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申请/专利权人:山东兴瑞生物科技有限公司
摘要:本发明提供靶向肝肿瘤个性化mRNA疫苗的制备方法,属于医用配制品技术领域;所述制备方法包括确定突变多肽、突变多肽的初筛、筛选高亲和性肽段、整合得到新生抗原多肽、获得免疫原性强的新生抗原多肽、合成mRNA、制得mRNA疫苗。本发明可以针对肿瘤患者测序获取突变多肽,筛选得到高亲和的新生抗原多肽,进一步筛选获得免疫原性强的新生抗原多肽,然后采取特定的连接方式,将新生抗原多肽进行连接,制备个性化肿瘤mRNA疫苗;所述mRNA疫苗能够刺激CD8+T细胞,使其IFN‑γ、TNF‑α表达上调,且刺激后的CD8+T细胞能够杀伤肿瘤细胞。
主权项:1.靶向肝肿瘤个性化mRNA疫苗的制备方法,其特征在于:所述制备方法包括确定突变多肽、突变多肽的初筛、筛选高亲和性肽段、整合得到新生抗原多肽、获得免疫原性强的新生抗原多肽、合成mRNA、制得mRNA疫苗;所述获得免疫原性强的新生抗原多肽的方法为将新生抗原多肽合成后,利用试剂盒测试其免疫原性,选取免疫斑点数比阳性对照多的新生抗原多肽,即为免疫原性强的新生抗原多肽;所述合成mRNA的方法为将免疫原性强的新生抗原多肽按照免疫斑点数从多到少的顺序连接合成mRNA;所述确定突变多肽步骤中,对于插入缺失突变产生的移码肽,在整段移码肽的N端添加非突变氨基酸得到突变多肽;所述筛选高亲和性肽段的方法为根据初筛后突变多肽序列和HLA分型结果,筛选出与MHC亲和性高的9-14mer的多肽序列。
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