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【发明公布】一种利用免疫电镜检测CASA水平及其亚细胞形态的方法_山东第一医科大学附属眼科研究所(山东省眼科研究所、山东第一医科大学附属青岛眼科医院)_202410313839.4 

申请/专利权人:山东第一医科大学附属眼科研究所(山东省眼科研究所、山东第一医科大学附属青岛眼科医院)

申请日:2024-03-19

公开(公告)日:2024-06-14

公开(公告)号:CN118190977A

主分类号:G01N23/04

分类号:G01N23/04;G01N23/20008;G01N1/30;G01N33/558

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.07.02#实质审查的生效;2024.06.14#公开

摘要:本发明提供了一种利用免疫电镜检测CASA水平及其亚细胞形态的方法,属于现代生物医学检测技术领域。本发明利用抗原与抗体特异性结合的原理,用胶体金对组织中的BAG3分子进行特异性染色,在超微结构水平上定位、定性及半定量BAG3阳性的CASA小体,以反映CASA的水平和超显微结构、CASA生理过程及与其他细胞活动的交叉影响。本发明所述方法利用BAG3分子标记从所有自噬小体中特异性识别出了CASA这一亚型,具有特异性高、稳定、可重复、准确性高的优点。

主权项:1.一种利用免疫电镜检测CASA水平及其亚细胞形态的方法,其特征在于,包括如下步骤:将新鲜组织于免疫电镜固定液中固定;组织于0.1M磷酸缓冲液中清洗;采用梯度酒精进行洗脱;利用酒精和树脂对洗脱的组织逐步进行树脂梯度渗透;将树脂渗透后的样本放于树脂中包埋,聚合,取出树脂块;对树脂块切片至70-80nm,镀膜镍网捞片;将含有切片的镍网封闭,然后加一抗Bag3过夜孵育,清洗,加二抗12nm胶体金goat抗rab先室温孵育,后转烘箱孵育,然后转室温复温,清洗后铀复染,烘干,透射电子显微镜下观察并采集图像。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 山东第一医科大学附属眼科研究所(山东省眼科研究所、山东第一医科大学附属青岛眼科医院) 一种利用免疫电镜检测CASA水平及其亚细胞形态的方法

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