAGATTTTCCACAT，AFB1适配体互补链AFB1-Apt-C的序列为-SH-CH26-GAGAGACAACACGTGCCCAAC；所述AFM1适配体互补链AFM1-Apt-C的序列为-SH-CH26-ATGTGGAAAATCTCTAGCAGT，AFB2适配体互补链AFB2-Apt-C的序列为-SH-CH26-GCATCTGACCTCTGTGCTGCT。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江南大学 一种基于免标记SERS金属纳米探针的黄曲霉毒素亚型分析方法

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