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申请/专利权人：浙江健新原力制药有限公司
申请日：2023-08-16
公开（公告）日：2024-06-14
公开（公告）号：CN117025496B
主分类号：C12N1/21
分类号：C12N1/21;C12N15/867;C12R1/19
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.14#授权;2023.11.28#实质审查的生效;2023.11.10#公开
摘要：本发明公开了一种重组质粒的大肠杆菌发酵方法、培养基体系及其应用，对基础培养基、补料培养基的碳源和氮源进行调整，在第一阶段降低细菌生长速度，并通过第二阶段的高碳源补料培养，使得整个发酵过程营养物质供给不会减少，并协同增效促进酶的活性，用于后期质粒合成阶段的前体物质不受影响。所述培养基以及发酵方法可用于大肠杆菌规模化生产慢病毒包装辅助质粒，以获得不低于1000mgmL的产量和95％以上的超螺旋比例。
主权项：1.一种慢病毒包装辅助质粒的大肠杆菌发酵方法，其特征在于：使用基础培养基进行第一阶段培养，所述基础培养基包括碳源和3-7gL的氮源且不含有硫酸铵，所述碳源由15-19gL的甘油和1-5gL的柠檬酸组成，所述基础培养基不含有除柠檬酸以外的酸性调节剂；并且所述碳源具有能减缓大肠杆菌生长的浓度；在第一时刻加入补料培养基进行第二阶段培养，所述补料培养基包括90-110gL的氮源和600-650gL的甘油；然后在第二时刻升温诱导培养；其中，所述第一时刻的OD600为6-8且培养时间为11-13小时。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 浙江健新原力制药有限公司 一种重组质粒的大肠杆菌发酵方法、培养基体系及其应用
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