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申请/专利权人：豪夫迈·罗氏有限公司
申请日：2016-09-23
公开（公告）日：2024-06-18
公开（公告）号：CN108137681B
主分类号：C07K16/22
分类号：C07K16/22;A61K39/00
优先权：["20150923 US 62/222,698","20151228 US 62/271,913"]
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.18#授权;2018.10.19#实质审查的生效;2018.06.08#公开
摘要：本发明提供抗‑VEGF抗体和包含抗‑VEGF抗体的组合物例如，抗体缀合物、融合蛋白、和聚合物制剂及其应用，例如，用于治疗与病理性血管发生相关的病症。本发明还提供鉴别具有改善的性质例如，增强的结合亲和力、稳定性、药代动力学和或表达的抗体变体的方法。
主权项：1.特异性结合血管内皮生长因子VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含下述六个高变区HVRs:aHVR-H1，其由DYWIHSEQIDNO:1的氨基酸序列组成；bHVR-H2，其由GITPAGGYTRYADSVKGSEQIDNO:7的氨基酸序列组成；cHVR-H3，其由FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列组成；dHVR-L1，其由RASQDVSTAVASEQIDNO:8的氨基酸序列组成；eHVR-L2，其由SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列组成；和fHVR-L3，其由QQGYGAPFTSEQIDNO:10的氨基酸序列组成。
全文数据：抗-VEGF抗体的优化的变体[0001]序列表[0002]本申请包含序列表，其以ASCII格式电子提交并且通过引用完全结合在本文中。所述ASCII版本，在2016年9月21日生成，命名为50474-110W03_Sequence_Listing_9_21_16_3丁25，大小为41，764字节。发明领域[0003]本发明总的来说涉及抗-VEGF抗体，以及包含抗-VEGF抗体的组合物例如，抗体缀合物、融合蛋白、和聚合物制剂），其具有用于研究、治疗和诊断目的的有益特性。本发明还涉及鉴别具有改善的特性例如，提高的结合亲和力、稳定性和或表达）的抗体变体的方法。[0004]发明背景[0005]血管发生是一种紧密调控的过程，通过该过程由已存在的血管形成新血管。尽管血管发生在发育过程中对于确保充足的血液循环是重要的，但是多种病症与病理性的血管发生相关，诸如眼部病症（例如，年龄相关性黄斑变性（age-relatedmaculardegeneration，AMD和细胞增生病症（例如，癌症）。血管内皮生长因子VEGF是一种临床上验证的血管发生驱动剂，并且，中和VEGF，例如使用抗-VEGF封闭抗体中和，可以用于治疗与病理性血管发生相关的病症。[0006]对于具有提高的结合亲和力、稳定性、药物代谢动力学和或表达的抗体（如抗-VEGF抗体存在需求，例如，所述抗体用于治疗与病理性血管发生相关的病症。特别地，对于用于眼部病症例如，AMD例如，湿性AMD，糖尿病性黄斑水肿diabeticmacularedema，DME，糖尿病视网膜病（diabeticretinopathy，DR，和视网膜静脉闭塞retinalvein〇CClusi〇n，RV0治疗的长久作用递送的抗体组合物存在需求。另外，对于改进的鉴别具有改善的特性例如，提高的结合亲和力、稳定性、药物代谢动力学和或表达）的此类抗体的方法存在未满足的需求。[0007]发明概述[0008]本发明提供抗-VEGF抗体，包含抗-VEGF抗体的组合物（例如，抗体缀合物、融合蛋白、和聚合物制剂）以及使用它们的方法，例如，用于治疗与病理性血管发生相关的病症例如，眼部病症和细胞增生病症）。本发明还提供鉴别具有改善的特性（，例如，提高的结合亲和力、稳定性、药物代谢动力学，和或表达的抗体变体的方法。[0009]在一个方面中，本发明着重描述特异性结合血管内皮生长因子VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含下述六个高变区（HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDNO:l的氨基酸序列；⑹HVR-H2,其包含Gx1Tpx2GGX3X4X5YX6DSVX7X8SEQIDN0:2的氨基酸序列，其中父1是116或把8，父2是八13或厶找，父3是了5^或1^8，父4是!'111'或6111，父5是厶找，15^，6111，或6111，父6是Ala或Glu，X7是Lys或Glu，并且X8是Gly或Glu;cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDN0:3的氨基酸序列；（dHVR-Li，其包含Rasqx1Vstavageqidno:4的氨基酸序列，其中Asp或Arg;eHVR-L2,其包含X1AsflysGEQIDN0:5的氨基酸序列，其中X1是Ser或Met;和fHVR-L3,其包含X1Qgygx2PFI^SEQIDNO:6的氨基酸序列，其中乂1是6111，Asn，或Thr，并且X2是Ala，Asn，Gln，或Arg。在一些实施方案中，所述抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；（bHVR-H2,其包含GITPAGGYTRYADSVKGSEQIDN0:7、GITPAGGYEYYADSVKGSEQIDN0:21或GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDN0:22的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDN0:3的氨基酸序列；⑹HVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2,其包含SASFLYSSEQIDN0:9的氨基酸序列；和（fHVR-L3，其包含QQGYGAPFTSEQIDN0:10或QQGYGNPFTSEQIDN0:23的氨基酸序列。[0010]在上述方面的一些实施方案中，所述抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2,其包含GITPAGGYTRYADSVKGSEQIDN0:7的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDN0:9的氨基酸序列；和fHVR-L3,其包含QQGYGAPFTSEQIDN0:10的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体进一步包含下述重链可变VH结构域构架区（FR:aFR-Hl，其包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTISSEQIDN0:13的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQAPGKGLEffVASEQID~0:14的氨基酸序列；（^1?-!13，其包含RFTISADTSKNTAYLQMRSLRAEDTAVYYCARSEQIDN0:15的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGTLVTVSSSEQIDN0:16的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体进一步包含下述轻链可变VL结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDNO:17的氨基酸序列；⑹FR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDNO:18的氨基酸序列；（cFR-L3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDN0:19的氨基酸序列；和（dFR-L4,其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。[0011]在上述方面的一些实施方案中，所述抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2,其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDNO:22的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和（fHVR-L3，其包含QQGYGNPFTSEQIDNO:23的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体进一步包含下述VL结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQID腸：17的氨基酸序列；（13?1?-1^2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQID~0:18的氨基酸序列；（^1?-1^3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCSEQIDN0:24的氨基酸序列；和⑹FR-L4,其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。[0012]在上述方面的一些实施方案中，所述抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2,其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDNO:22的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和fHVR-L3其包含QQGYGAPFTSEQIDNO:10的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体进一步包含下述VL结构域FR:aFR-Ll，其包含的氨基酸序列；（bFR-L2,其包含WYQQKPGKAPKLIJYSEQIDN0:18或WYQQKPGEAPKLLIYSEQIDN0:27的氨基酸序列；（cFR-L3,其包含或的氨基酸序列；和⑹FR-L4，其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体进一步包含下述VH结构域FR:aFR-Hl，其包含或EEQLVEEGGGLVQPGESLRLSCAASGFEISSEQIDN0:51的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含的氨基酸序列；（cFR-H3,其包含的氨基酸序列；和dFR-H4，其包含WGQGELVTVSSSEQIDN0:32的氨基酸序列。[0013]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含与SEQIDN0:ll，40,或42的氨基酸序列具有至少95%的序列同一性的氨基酸序列的VH结构域；⑹包含与SEQIDN0:12,41，或46的氨基酸序列具有至少95%的序列同一性的氨基酸序列的VL结构域;或（ca中的VH结构域和⑹中的VL结构域。在一些实施方案中，所述VH结构域进一步包含下述FR:aFR-Hl，其包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTISSEQIDN0:13的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQAPGKGLEWVASEQIDN0:14或WVRQEPGKGLEffVASEQIDN0:39的氨基酸序列；（cFR_H3,其包含RFTISADTSKNTAYLQMRSLRAEDTAVYYCARSEQIDN0:15的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGTLVTVSSSEQIDNO:16的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VH结构域包含SEQIDNO:11的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VL结构域进一步包含下述FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDN0:17或DIQMTQSPSSLSASVGDRVTIDCSEQIDN0:45的氨基酸序列；（bFR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDN0:18的氨基酸序列；（cFR-L3,其包含....或的氨基酸序列；和⑹FR-L4，其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20或FGQGTKVEVKSEQIDN0:55的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VL结构域包含SEQIDNO:12的氨基酸序列。[0014]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的VH结构域，和⑹包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。[0015]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含SEQIDNO:40的氨基酸序列的VH结构域，和⑹包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。[0016]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含SEQIDN0:42的氨基酸序列的VH结构域，和⑹其包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。[0017]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含SEQIDN0:42的氨基酸序列的VH结构域，和⑹其包含SEQIDN0:41的氨基酸序列的VL结构域。[0018]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含与SEQIDNO:33或51的氨基酸序列具有至少95%的序列同一性的氨基酸序列的VH结构域；⑹包含与SEQIDN0:12,34,35,36,37,或38的氨基酸序列具有至少95%的序列同一性的氨基酸序列的VL结构域;或ca中的VH结构域和⑹中的VL结构域。在一些实施方案中，所述抗体进一步包含下述FR:aFR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLELSCAASGFEISSEQIDNO:29或EEQLVEEGGGLVQPGESLRLSCAASGFEISSEQIDNO:52的氨基酸序列；⑹FR-H2,其包含WVRQEPGEGLEWVASEQID:30的氨基酸序列；（：）？1?-!13，其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGELVTVSSSEQIDN0:32的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VH结构域包含SEQIDN0:33的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VH结构域包含SEQIDN0:51的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述抗体进一步包含下述FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDN0:17、DIQMTQSPESLSASVGDEVTITCSEQIDN0:25SDIQMTQSPSSLSASVGDEVTITCSEQIDN0:26的氨基酸序列；（bFR-L2,其包含WYQQKPGKAPKLIJYSEQIDN0:18或WYQQKPGEAPKLLIYSEQIDN0:27的氨基酸序列；（cFR-L3，其包含或的氨基酸序列；和⑹FR-L4，其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VL结构域包含SEQIDN0:34的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VL结构域包含SEQIDN0:35的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VL结构域包含SEQIDNO:36的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VL结构域包含SEQIDNO:37的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VL结构域包含SEQIDNO:12的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述VL结构域包含SEQIDN0:38的氨基酸序列。[0019]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域，和⑹包含SEQIDNO:38的氨基酸序列的VL结构域。[0020]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域，和⑹包含SEQIDNO:34的氨基酸序列的VL结构域。[0021]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域，和⑹包含SEQIDNO:35的氨基酸序列的VL结构域。[0022]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域，和⑹包含SEQIDNO:36的氨基酸序列的VL结构域。[0023]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域，和⑹包含SEQIDNO:37的氨基酸序列的VL结构域。[0024]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域，和⑹包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。[0025]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含SEQIDNO:51的氨基酸序列的VH结构域，和⑹包含SEQIDNO:38的氨基酸序列的VL结构域。[0026]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含SEQIDNO:51的氨基酸序列的VH结构域和⑹包含SEQIDNO:35的氨基酸序列的VL结构域。[0027]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含SEQIDNO:51的氨基酸序列的VH结构域和⑹包含SEQIDNO:37的氨基酸序列的VL结构域。[0028]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含SEQIDNO:51的氨基酸序列的VH结构域和⑹包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。[0029]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：a包含SEQIDNO:48的氨基酸序列的重链和⑹包含SEQIDNO:50的氨基酸序列的轻链。[0030]在另一方面，本发明着重描述特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含a包含SEQIDNO:49的氨基酸序列的重链和⑹包含SEQIDNO:50的氨基酸序列的轻链。[0031]在前述方面的一些实施方案中，所述抗体能够抑制VEGF与VEGF受体的结合。在一些实施方案中，所述VEGF受体是VEGF受体IFlt-I。在一些实施方案中，所述VEGF受体是VEGF受体2KDR〇[0032]在前述方面的一些实施方案中，所述抗体以约2nM或更低的Kd结合人VEGFhVEGF。在一些实施方案中，所述抗体以约75pM-约2nM的Kd结合hVEGF。在一些实施方案中，所述抗体以约75pM-约600pM的Kd结合hVEGF。在一些实施方案中，所述抗体以约75pM-约500pM的Kd结合hVEGF。在一些实施方案中，所述抗体以约80pM的Kd结合hVEGF。在一些实施方案中，所述抗体以约60pM的Kd结合hVEGF。[0033]在前述方面的一些实施方案中，所述抗体具有大于约83.5°C的解链温度meltingtemperature，Tm。在一些实施方案中，所述抗体具有约85°C至约9TC的Tm。在一些实施方案中，所述抗体具有约89°C的Tm。[0034]在前述方面的一些实施方案中，所述抗体具有低于8的等电点pi。在一些实施方案中，所述抗体具有约5-约7的pi。在一些实施方案中，所述抗体具有约5至约6的pi。[0035]在前述方面的一些实施方案中，所述抗体是单克隆的、人的、人源化的或嵌合的。[0036]在前述方面的一些实施方案中，所述抗体是结合VEGF的抗体片段。在一些实施方案中，所述抗体片段选自由下述组成的组:Fab，Fab_C，Fab’-5!1，？¥，8〇?¥，和办13’）2片段。在一些实施方案中，所述抗体片段是Fab。[0037]在前述方面的一些实施方案中，所述抗体是单特异性抗体。在前述方面的其他实施方案中，所述抗体是多特异性抗体。在一些实施方案中，所述多特异性抗体是双特异性抗体。在一些实施方案中，所述双特异性抗体结合VEGF和选自由下述组成的组的第二生物分子：白介素liKlL-Ιβ;白介素-6IL-6;白介素-6受体（IL-6R;白介素-13IL-13;IL-13受体（IL-13R;PDGF;血管生成素;血管生成素2;Tie2;SlP;整联蛋白ανβ3，ανβ5,和α5β1;β动物纤维素（betacelIulin;apelinAPJ;红细胞生成素；补体因子D;TNFa;HtrAl;VEGF受体;ST-2受体;和遗传上与年龄相关性黄斑变性AMD风险相关联的蛋白。在一些实施方案中，所述VEGF受体是VEGFRl，VEGFR2，VEGFR3，膜结合的VEGF-受体mbVEGFR，或可溶的VEGF受体sVEGFR。在一些实施方案中，遗传上与AMD风险相关联的蛋白选自由下述组成的组：补体途径组分C2，因子B，因子H，CFHR3，C3b，C5，C5a，和C3a;HtrAl;ARMS2;ΊΊΜΡ3;HLA;白介素-8IL-8;CX3CR1;TLR3;TLR4;CETP;LIPC，C0L10A1;和TNFRSF10A。[0038]在另一方面，本发明着重描述编码本文所述的任一种抗体的多核苷酸例如，分离的多核苷酸）。在另一方面，本发明着重描述用于表达所述抗体的包含所述多核苷酸的载体例如，表达载体）。在另一方面，本发明着重描述包含前述多核苷酸和或载体的宿主细胞。在一些实施方案中，所述宿主细胞是哺乳动物细胞。在一些实施方案中，所述哺乳动物细胞是293细胞，中国仓鼠卵巢CHO细胞，酵母细胞，或植物细胞。在一些实施方案中，所述宿主细胞是原核细胞。在一些实施方案中，所述原核细胞是大肠杆菌E.coli。[0039]在另一方面，本发明着重描述制备本文所述的抗体的方法，所述方法包括在培养基中培养包含任一前述载体例如，表达载体的宿主细胞。在一些实施方案中，所述方法还包括从所述宿主细胞或所述培养基中回收抗体。在一些实施方案中，所述哺乳动物细胞是293细胞，中国仓鼠卵巢CHO细胞，酵母细胞，或植物细胞。在一些实施方案中，所述宿主细胞是原核细胞。在一些实施方案中，所述原核细胞是大肠杆菌。[0040]在另一方面，本发明着重描述减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的任一前述抗体，由此减少或抑制所述受试者中的血管发生。在一些实施方案中，所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症或细胞增生病症。在一些实施方案中，所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症。在一些实施方案中，所述眼部病症选自由下述组成的组:年龄相关性黄斑变性AMD，黄斑变性maculardegeneration，黄斑水肿，糖尿病性黄斑水肿（diabeticmacularedema，DME包括局部、非中心DME和弥散性、包括中心的DME，视网膜病retinopathy，糖尿病视网膜病DR包括增生性DRPDR，非增生性DRNPDR，和高海拔DRhigh-altitudeDR，其他缺血相关的视网膜病（ischemia-relatedretinopathies，早产儿视网膜病retinopathyofprematurity，ROP，视网膜静脉闭塞RVO包括中央性CRVO和分支（BRVO形式），CNV包括近视CNV，角膜新生血管形成（cornealneovascularization，与角膜新生血管形成相关的疾病，视网膜新生血管形成retinalneovascularization，与视网膜脉络膜新生血管形成相关的疾病，病理性近视pathologicmyopia，希佩尔-林道病vonHippel-Lindaudisease，眼的组织胞楽菌病histoplasmosis，家族性渗出性玻璃体视网膜病（familialexudativevitreoretinopathy，FEVR，冠茨病（Coats’disease，诺里病NorrieDisease，骨质疏松症-假神经胶质瘤综合征（Osteoporosis-PseudogliomaSyndrome，0PPG，结膜下出血subconjunctivalhemorrhage，发红（rubeosis，眼新生血管病（ocularneovasculardisease，新生血管性青光眼（neovascularglaucoma，色素性视网膜炎（retinitispigmentosa，RP，高血压视网膜病（hypertensiveretinopathy，视网膜血管瘤增生retinalangiomatousproliferation，黄斑毛细管扩张maculartelangiectasia，虹膜新生血管形成（irisneovascularization，眼内新生血管形成（intraocularneovascularization，视网膜变性（retinaldegeneration，囊样黄斑水肿（cystoidmacularedema，CME，血管炎（vasculitis，视盘水肿（papilloedema，视网膜炎retinitis，结膜炎conjunctivitis包括传染性结膜炎和非传染性例如，过敏性结膜炎），利伯先天性黑朦Lebercongenitalamaurosis，葡萄膜炎uveitis包括传染性和非传染性葡萄膜炎），脉络膜炎（ch〇r〇iditis，眼组织胞楽菌病（〇cuIarhistoplasmosis，眼睑炎blepharitis，干眼（dryeye，外伤性眼损伤traumaticeyeinjury，和舍格伦病。在一些实施方案中，所述眼部病症是AMD，DME，DR，或RV0。在一些实施方案中，所述眼部病症是AMD。在一些实施方案中，所述AMD是湿性AMD。在一些实施方案中，所述与病理性血管发生相关的病症是细胞增生病症。在一些实施方案中，所述细胞增生病症是癌症。在一些实施方案中，所述癌症选自由下述组成的组:乳腺癌，结肠直肠癌，非小细胞肺癌，非霍奇金淋巴瘤non-Hodgkinslymphoma，NHL，肾癌，前列腺癌，肝癌，头颈癌，黑素瘤，卵巢癌，间皮瘤（mesothelioma，和多发性骨髓瘤multiplemyeloma〇[0041]在另一方面，本发明着重描述用于治疗与病理性血管发生相关的病症的方法，所述方法包括向需要所述治疗的受试者施用有效量的任一种前述抗体。在一些实施方案中，所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症或细胞增生病症。在一些实施方案中，所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症。在一些实施方案中，所述眼部病症选自由下述组成的组:年龄相关性黄斑变性AMD，黄斑变性，黄斑水肿，糖尿病性黄斑水肿DME包括局部、非中心DME和弥散性、包括中心的DME，视网膜病，糖尿病视网膜病DR包括增生性DRPDR，非增生性DRNPDR，和高海拔DR，其他缺血相关的视网膜病，早产儿视网膜病ROP，视网膜静脉闭塞RVO包括中央性CRVO和分支BRVO形式），CNV包括近视CNV，角膜新生血管形成，与角膜新生血管形成相关的疾病，视网膜新生血管形成，与视网膜脉络膜新生血管形成相关的疾病，病理性近视，希佩尔-林道病，眼的组织胞浆菌病，家族性渗出性玻璃体视网膜病FEVR，冠茨病，诺里病，骨质疏松症-假神经胶质瘤综合征OPPG，结膜下出血，发红，眼新生血管病，新生血管性青光眼，色素性视网膜炎（RP，高血压视网膜病，视网膜血管瘤增生，黄斑毛细管扩张，虹膜新生血管形成，眼内新生血管形成，视网膜变性，囊样黄斑水肿CME，血管炎，视盘水肿，视网膜炎，结膜炎包括传染性结膜炎和非传染性例如，过敏性结膜炎），利伯先天性黑朦，葡萄膜炎包括传染性和非传染性葡萄膜炎），脉络膜炎，眼组织胞浆菌病，眼睑炎，干眼，外伤性眼损伤，和舍格伦病。在一些实施方案中，所述眼部病症是41«，01^，01?，或1^0。在一些实施方案中，所述眼部病症是410。在一些实施方案中，所述AMD是湿性AMD。在一些实施方案中，所述与病理性血管发生相关的病症是细胞增生病症。在一些实施方案中，所述细胞增生病症是癌症。在一些实施方案中，所述癌症选自由下述组成的组:乳腺癌，结肠直肠癌，非小细胞肺癌，非霍奇金淋巴瘤NHL，肾癌，前列腺癌，肝癌，头颈癌，黑素瘤，卵巢癌，间皮瘤，和多发性骨髓瘤。[0042]在另一方面，本发明着重描述抑制患有与不需要的血管通透性相关的病症的受试者中的血管通透性的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的任一种前述抗体，由此抑制所述受试者中的血管通透性。[0043]在另一方面，本发明着重描述治疗与不需要的血管通透性相关的病症的方法，所述方法包括向需要此种治疗的受试者施用有效量的任一种前述抗体。[0044]在前述方面的一些实施方案中，所述与不需要的血管通透性相关的病症选自由下述组成的组：与脑肿瘤相关的水肿，与恶性肿瘤相关的腹水，梅格斯综合征（Meigs’syndrome，肺部炎症，肾病综合征（nephroticsyndrome，心包积液（pericardialeffusion，胸腔积液pleuraleffusion，和与心血管病相关的通透性。[0045]在前述方面的一些实施方案中，所述方法还包括向受试者施用有效量的第二药剂，其中所述第二药剂选自由下述组成的组:另一种抗体，化疗剂，细胞毒性剂，抗血管生成剂，免疫抑制剂，前药，细胞因子，细胞因子拮抗剂，细胞毒性放射疗法，皮质类固醇，止吐药，癌症疫苗，止痛剂，生长抑制剂，和与第二生物分子结合的化合物。在一些实施方案中，所述抗血管生成剂是VEGF拮抗剂。在一些实施方案中，所述VEGF拮抗剂是抗-VEGF抗体，抗_VEGF受体抗体，可溶性VEGF受体融合蛋白，适体，抗-VEGFDARPin©，或VEGFR酪氨酸激酶抑制剂。在一些实施方案中，所述抗-VEGF抗体是雷珠单抗ranibiZumab，LUCENTIS®，RTH-258,或双特异性抗-VEGF抗体。在一些实施方案中，所述双特异性抗-VEGF抗体是抗-VEGF抗-Ang2抗体。在一些实施方案中，所述抗-VEGF抗-Ang2抗体是RG-7716。在一些实施方案中，所述可溶性VEGF受体融合蛋白是阿柏西普afliberCept，EYLEA⑧）。在一些实施方案中，所述适体是培加尼布pegaptanib，MACUGEN⑧）。在一些实施方案中，所述抗-VEGFDARPin®是abiciparpegol。在一些实施方案中，所述VEGFR酪氨酸激酶抑制剂选自由下述组成的组:4_4-溴-2-氟苯胺基-6-甲氧基-7-1-甲基昵啶-4-基甲氧基喹唑啉ZD6474，4_4-氟-2-甲基吲哚-5-基氧基-6-甲氧基-7-3-吡咯烷-1-基丙氧基喹唑啉AZD2171，伐他拉尼（vatalanibPTK787，semaxaminibSU5416，和SUTENT:®舒尼替尼（sunitinib。在一些实施方案中，第二生物分子选自由下述组成的组：11^-10;11^-6;IL-6R;IL-13;IL-13R;PDGF;血管生成素;血管生成素2;Tie2;SlP;整联蛋白ανβ3，ανβ5，和α5β1;β动物纤维素;apelinAPJ;红细胞生成素;补体因子D;TNFa;HtrAl;VEGF受体;ST-2受体；和遗传上与AMD风险相关联的蛋白。在一些实施方案中，所述VEGF受体是VEGFRl，VEGFR2，VEGFR3，mbVEGFR，或sVEGFR。在一些实施方案中，所述遗传上与AMD风险相关联的蛋白选自由下述组成的组:补体途径组分C2，因子B，因子H，CFHR3，C3b，C5，C5a，和C3a;HtrAl;ARMS2;ΊΊΜΡ3;HLA;IL-8;CX3CR1;TLR3;TLR4;CETP;LIPC，C0L10A1;和TNFRSF10A。在一些实施方案中，所述与第二生物分子结合的化合物是抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，所述抗原结合抗体片段选自由下述组成的组:Fab，Fab-C，Fab’-SH，Fv，scFv，和Fab’）2片段。[0046]在前述方面的一些实施方案中，抗体以玻璃体内、眼部、眼内、近巩膜、眼球筋膜囊下（subtenonly、脉络膜表面、局部、静脉内、肌肉内、皮内、经皮、动脉内、腹膜内、病变内、颅内、关节内、前列腺内、胸膜内、气管内、鞘内、鼻内、阴道内、直肠内、局部、瘤内、腹膜内、腹膜、心室内、皮下、结膜下、囊泡内、粘膜、心包内、脐内、眶内、口服、经皮、通过吸入、通过注射、通过滴眼液、通过植入、通过输注、通过连续输注、通过直接局部灌注浸浴靶细胞、通过导管、通过灌洗、以霜剂、或以液体组合物施用。在一些实施方案中，抗体以玻璃体内、目艮部、眼内、近巩膜、眼球筋膜囊下、脉络膜表面或局部施用。在一些实施方案中，抗体通过注射玻璃体内施用。在一些实施方案中，抗体通过滴眼液或软膏局部施用。在一些实施方案中，抗体通过通道递送装置施用。在一些实施方案中，受试者是人。[0047]在另一方面，本发明着重描述包含任一种前述抗体的药物组合物。在一些实施方案中，药物制剂还包含聚合物。在一些实施方案中，所述聚合物是可生物降解的聚合物。在一些实施方案中，药物组合物配制为聚合物溶剂贮库制剂depot，聚合物植入物，或聚合物胶束。在一些实施方案中，聚合物是聚乳酸聚乙醇酸PLGA共聚物。在一些实施方案中，所述药物组合物配制成PLGA棒PLGArod。在一些实施方案中，所述药物组合物用于治疗哺乳动物中与病理性血管发生相关的病症或与不需要的血管通透性相关的病症。在一些实施方案中，所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症或细胞增生病症。在一些实施方案中，所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症。在一些实施方案中，所述眼部病症选自由下述组成的组：年龄相关性黄斑变性AMD，黄斑变性，黄斑水肿，糖尿病性黄斑水肿DME包括局部、非中心DME和弥散性、包括中心的DME，视网膜病，糖尿病视网膜病DR包括增生性DRPDR，非增生性DRNPDR，和高海拔DR，其他缺血相关的视网膜病，早产儿视网膜病ROP，视网膜静脉闭塞RVO包括中央性CRVO和分支BRVO形式），CNV包括近视CNV，角膜新生血管形成，与角膜新生血管形成相关的疾病，视网膜新生血管形成，与视网膜脉络膜新生血管形成相关的疾病，病理性近视，希佩尔-林道病，眼的组织胞浆菌病，家族性渗出性玻璃体视网膜病FEVR，冠茨病，诺里病，骨质疏松症-假神经胶质瘤综合征OPPG，结膜下出血，发红，眼新生血管病，新生血管性青光眼，色素性视网膜炎RP，高血压视网膜病，视网膜血管瘤增生，黄斑毛细管扩张，虹膜新生血管形成，眼内新生血管形成，视网膜变性，囊样黄斑水肿CME，血管炎，视盘水肿，视网膜炎，结膜炎包括传染性结膜炎和非传染性例如，过敏性结膜炎），利伯先天性黑朦，葡萄膜炎包括传染性和非传染性葡萄膜炎），脉络膜炎，眼组织胞浆菌病，眼睑炎，干眼，外伤性眼损伤，和舍格伦病。在一些实施方案中，所述眼部病症是△1«，0腿，01?，或1^0。在一些实施方案中，所述眼部病症是AMD。在一些实施方案中，所述AMD是湿性AMD。在一些实施方案中，所述与病理性血管发生相关的病症是细胞增生病症。在一些实施方案中，所述细胞增生病症是癌症。在一些实施方案中，所述癌症选自由下述组成的组：乳腺癌，结肠直肠癌，非小细胞肺癌，非霍奇金淋巴瘤NHL，肾癌，前列腺癌，肝癌，头颈癌，黑素瘤，卵巢癌，间皮瘤，和多发性骨髓瘤。在一些实施方案中，所述与不需要的血管通透性相关的病症选自由下述组成的组:与脑肿瘤相关的水肿，与恶性肿瘤相关的腹水，梅格斯综合征，肺部炎症，肾病综合征，心包积液，胸腔积液，和与心血管病相关的通透性。在一些实施方案中，所述药物组合物还包含第二药剂，其中所述第二药剂选自由下述组成的组:另一种抗体，化疗剂，细胞毒性剂，抗血管生成剂，免疫抑制剂，前药，细胞因子，细胞因子拮抗剂，细胞毒性放射疗法，皮质类固醇，止吐药，癌症疫苗，止痛剂，生长抑制剂，和与第二生物分子结合的化合物。在一些实施方案中，所述抗血管生成剂是VEGF拮抗剂。在一些实施方案中，所述VEGF拮抗剂是抗-VEGF抗体，抗-VEGF受体抗体，可溶性VEGF受体融合蛋白，适体，抗-VEGFDARPin®，或VEGFR酪氨酸激酶抑制剂。在一些实施方案中，所述抗-VEGF抗体是雷珠单抗LUCENTiS®，RTH-258，或双特异性抗-VEGF抗体。在一些实施方案中，所述双特异性抗-VEGF抗体是抗-VEGF抗-Ang2抗体。在一些实施方案中，所述抗-VEGF抗-Ang2抗体是RG-7716。在一些实施方案中，所述可溶性VEGF受体融合蛋白是阿柏西普（EYLEA®。在一些实施方案中，所述适体是培加尼布MACUGEN®。在一些实施方案中，所述抗-VEGFDARPin®是abiciparpegol。在一些实施方案中，所述VEGFR酪氨酸激酶抑制剂选自由下述组成的组:4-4-溴-2-氟苯胺基-6-甲氧基-7-1-甲基昵啶-4-基甲氧基）喹唑啉（ZD6474，4-4-氟-2-甲基吲哚-5-基氧基）-6-甲氧基-7-3-吡咯烷-1-基丙氧基）喹唑啉（AZD2171，伐他拉尼（PTK787，SemaxaminibSU5416，和SUTENT®舒尼替尼）。在一些实施方案中，第二生物分子选自由下述组成的组：11-10;11^-6;11^-61?;11^-13;11^-131?;?〇6?;血管生成素；血管生成素2;Tie2;SlP;整联蛋白ανβ3，ανβ5，和α5β1;β动物纤维素;apelinAPJ;红细胞生成素;补体因子D;TNFa;HtrAl;VEGF受体;ST-2受体;和遗传上与AMD风险相关联的蛋白。在一些实施方案中，所述VEGF受体是VEGFRl，VEGFR2，VEGFR3，mbVEGFR，或sVEGFR。在一些实施方案中，所述遗传上与AMD风险相关联的蛋白选自由下述组成的组：补体途径组分C2,因子B，因子H，CFHR3，C3b，C5，C5a，和C3a;HtrAl;ARMS2;ΊΊΜΡ3;HLA;IL-8;CX3CR1;TLR3;TLR4;CETP;LIPC，C0L10A1;和TNFRSF10A。在一些实施方案中，所述与第二生物分子结合的化合物是抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，所述抗原结合抗体片段选自由下述组成的组:？13^13-[0048]在另一方面，本发明着重描述包含下述的抗体缀合物：（i任一种前述抗体，和ii共价连接在所述抗体上的亲水聚合物。在一些实施方案中，所述亲水聚合物是透明质酸HA聚合物或聚乙二醇PEG聚合物。在一些实施方案中，所述亲水聚合物是HA聚合物。在一些实施方案中，所述HA聚合物具有约1兆道耳顿MDa或更低的分子量。在前述方面的一些实施方案中，所述HA聚合物具有约25kDa-约500kDa的分子量。在一些实施方案中，所述HA聚合物具有约IOOkDa-约250kDa的分子量。在一些实施方案中，所述HA聚合物具有约200kDa的分子量。在一些实施方案中，所述HA聚合物不是交联的。在一些实施方案中，所述抗体是结合VEGF的抗体片段。在一些实施方案中，所述抗体片段选自由下述组成的组:Fab，Fab-C，Fab’，Fab’-SH，Fv，scFv，和Fab’）2片段。在一些实施方案中，所述抗体片段是Fab，Fab-C，或Fab’。在一些实施方案中，所述抗体缀合物具有约IOnm-约60nm的流体动力学半径。在一些实施方案中，所述抗体缀合物具有约25nm-约35nm的流体动力学半径。在一些实施方案中，所述流体动力学半径为约28nm。在一些实施方案中，相对于不与所述亲水聚合物共价连接的参比抗体，所述抗体缀合物具有增加的眼部半衰期。在一些实施方案中，相对于参比抗体，所述眼部半衰期增加至少约2-倍。在一些实施方案中，相对于参比抗体，所述眼部半衰期增加至少约4-倍。在一些实施方案中，所述眼部半衰期是玻璃体半衰期vitrealhalf-life。在一些实施方案中，所述参比抗体与所述抗体缀合物的抗体相同。[0049]在另一方面，本发明着重描述包含下述的抗体缀合物：（i特异性结合VEGF的抗体，和（ii共价连接在所述抗体上的HA聚合物，其中所述HA聚合物具有IMDa或更低的分子量。在前述方面的一些实施方案中，所述HA聚合物具有约25kDa-约500kDa的分子量。在一些实施方案中，所述HA聚合物具有约IOOkDa-约250kDa的分子量。在一些实施方案中，所述HA聚合物具有约200kDa的分子量。在一些实施方案中，所述HA聚合物不是交联的。在一些实施方案中，所述抗体是结合VEGF的抗体片段。在一些实施方案中，所述抗体片段选自由下述组成的组:Fab，Fab-C，Fab’，Fab’-SH，Fv，scFv，和Fab’）2片段。在一些实施方案中，所述抗体片段是Fab，Fab-C，或Fab’。在一些实施方案中，所述抗体缀合物具有约IOnm-约60nm的流体动力学半径。在一些实施方案中，所述抗体缀合物具有约25nm-约35nm的流体动力学半径。在一些实施方案中，所述流体动力学半径为约28nm。在一些实施方案中，相对于不与所述亲水聚合物共价连接的参比抗体，所述抗体缀合物具有增加的眼部半衰期。在一些实施方案中，相对于参比抗体，所述眼部半衰期增加至少约2-倍。在一些实施方案中，相对于参比抗体，所述眼部半衰期增加至少约4-倍。在一些实施方案中，所述眼部半衰期是玻璃体半衰期。在一些实施方案中，所述参比抗体与所述抗体缀合物中的抗体相同。[0050]在前述方面的一些实施方案中，所述抗体通过可逆的前药接头共价连接在所述聚合物上。在一些实施方案中，所述聚合物是水凝胶。在一些实施方案中，所述水凝胶是基于PEG的水凝胶。在一些实施方案中，所述水凝胶采取微粒珠的形状。[0051]在另一方面，本发明着重描述包含共价连接在HA结合结构域上的任一种前述抗体的融合蛋白。在一些实施方案中，所述HA结合结构域共价连接至所述抗体的重链或轻链上。在一些实施方案中，所述HA结合结构域共价连接至所述重链的C-端或所述轻链的C-端。在一些实施方案中，所述HA结合结构域共价连接至所述重链的C-端。在一些实施方案中，所述HA结合结构域共价连接至所述轻链的C-端。在一些实施方案中，所述融合蛋白还包含接头，所述结构位于所述抗体与所述HA结合结构域之间。在一些实施方案中，所述接头包含GGGGSSEQIDN0:61的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述接头由GGGGSSEQIDN0:61的氨基酸序列组成。在一些实施方案中，所述抗体是结合VEGF的抗体片段。在一些实施方案中，所述抗体片段选自由下述组成的组:Fab，Fab_C，Fab’，Fab’-5!1，？¥，8〇?¥，和阪13’）2片段。在一些实施方案中，所述抗体片段是Fab。在一些实施方案中，所述HA结合结构域共价连接至Fab的CHl结构域的C-端。在一些实施方案中，所述HA结合蛋白共价连接在Fab的CL结构域的C-端。在一些实施方案中，所述HA结合结构域选自由下述组成的组：连接模块（linkmoduIe，G1结构域，和富含赖氨酸的寡肽。在一些实施方案中，所述HA结合结构域是连接模块。在一些实施方案中，所述连接模块选自由下述组成的组：肿瘤坏死因子刺激的基因6TSG6，CD44,淋巴管内皮乙酰透明质酸受体ILYVE-I，乙酰透明质酸和蛋白聚糖连接蛋白（HAPLN1，HAPLN2，HAPLN3，HAPLN4,聚集蛋白聚糖aggrecan，短蛋白聚糖brevican，神经聚糖neurocan，磷酸聚糖phosphacan，多功能蛋白聚糖（versican，CAB61358，KIA0527，stabiIin-1，和stabiIin-2连接模块。在一些实施方案中，所述连接模块是TSG6连接模块。在一些实施方案中，所述TSG6连接模块是人TSG6连接模块或兔TSG6连接模块。在一些实施方案中，所述TSG连接模块是人TSG6连接模块。在一些实施方案中，所述人TSG6连接模块包含人TSG6的氨基酸残基36-128。[0052]在前述方面的一些实施方案中，所述融合蛋白还包含至少一个另外的HA结合结构域。在一些实施方案中，所述至少一个另外的HA结合结构域共价连接至所述抗体的重链或轻链上。在一些实施方案中，所述至少一个另外的HA结合蛋白通过接头连接在所述抗体上。在一些实施方案中，所述接头包含GGGGSSEQIDN0:61的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述结构由GGGGSSEQIDN0:61的氨基酸序列组成。在一些实施方案中，第一HA结合结构域共价连接至重链上，第二HA结合结构域共价连接至轻链上。在一些实施方案中，第一HA结合结构域共价连接至重链的C-端，第二HA结合结构域共价连接至轻链的C-端。在一些实施方案中，所述至少一个另外的HA结合蛋白选自由下述组成的组:连接模块，Gl结构域，和富含赖氨酸的寡肽。在一些实施方案中，所述至少一个另外的HA结合蛋白是连接模块。在一些实施方案中，所述连接模块是TSG6连接模块。在一些实施方案中，所述TSG6连接模块是人TSG6连接模块或兔TSG6连接模块。在一些实施方案中，所述TSG6连接模块是人TSG6连接模块。在一些实施方案中，所述人TSG6连接模块包含人TSG6的氨基酸残基36-128。[0053]在前述方面的一些实施方案中，所述融合蛋白特异性结合VEGF和HA。在一些实施方案中，所述融合蛋白以约2μΜ或更低的Kd结合HA。在一些实施方案中，所述融合蛋白以约InM-约500ηΜ的Kd结合ΗΑ。在一些实施方案中，所述融合蛋白以约InM-约50ηΜ的Kd结合ΗΑ。在一些实施方案中，所述融合蛋白以约IOnM的Kd结合ΗΑ。[0054]在前述方面的一些实施方案中，相对于没有共价连接HA结合结构域的参比抗体，所述融合蛋白具有增加的眼部半衰期。在一些实施方案中，相对于参比抗体，所述眼部半衰期增加至少约2-倍。在一些实施方案中，相对于参比抗体，所述眼部半衰期增加至少约4-倍。在一些实施方案中，所述眼部半衰期是玻璃体半衰期。在一些实施方案中，所述参比抗体与所述融合蛋白中的抗体相同。[0055]在另一方面，本发明着重描述减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的任一种前述抗体缀合物，由此减少或抑制所述受试者中的血管发生。[0056]在另一方面，本发明着重描述用于治疗与病理性血管发生相关的病症的方法，所述方法包括向需要所述治疗的受试者施用有效量的任一种前述抗体缀合物。[0057]在另一方面，本发明着重描述减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的任一种前述融合蛋白，由此减少或抑制所述受试者中的血管发生。[0058]在另一方面，本发明着重描述用于治疗与病理性血管发生相关的病症的方法，所述方法包括向需要所述治疗的受试者施用有效量的任一种前述融合蛋白。[0059]在前述方面的一些实施方案中，所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症。在一些实施方案中，所述眼部病症选自由下述组成的组:AMD，黄斑变性，黄斑水肿，DME包括局部、非中心DME和弥散性、包括中心的DME，视网膜病，DR包括PDR，NPDR，和高海拔DR，其他缺血相关的视网膜病，ROP，RVO包括CRVO和BRVO形式），CNV包括近视CNV，角膜新生血管形成，与角膜新生血管形成相关的疾病，视网膜新生血管形成，与视网膜脉络膜新生血管形成相关的疾病，病理性近视，希佩尔-林道病，眼的组织胞浆菌病，FEVR，冠茨病，诺里病，0PPG，结膜下出血，发红，眼新生血管病，新生血管性青光眼，RP，高血压视网膜病，视网膜血管瘤增生，黄斑毛细管扩张，虹膜新生血管形成，眼内新生血管形成，视网膜变性，CME，血管炎，视盘水肿，视网膜炎，结膜炎包括传染性结膜炎和非传染性例如，过敏性结膜炎），利伯先天性黑朦，葡萄膜炎包括传染性和非传染性葡萄膜炎），脉络膜炎，眼组织胞浆菌病，眼睑炎，干眼，外伤性眼损伤，和舍格伦病。在一些实施方案中，所述眼部病症是AMD，DME，DR，或RV0。在一些实施方案中，所述眼部病症是AMD。在一些实施方案中，所述AMD是湿性細。[0060]在前述方面的一些实施方案中，所述方法还包括向所述受试者施用有效量的第二药剂，其中所述第二药剂选自由下述组成的组:另一种抗体，抗血管生成剂，细胞因子，细胞因子拮抗剂，皮质类固醇，止痛剂，和与第二生物分子结合的化合物。在一些实施方案中，所述抗血管生成剂是VEGF拮抗剂。在一些实施方案中，所述VEGF拮抗剂是抗-VEGF抗体，抗_VEGF受体抗体，可溶性VEGF受体融合蛋白，适体，抗-VEGFDARPin®,或VEGFR酪氨酸激酶抑制剂。在一些实施方案中，所述抗-VEGF抗体是雷珠单抗LUCENTIS®，RTH-258，或双特异性抗-VEGF抗体。在一些实施方案中，所述双特异性抗-VEGF抗体是抗-VEGF抗-Ang2抗体。在一些实施方案中，所述抗-VEGF抗-Ang2抗体是RG-7716。在一些实施方案中，所述可溶性VEGF受体融合蛋白是阿柏西普EYLEA®。在一些实施方案中，所述适体是培加尼布MACUGEN®.。在一些实施方案中，所述抗-VEGFDARPin®:是abiciparpegol。在一些实施方案中，所述VEGFR酪氨酸激酶抑制剂选自由下述组成的组:4_4-溴-2-氟苯胺基-6-甲氧基-7-1-甲基昵啶-4-基甲氧基喹唑啉ZD6474，4_4-氟-2-甲基吲哚-5-基氧基-6-甲氧基-7-3-吡咯烷-1-基丙氧基喹唑啉AZD2171，伐他拉尼PTK787，semaxaminibSU5416，和SUTENT®舒尼替尼）。在一些实施方案中，第二生物分子选自由下述组成的组：几-10;11^-6;11^-61?;11^-13;11^-131?;?〇6?;血管生成素；血管生成素2;1162;31?;整联蛋白ανβ3，ανβ5，和α5β1;β动物纤维素；apelinAPJ;红细胞生成素；补体因子D;TNFa;HtrAl;VEGF受体;ST-2受体;和遗传上与AMD风险相关联的蛋白。在一些实施方案中，所述VEGF受体是VEGFRl，VEGFR2，VEGFR3，mbVEGFR，或sVEGFR。在一些实施方案中，所述遗传上与AMD风险相关联的蛋白选自由下述组成的组：补体途径组分C2,因子B，因子H，CFHR3，C3b，C5，C5a，和C3a;HtrAl;ARMS2;ΊΊΜΡ3;HLA;IL-8;CX3CR1;TLR3;TLR4;CETP;LIPC，C0L10A1;和TNFRSF10A。在一些实施方案中，所述与第二生物分子结合的化合物是抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，所述抗原结合抗体片段选自由下述组成的组:Fab，Fab-C，Fab’_SH，Fv，scFv，和Fab’）2片段。[0061]在前述方面的一些实施方案中，所述抗体缀合物以玻璃体内、眼部、眼内、近巩膜、眼球筋膜囊下、脉络膜表面、局部、静脉内、肌肉内、皮内、经皮、动脉内、腹膜内、病变内、颅内、关节内、前列腺内、胸膜内、气管内、鞘内、鼻内、阴道内、直肠内、局部、瘤内、腹膜内、腹膜、心室内、皮下、结膜下、囊泡内、粘膜、心包内、脐内、眶内、口服、经皮、通过吸入、通过注射、通过滴眼液、通过植入、通过输注、通过连续输注、通过直接局部灌注浸浴靶细胞、通过导管、通过灌洗、以霜剂、或以液体组合物施用。在一些实施方案中，抗体缀合物以玻璃体内、眼部、眼内、近巩膜、眼球筋膜囊下、脉络膜表面或局部施用。在一些实施方案中，抗体缀合物通过注射玻璃体内施用。在一些实施方案中，抗体缀合物通过滴眼液或软膏局部施用。在一些实施方案中，抗体缀合物通过通道递送装置portdeliverydevice施用。[0062]在前述方面的一些实施方案中，所述融合蛋白以玻璃体内、眼部、眼内、近巩膜、眼球筋膜囊下、脉络膜表面、局部、静脉内、肌肉内、皮内、经皮、动脉内、腹膜内、病变内、颅内、关节内、前列腺内、胸膜内、气管内、鞘内、鼻内、阴道内、直肠内、局部、瘤内、腹膜内、腹膜、心室内、皮下、结膜下、囊泡内、粘膜、心包内、脐内、眶内、口服、经皮、通过吸入、通过注射、通过滴眼液、通过植入、通过输注、通过连续输注、通过直接局部灌注浸浴靶细胞、通过导管、通过灌洗、以霜剂、或以液体组合物施用。在一些实施方案中，融合蛋白以玻璃体内、目艮部、眼内、近巩膜、眼球筋膜囊下、脉络膜表面或局部施用。在一些实施方案中，融合蛋白通过注射玻璃体内施用。在一些实施方案中，融合蛋白通过滴眼液或软膏局部施用。在一些实施方案中，融合蛋白通过通道递送装置施用。在一些实施方案中，受试者是人。[0063]在另一方面，本发明着重描述包含任一种前述抗体缀合物的药物组合物。[0064]在另一方面，本发明着重描述包含任一种前述融合蛋白的药物组合物。[0065]在前述方面的一些实施方案中，所述药物组合物用于治疗哺乳动物中与病理性血管发生相关的病症。在一些实施方案中，所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症。在一些实施方案中，所述眼部病症选自由下述组成的组:AMD，黄斑变性，黄斑水肿，DME包括局部、非中心DME和弥散性、包括中心的DME，视网膜病，DR包括TOR，NPDR，和高海拔DR，其他缺血相关的视网膜病，ROP，RVO包括CRVO和BRVO形式），CNV包括近视CNV，角膜新生血管形成，与角膜新生血管形成相关的疾病，视网膜新生血管形成，与视网膜脉络膜新生血管形成相关的疾病，病理性近视，希佩尔-林道病，眼的组织胞浆菌病，FEVR，冠茨病，诺里病，0PPG，结膜下出血，发红，眼新生血管病，新生血管性青光眼，RP，高血压视网膜病，视网膜血管瘤增生，黄斑毛细管扩张，虹膜新生血管形成，眼内新生血管形成，视网膜变性，CME，血管炎，视盘水肿，视网膜炎，结膜炎包括传染性结膜炎和非传染性例如，过敏性结膜炎），利伯先天性黑朦，葡萄膜炎包括传染性和非传染性葡萄膜炎），脉络膜炎，眼组织胞浆菌病，眼睑炎，干眼，外伤性眼损伤，和舍格伦病。在一些实施方案中，所述眼部病症是AMD，DME，DR，或RV0。在一些实施方案中，所述眼部病症是AMD。在一些实施方案中，所述AMD是湿性細。[0066]在前述方面的一些实施方案中，所述药物组合物还包含第二药剂，其中所述第二药剂选自由下述组成的组:另一种抗体，抗血管生成剂，细胞因子，细胞因子拮抗剂，皮质类固醇，止痛剂，和与第二生物分子结合的化合物。在一些实施方案中，所述抗血管生成剂是VEGF拮抗剂。在一些实施方案中，所述VEGF拮抗剂是抗-VEGF抗体，抗-VEGF受体抗体，可溶性VEGF受体融合蛋白，适体，抗-VEGFDARPin®，或VEGFR酪氨酸激酶抑制剂。在一些实施方案中，所述抗-VEGF抗体是雷珠单抗LUCENTIS®，RTH-258,或双特异性抗-VEGF抗体。在一些实施方案中，所述双特异性抗-VEGF抗体是抗-VEGF抗-Ang2抗体。在一些实施方案中，所述抗-VEGF抗-Ang2抗体是RG-7716。在一些实施方案中，所述可溶性VEGF受体融合蛋白是阿柏西普（EYLEA:®。在一些实施方案中，所述适体是培加尼布{MACUGEN®。_在一些实施方案中，所述抗-VEGFDARPin®是abiciparpegol。在一些实施方案中，所述VEGFR酪氨酸激酶抑制剂选自由下述组成的组:4_4-溴-2-氟苯胺基-6-甲氧基-7-1-甲基昵啶-4-基甲氧基）喹唑啉（ZD6474，4-4-氟-2-甲基吲哚-5-基氧基）-6-甲氧基-7-3-吡咯烷-1-基丙氧基）喹唑啉（AZD2171，伐他拉尼（PTK787，semaxaminibSU5416，和SUTENT®舒尼替尼）。在一些实施方案中，第二生物分子选自由下述组成的组：11-10;11^-6;11^-61?;11^-13;11^-131?;?〇6?;血管生成素；血管生成素2;Tie2;SlP;整联蛋白ανβ3，ανβ5，和α5β1;β动物纤维素;apelinAPJ;红细胞生成素;补体因子D;TNFa;HtrAl;VEGF受体;ST-2受体;和遗传上与AMD风险相关联的蛋白。在一些实施方案中，所述VEGF受体是VEGFRl，VEGFR2，VEGFR3，mbVEGFR，或sVEGFR。在一些实施方案中，所述遗传上与AMD风险相关联的蛋白选自由下述组成的组：补体途径组分C2,因子B，因子H，CFHR3，C3b，C5，C5a，和C3a;HtrAl;ARMS2;ΊΊΜΡ3;HLA;IL-8;CX3CR1;TLR3;TLR4;CETP;LIPC，C0L10A1;和TNFRSF10A。在一些实施方案中，所述与第二生物分子结合的化合物是抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，所述抗原结合抗体片段选自由下述组成的组:？13^13-[0067]在另一方面，本发明着重描述鉴别赋予提高的抗体与靶分子结合的氨基酸残基变化的方法，所述方法包括：（a提供包含编码候选抗体变体的核酸的展示文库，其中，与参比抗体相比，每种候选抗体变体在VH或VL中包含氨基酸残基变化，并且，其中在所述VH或VL的每个位置处的氨基酸残基变化存在于所述展示文库中；（b基于候选抗体变体与靶分子的结合对所述展示文库进行分选，以形成分选的文库，其中所述分选的文库包含与参比抗体相比具有提高的与靶分子的结合的候选抗体变体;和C比较通过大规模平行测序确定的每个氨基酸残基变化在展示文库和分选的文库中存在的频率，由此确定与展示文库相比，每个氨基酸残基变化是否在分选的文库中富集，由此，如果与展示文库相比，该氨基酸残基变化在分选的文库中富集，则将该氨基酸残基变化鉴别为赋予提高的靶分子结合。[0068]在另一方面，本发明着重描述鉴别赋予抗体提高的稳定性的氨基酸残基变化的方法，所述方法包括：（a提供包含编码候选抗体变体的核酸的展示文库，其中，与参比抗体相比，每种候选抗体变体在VH或VL中包含氨基酸残基变化，并且，其中在所述VH或VL的每个位置处的氨基酸残基变化存在于所述展示文库中；（b基于候选抗体变体与靶分子的结合对所述展示文库进行分选，以形成分选的文库，其中所述分选的文库包含与参比抗体相比具有提高的稳定性的候选抗体变体;和c比较通过大规模平行测序确定的每个氨基酸残基变化在展示文库和分选的文库中存在的频率，由此确定与展示文库相比，每个氨基酸残基变化是否在分选的文库中富集，由此，如果与展示文库相比，该氨基酸残基变化在分选的文库中富集，则将该氨基酸残基变化鉴别为赋予抗体提高的稳定性。[0069]在前述方面的一些实施方案中，所述方法还包括在步骤b后通过大规模平行测序确定每个氨基酸残基变化在展示文库和分选的文库中存在的频率。[0070]在前述方面的一些实施方案中，与展示文库相比，所述氨基酸残基变化在分选的文库中富集至少2倍。[0071]在前述方面的一些实施方案中，所述展示文库选自由下述组成的组：噬菌体展示文库，细菌展示文库，酵母展示文库，哺乳动物展示文库，核糖体展示文库，和mRNA展示文库。在一些实施方案中，所述展示文库是噬菌体展示文库。[0072]在前述方面的一些实施方案中，所述氨基酸残基变化由简并密码子组编码。在一些实施方案中，所述简并密码子组是NNK或NNS密码子组，其中N是A，C，G，或T;K是G或T;并且S是C或G。在一些实施方案中，所述简并密码子组是NNK密码子组。[0073]在前述方面的一些实施方案中，步骤b的分选包括使展示文库与固定的靶分子或表位接触。[0074]在前述方面的一些实施方案中，步骤b的分选包括使展示文库与可溶的靶分子或表位接触。[0075]在前述方面的一些实施方案中，所述展示文库包含至少IxlO6个候选抗体变体。在一些实施方案中，所述展示文库包含至少IxlO8个抗体变体。在一些实施方案中，所述展示文库包含至少IxlO9个抗体变体。[0076]在前述方面的一些实施方案中，所述大规模平行测序包括深度测序、超深度测序和或下一代测序。[0077]在前述方面的一些实施方案中，所述抗体是单克隆抗体。[0078]在前述方面的一些实施方案中，所述抗体是IgG抗体。[0079]在前述方面的一些实施方案中，所述抗体是抗体片段。在一些实施方案中，抗体片段选自由下述组成的组:？13,80?¥^¥^13’^13’-3!^灿’）2，和双抗体。在一些实施方案中，所述抗体片段是Fab。[0080]在前述方面的一些实施方案中，所述方法还包括产生包含通过所述方法的步骤鉴别的氨基酸残基变化的抗体。[0081]在一些方面中，任一种前述抗体可以用于制备用于减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的药物。[0082]在一些方面中，任一种前述抗体可以用于制备用于治疗需要此种治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的药物。[0083]在一些方面中，任一种前述抗体可以用于制备用于抑制患有与不需要的血管通透性相关的病症的受试者中的血管通透性的药物。[0084]在一些方面中，任一种前述抗体可以用在减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法中。[0085]在一些方面中，任一种前述抗体可以用在治疗需要此种治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的方法中。[0086]在一些方面中，任一种前述抗体可以用在抑制患有与不需要的血管通透性相关的病症的受试者中的血管通透性的方法中。[0087]在另一方面，本发明着重描述包含任一种前述抗体的组合物，所述组合物用在减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法中。[0088]在另一方面，本发明着重描述包含任一种前述抗体的组合物，所述组合物用在治疗需要此种治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的方法中。[0089]在另一方面，本发明着重描述包含任一种前述抗体的组合物，所述组合物用在抑制患有与不需要的血管通透性的病症的受试者中的血管通透性的方法中。[0090]在一些方面中，任一种前述抗体缀合物可以用于制备用于减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的药物。[0091]在一些方面中，任一种前述抗体缀合物可以用于制备用于治疗需要此种治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的药物。[0092]在一些方面中，任一种前述抗体缀合物可以用在减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法中。[0093]在一些方面中，任一种前述抗体缀合物可以用在治疗需要此种治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的方法中。[0094]在另一方面，本发明着重描述包含任一种前述抗体缀合物的组合物，所述组合物用在减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法中。[0095]在另一方面，本发明着重描述包含任一种前述抗体缀合物的组合物，所述组合物用在治疗需要此种治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的方法中。[0096]在一些方面中，任一种前述融合蛋白可以用于制备用于减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的药物。[0097]在一些方面中，任一种前述融合蛋白可以用于制备用于治疗需要此种治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的药物。[0098]在一些方面中，任一种前述融合蛋白可以用在减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法中。[0099]在一些方面中，任一种前述融合蛋白可以用在治疗需要此种治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的方法中。[0100]在另一方面，本发明着重描述包含任一种前述融合蛋白的组合物，所述组合物用在减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法中。[0101]在另一方面，本发明着重描述包含任一种前述融合蛋白的组合物，所述组合物用在治疗需要此种治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的方法中。[0102]应该理解，上述关于治疗方法例如，关于抗体特性、另外的治疗剂、与病理性血管发生相关的病症例如，眼部病症，如AMD，DME，DR，或RV0、施用途径例如，玻璃体内注射）等的任意实施方案可以用在上述药物、应用和组合物的情形中。[0103]附图简述[0104]图1A-1F是显示由针对抗-gD标签抗体抗-gD、蛋白L或蛋白A的NNKwalkVH图1A-1C和VL图1D-1F文库得到的淘选中所有突变的富集率的log2也称为log2富集率的热图。野生型G6.31VH图1A-1C或VL图1D-1F从位置2起始的氨基酸序列显示在每个热图的下方。图IA显示从淘选针对抗-gD的NNKwalkVH文库得到的结果。图IB显示从淘选针对蛋白L的NNKwalkVH文库得到的结果。图IC显示从淘选针对蛋白A的NNKwalkVH文库得到的结果。图ID显示从淘选针对抗-gD的NNKwalkVL文库得到的结果。图IE显示从淘选针对蛋白L的NNKwalkVL文库得到的结果。图IF显示从淘选针对蛋白A的NNKwalkVL文库得到的结果。[0105]图2A-2B是显示来自针对抗-gD-标签抗体（“gD”）、蛋白A“protA”）和蛋白L“protL”）的VH图2A和VL图2B的淘选的log2富集率之间的相关性的一系列图和表格。表格显示下述之间比较的Pearson相关系数r2;“Cor”）：（igD和protA;iigD和protL;和iiiprotA和protL。还确定了分类术语疏水核心（“核心”）、延长的疏水核心（“延长的核心”）、VHVL界面（“界面”）的位置或形成重要的氢键、盐桥或其他感兴趣（“其他”）的位置的突变的富集率的相关性。这些图显示，使用抗_gD抗体、蛋白A或蛋白L检测Fab分子在噬菌体上的翻倍folding给出相似的结果。在不同的淘选中在它们的富集率中显著不同的仅有的突变是直接位于蛋白A或蛋白L结合位点的那些突变。那些残基分别标记为“蛋白A，”“蛋白L1,”和“蛋白L2”（存在两个蛋白L结合位点）。蛋白L结合位点记载在Graille等人.Structure98:679-687,2001中，其通过引用完全结合在本文中。蛋白G结合位点记载在GraiIIe等人·Proc·Natl.AcacLSci·USA9710:5399-5404，2000中，其通过引用完全结合在本文中。[0106]图3A-3B是显示在VH图3A和VL图3B中给定位置的所有突变的log2富集率的图。依据位置是在疏水核心深灰色）、延长的疏水核心（中灰还是在VHVL界面浅灰）中而将位置用阴影表示。标出了保守并且不耐受突变的位置l〇g2富集率Z-得分〈-0.5。[0107]图3C-3D是分别显示VH图3C和VL图3D的结构中保守位置的所在位置的不含抗原的G6Fab的晶体结构ProteinDataBankPDBcode:2FJF的效果图。阴影方案与图3A-3B中相同。另外，显示了形成重要的氢键、盐桥、或其他重要的保守位置。[0108]图4A-4B是显示通过淘选针对VEGF的NNKwalkVH图4A和VL图4B文库得到的所有单个氨基酸置换的l〇g2富集率的热图。[0109]图5A-5B是显示从VH图5A和VL图5B文库的VEGF淘选得到的log2富集率具有双峰分布的图。将消耗超出检测限度的突变设为具体实验最大观察到的消耗。突变依据它们在HVR、在利用gD淘选鉴别的保守构架或在构架的其余部分中的位置而相应染色。[0110]图5C-5D是显示来自于相对于母本抗体G6.31具有Kd变化（图5C或相对于G6.31具有解链温度Tm变化（图5D的所选的突变的VEGF淘选的log2富集率之间比较的图。使用与图5A-5B相同的阴影方案。[0111]图5E-5F是G6FabPDBcode2FJG的VH图5E和VL图5F的VEGF-结合形式的晶体结构的效果图，将所选的突变位置显示为球体。VEGF表面显示为表面显示（surfacerepresentation。使用与图5A-5B相同的阴影方案。标记显示与G6.31相比较的Tm°C变化和结合亲和力Kd的变化倍数。[0112]图6A是在不含抗原的G6FabPDB2FJF的晶体结构中存在的分子叠加效果图的形象显示，其显示了由分子展示的不同的Fab弯角（elbowangle。[0113]图6B-6C分别是显不在具有小Fab弯角的分子（图6B，深灰）和具有大Fab弯角的分子（图6C，浅灰）中LC-83F和LC-106I的VL-VH界面和侧链构象的详细视图的效果图。为了清楚，去除了β-链E、螺旋α-l和连接两个元件的环。[0114]图7Α是显示来自TOB的319种人抗体结构的位置LC-F83的chilXl角的图（右图）。效果图（左图）显示采取“内”和“外”构象的LC-F83位置。[0115]图7Β是显示在位置105的psiΨ角和在位置106的phiΦ角的弯角骨架构象的图（右图）。结构按照图7A所示的其chil角阴影显示。效果图（左图）显示采取“内”和“外”构象的轻链LC位置103-108。[0116]图7C是显示具有采取“内构象和“外构象的LC-F83的抗体结构的弯角（上右图）和VLCL界面面积（下右图）的一系列图。将结果与来自PDB的319种携带LC-F83的人Fab结构和22种携带LC-83A的人结构的Fab弯角和VLCL界面尺寸进行比较。左图显示具有大弯角和小弯角的G6分子的叠加效果图。VLCL界面面积用圆圈显不。[0117]图8A是显示具有大弯角的G6Fab晶体结构G6链VU，G6-VU和具有小弯角的晶体结构G6链BA，G6-BA的LC-F83的chil角的图。[0118]图8B是显示所示分子的分子动力学模拟的结果的图。弯角作为时间的函数绘图。[0119]图8C是显示分子动力学模拟的结果的图，将Fab弯角作为VHAL扭转角（“HL-角”）的函数绘图。散布图等值线图显示分子动力学模拟过程中采用的VU.F83深灰和VU.F83A浅灰的VHVL扭转角和弯角。对于这两种分子显现两个不同的群体。[0120]图9A是显示在IOOns分子动力学模拟的最后75ns过程中得到的分子BA-F83采取“外构象的LC-F83、BA-F83A、VU-F93采取“内构象的LC-F83和VU-F83A的Fab弯角分布的图。如通过方差分析ANOVATukey’sHonest显著差异HSD检验所确定的，除BA-F83和BA-F83A外的所有样品显著不同p〈0.001。[0121]图9B是显示具有采取“外”构象的LC-F83黑色）的五种G6彩铪分子和具有采取“内”构象的LC-F83深灰五种G6彩铪分子的VHVL扭转以及VEGF-结合的G6结构（“AG结合的”，浅灰的VHVL扭转角的图。[0122]图9C是显不在相同的IOOns分子动力学模拟过程中与图9A中相同的分子的VHVL扭转角分布的图。如通过ANOVATukeyHSD检验确定的，除BA-F83A和VU-F83A外的所有样品是显著不同的P〈〇.001。[0123]图9D是未结合的G6晶体结构的效果图，显示在G6.31与G6.31LC-F83a之间具有不同的氢-氘交换模式的区域。深灰色阴影的区域在G6.3Uc-F83a中具有比G6.31中更缓慢的交换，而中等灰色阴影的区域在G6.31lc-f83A中具有比G6.31中更快速的交换。F83A突变和DE环的位置用直线表示。[0124]图IOA是显示所示的来源于IGKV1种系的抗体序列的VL位置的体细胞突变分布的图。上图中的突变分布使用从Genbank、蛋白数据库（ProteinDatabaseJDB、Kabat数据库、Abysis数据库和IMGT数据库（“Publicdataset”）公众可获得的人抗体序列得到。下图中的突变分布使用从1000种个体人淋巴组织得到的cDNA单分子实时测序SMRT得到。在公众可获得的序列的N-端的高突变率可能是来自克隆人工物。[0125]图IOB是显示对于来自图IOA和实施例8Sanger或SMRT数据集PacBio中所述的公众数据集的IGKVl.39序列在位置LC-83的最常见的突变的图。IGKVl.39在位置LC-83携带苯丙氨酸。点按照各个氨基酸尺寸染色。大氨基酸染成黄色，小氨基酸染成深红色。[0126]图IOC是显示对于公众数据集Sanger或SMRT数据集PacBio中发现的所有IGKJ序列在位置LC-106的最常见的突变的图。点按照各个氨基酸尺寸用阴影显示。大氨基酸染成浅灰色，小氨基酸染成深灰色。[0127]图IOD是显示通过BIACORE®表面等离子体共振测量的所选G6.31突变变体的亲和力Kd左图）和通过差示扫描荧光分析DSF确定的所选G6.31突变变体的解链温度Tm右图）的一系列图。左图的圆圈表示来自三次重复的平均值与各自由误差条所示的标准差。右图的圆圈表示来自三次重复的平均值和各自由误差条所示的标准差。[0128]图IlA是显示如在实施例11中所述，在兔眼中玻璃体内（IVT施用各种Fab后G6.31AAEE、G6.31WT和G6.31AARR中每一种的房水和玻璃体药物代谢动力学的图。[0129]图IlB是显示如在实施例11中所述，在兔眼中玻璃体内施用各种Fab后G6.31AAEE、G6.3IWT和G6.3IAARR中每一种从血清中清除的图。[0130]图12是显示对所示抗体克隆通过毛细管电泳-十二烷基硫酸钠CE-SDS分段分析的表格。分段化由在PBS中在37°C4周、12周和24周后低分子量实体的百分数LMff表示。与野生型G6.31相比，在所有N94A变体中，分段化始终减少。高分子量实体表示杂质或聚集物。该测定中的主峰此存不与分段化程度直接相关，但是取决于片段尺寸和染料标记的程度。抗-VEGFFab雷珠单抗作为对照。[0131]图13是显示如实施例12所述，在不同的Fab浓度，与母本G6.31相比，G6.31变体LC-N94A对VEGF-诱导的HUVEC迀移的抑制曲线的图。[0132]图14是显示具有叠加的重均摩尔量（Mw的HA40K-rabFab、HA200K-rabFab和HA600K-rabFab的大小排阻色谱SEC和折射率RI多角度光散射MALSSEC-RI-MALS分析的图。[0133]图15是显示缀合到rabFab上的透明质酸HA保留被透明质酸酶-2HYAL2消化的酶敏感性的图，其通过HYAL-2温育的HA和HAlOOK-rabFab的SEC-MALS分析测定。对于HA-rabFab样品，右侧Mw轴表示为仅缀合物的HA组分的Mw。[0134]图16是显示在玻璃体内注射后雷珠单抗、rabFab和HAlOOK-rabFab“线性HA-rabFab”）从兔玻璃体的清除的图。HAlOOK-rabFab展示约11.9天的半衰期，相比较而言，rabFab为约2.5天。[0135]图17是显示玻璃体滞留时间与兔玻璃体的流体动力学半径（Rh;在图中表示为“Rh”）线性相关。关于rabFab、rabFab_20kDaPEG、rabFab_40kDaPEG和HAlOOK-rabFab的历史数据（实心圆）可以用于基于测量的Rh值预测HA100K-G6.31AARR空心圆）、HA200K-G6·31AARR空心方形）和HA300K-G6·31空心三角形）的半衰期。[0136]发明详述[0137]I.定义[0138]术语“约”用在本文中是指本技术领域中技术人员容易知晓的各个值的寻常的误差范围。本文中提到“约”值或参数包括并且描述针对所述值或参数本身的实施方案。[0139]用于本文目的的“接纳体人构架”是包含衍生自人免疫球蛋白构架或如下所定义的人共有构架的轻链可变结构域VL构架或重链可变结构域VH构架的氨基酸序列的构架。“衍生自”人免疫球蛋白构架或人共有构架的接纳体人构架可以包含其相同的氨基酸序列，或其可以包含氨基酸序列的变化。在一些实施方案中，氨基酸变化的数目为10以下，9以下，8以下，7以下，6以下，5以下，4以下，3以下，或2以下。在一些实施方案中，VL接纳体人构架的序列与VL人免疫球蛋白构架序列或人共有构架序列相同。[0140]“亲和力”是指分子例如抗体）的单一结合位点与其结合配偶体例如抗原之间全部非共价相互作用总和的强度。除非另有说明，在用于本文时，“结合亲和力”指反映结合对的成员（例如抗体与抗原之间1:1相互作用的内在结合亲和力。分子X对其配偶体Y的亲和力通常可用解离常数Kd来表述。亲和力可通过本领域已知的常用方法来测量，包括本文中所描述的那些方法。用于测量结合亲合力的具体说明性和示例性实施方案在下文中描述。[0141]“亲和力成熟的”抗体是指与不具有所述变化的母本抗体相比，在一个或多个高变区HVR和或构架区FR具有一个或多个变化的抗体，所述变化导致抗体针对抗原的亲和力提尚。[0142]术语“血管内皮生长因子”或“VEGF”是指血管内皮生长因子蛋白A，如SEQIDNO:47还参见SwissProtAccessionNumberP15692，GeneIDNCBI:7422所不例。术语“VEGF”包括具有SEQIDN0:47的氨基酸序列的蛋白以及其同源物和异构体。术语“VEGF”还包括已知的异构体，例如，VEGF的剪接异构体，例如，VEGFm，VEGFm，VEGFms，VEGF165，VEGF189,和VEGF2q6,以及其天然存在的等位基因和加工的形式，包括如FerraraMol.Biol·Cell.21:6872010，Leung等人·，Science，246:13061989，和Houck等人·，Mol.Endocrin.，5:18061991所述通过VEGF165的纤溶酶切割产生的110个氨基酸的人血管内皮细胞生长因子。术语“VEGF”还指来自非人物种如小鼠、大鼠或灵长类动物）的VEGF。有时，来自特定物种的VEGF用诸如下述的术语表示:hVEGF表示人VEGF，mVEGF表示鼠VEGF，等等。术语“VEGF”还用于表示包含165个氨基酸的人血管内皮细胞生长因子的氨基酸8-109或1-109的多肽截短形式。提到任意所述形式的VEGF在本发明中可以例如通过下述识别：uVEGFiq9，”“VEGF8-109，”“VEGF1-109”或“VEGF165”。对于“截短的”天然VEGF的氨基酸位置按照天然VEGF序列所示编号。例如，在截短的天然VEGF中的氨基酸位置17甲硫氨酸）也是天然VEGF中的位置17甲硫氨酸）。截短的天然VEGF具有与天然VEGF相当的针对KDR和Flt-I受体的结合亲和力。术语“VEGF变体”用在本文中是指在天然VEGF序列中包含一个或多个氨基酸突变的VEGF多肽。任选地，所述一个或多个氨基酸突变包括氨基酸置换。为了简便命名本文所述的VEGF变体的目的，注意数字是指沿推定的天然VEGF的氨基酸序列（在同前的Leung等人和同前的Houck等人中提供）的氨基酸残基位置。除非另外指明，术语“VEGF”用在本文中表示VEGF-A。[0143]术语“抗-VEGF抗体”、“与VEGF结合的抗体”和“特异性结合VEGF的抗体”是指能够以充分的亲和力结合VEGF的抗体，使得所述抗体可用作靶向VEGF的诊断剂和或治疗剂。在一个实施方案中，抗-VEGF抗体与不相关的非VEGF蛋白的结合程度小于所述抗体与VEGF的结合的约10%，例如，通过放射性免疫测定RIA测量的。在某些实施方案中，与VEGF结合的抗体具有的解离常数Kd彡ΙμΜ，彡ΙΟΟηΜ，彡10nM，彡InM，彡O.lnM，彡O.OlnM，或彡O.OOlnM例如，HT8M以下，例如，KT8M至10_13M，例如，HT9M至IT13M。在某些实施方案中，抗-VEGF抗体结合在来自不同的物种的VEGF之间是保守的VEGF表位。[0M4]术语〃抗体〃以最广义使用，并且涵盖各种抗体结构，包括，但不限于，单克隆抗体、多克隆抗体、多特异性抗体例如，双特异性抗体及抗体片段，只要其显示所需的抗原结合活性即可。[0145]"抗体片段"是指包含完整抗体与结合所述完整抗体的抗原结合的部分的不同于完整抗体的分子。抗体片段的实例包括但不限于Fv、Fab、Fab’、Fab_C、Fab’-SH、Fab’）2;双抗体;线性抗体;单链抗体分子例如scFv;和由抗体片段形成的多特异性抗体。在一些情形中，抗体片段的实例包括，但不限于，？¥，？813，？313’，？313’-3!1，？313’）2;双抗体;线性抗体；单链抗体分子例如ScFv;和由抗体片段形成的多特异性抗体。[0146]用木瓜蛋白酶消化抗体产生称作“Fab”片段的两个相同的抗原结合片段和一个残余“Fc”片段，其名称反映了它易于结晶的能力。Fab片段由完整的轻链L以及重链⑹的可变区结构域VH和一条重链的第一恒定结构域CHl组成。用胃蛋白酶处理抗体产生单个大Fab’）2片段，其大致对应于具有二价酶结合活性的两个二硫化物连接的Fab片段，并且仍然能够交联抗原。Fab’片段与Fab片段不同在于在CHl结构域的羧基端具有另外的较少残基，包括来自抗体铰链区的一个或多个半胱氨酸。Fab-C分子是表达的Fab分子，使序列在第一个铰链半胱氨酸截短，在表达时直接产生具有游离半胱氨酸的Fab参见，例如，Shatz等人.Mol.Pharmaceutics2016;PubMedidentifierPMID27244474。例如，Fab-C分子可以在重链的位置Cys227具有游离的半胱氨酸。在其他情形中，Fab-C分子可以在重链的位置Cys229具有游离的半胱氨酸。Fab’-SH在本文是其中恒定结构域的半胱氨酸残基携带游离的硫醇基团的Fab’的名称。Fab’）2抗体片段最初作为在它们之间具有铰链半胱氨酸的一对Fab’片段产生。抗体片段的其他化学偶联也是已知的。[0147]术语“Fc区”在本文中用于定义包含至少一部分恒定区的免疫球蛋白重链的C-端区域。该术语包括天然序列Fc区和变体Fc区。在一个实施方案中，人IgG重链Fc区从Cys226或Pr〇230延长至重链的羧基端。然而，Fe区的C-端赖氨酸Lys447可以存在或可以不存在。除非本文中另外指明，Fc区或恒定区中氨基酸残基的编号按照EU编号系统进行，其也称为EU索弓I，如在Kabat等人·，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest，第5版•PublicHealthService，NationalInstitutesofHealth，Bethesda，MD1991中所述。[0148]“Fv”由紧密、非共价连接的一条重链和一条轻链可变区结构域的二聚体组成。从这两个结构域的折叠产生六个高变环H和L链每个3个环），所述高变环有助于氨基酸残基的抗原结合并且对抗体赋予抗原结合特异性。然而，甚至单个可变结构域或仅包含特异性针对抗原的三个HVR的Fv的一半具有识别和结合抗原的能力，尽管通常亲和力比完整结合位点的亲和力低。[0149]“单链Fv”还缩写为“sFv”或“scFv”，其是包含与单一多肽链连接的VH和VL抗体结构域的抗体片段。优选地，sFv多肽还包含在VH与VL结构域之间的多肽接头，其允许sFv形成抗原结合需要的结构。关于sFv的综述，参见Pluckthun，在ThePharmacologyofMonoclonalAntibodies，vol·113，Rosenburg和Moore编，Springer_Verlag，NewYork，pp.269-3151994中。[0150]术语“双抗体”是指通过在VH与VL结构域之间以短接头约5-10个残基构建sFv片段见前段制备的小抗体片段，使得获得V结构域的链间而非链内配对，产生二价片段，BP，具有两个抗原结合位点的片段。双特异性双抗体是两个“交叉”sFv片段的异二聚体，其中两个抗体的VH和VL结构域存在于不同的多肽链上。双抗体在例如例如，EP404，097;W09311161;和HolIinger等人，Proc·Nat1·Acad·Sci·USA，90:6444-64481993中有更充分的描述。[0151]“阻断”抗体或“拮抗”抗体是一种抑制或减少其所结合的抗原的生物学活性的抗体。某些封闭抗体或拮抗抗体基本上或完全抑制抗原的生物学活性。[0152]与参比抗体“结合相同表位的抗体”是指在竞争性测定中阻断50%以上的参比抗体与其抗原的结合，并且反之，在竞争性测定中，所述参比抗体阻断50%以上的所述抗体与其抗原的结合。本文中提供了示例性的竞争性测定。[0153]术语“嵌合”抗体是指重链和或轻链的一部分来源于特定来源或物种而重链和或轻链的其余部分来源于不同来源或物种的抗体。[0154]抗体的“种类”是指其重链所具有的恒定结构域或恒定区的类型。存在五种主要的抗体种类：IgA，IgD，IgE，IgG，和IgM，并且这些中的一些可以进一步分成亚类（同种型），例如，IgGi，IgG2，IgG3，IgG4，IgAi，和IgA2。对应于不同种类的免疫球蛋白的重链恒定结构域分别称为α，δ，ε，γ，和μ。[0155]“效应子功能”是指归因于抗体的Fe区的那些生物学活性，其随抗体同种型而不同。抗体效应子功能的实例包括:Clq结合和补体依赖性细胞毒性CDC;Fc受体结合;抗体-依赖性细胞-介导的细胞毒性ADCC;吞噬作用;细胞表面受体例如，B细胞受体的下调；和B细胞激活。[0156]“构架”或“构架区”或“FR”是指除高变区（HVR残基之外的可变结构域残基。可变结构域的FR通常由四个FR结构域组成:FRl，FR2，FR3，和FR4。[0157]术语“全长抗体”、“完整的抗体”和“完整抗体”在本文可互换地用于指具有与天然抗体结构基本相似的结构或具有包含如本文所定义的Fc区的重链的抗体。[0158]“人抗体”指具有这样的氨基酸序列的抗体，所述氨基酸序列对应于由人或人细胞生成或来源于利用人抗体库或其它人抗体编码序列的非人来源的抗体的氨基酸序列。人抗体的这种定义明确排除包含非人抗原结合残基的人源化抗体。[0159]“人共有构架”是指这样的构架，即在选择人免疫球蛋白VL或VH构架序列中，其代表最常出现的氨基酸残基。一般而言，对人免疫球蛋白VL或VH序列的选择是从可变结构域序列的亚型中选择。一般而言，该序列的亚型是如Kabat等人，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest，第五版，NIHPublication91_3242，BethesdaMD1991，1_3卷中的亚型。在一个实施方案中，对于VL，该亚型是如Kabat等人（同前）中的亚型Kl。在一个实施方案中，对于VH，该亚型是如Kabat等人（同前）中的亚型III。[0160]非人例如，啮齿动物抗体的“人源化”形式是包含来源于非人抗体的最小序列的嵌合抗体。对于大部分，人源化抗体是具有需要的抗体特异性、亲和力和能力的人免疫球蛋白（接受体抗体），其中来自接受体的高变区的残基被来自非人物种供体抗体）（如小鼠、大鼠、兔或非人灵长类动物）的高变区的残基替换。在一些情形中，人免疫球蛋白的FR残基被相对应的非人残基替换。并且，人源化抗体可以包含在接受体抗体或在供体抗体中不存在的残基。进行这些修饰以进一步改善抗体表现。通常，人源化抗体包含基本上全部的至少一个、典型地两个可变结构域，其中全部或基本上全部的高变环对应于非人免疫球蛋白的那些，并且全部或基本上全部的FR是人免疫球蛋白序列的那些。人源化抗体任选地还包含至少一部分免疫球蛋白恒定区（Fe典型地是人免疫球蛋白的）。对于进一步的详情，参见Jones等人，Nature321:522-5251986;Riechmann等人，Nature332:323-3291988;和Presta,Curr.Op.Struct.Biol.2:593-5961992〇[0161]术语“可变”是指抗体之间可变结构域的某些片段在序列上极大不同的事实。可变或“V”结构域调节抗原结合，并且限定特典抗体对其特典抗原的特异性。然而，可变性不是在可变结构域的跨度上平均分布的。相反，V区由下述组成:称为构架区FRs的15-30个氨基酸的相对不变的片段，其由称为“高变区”的变化极大的较短区域隔开，所述高变区每个长为9-12个氨基酸。术语“高变区”或“HVR”当在本文中使用时，是指抗体负责抗原结合的氨基酸残基。高变区通常在VL中包含例如大致约残基24-34LI，50-56L2和89-97L3，并且在VH中包含大致约残基26-35HI，49-65H2和95-102H3在一个实施方案中，Hl大致约为残基3卜35;Kabat等人，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest，第5版.PublicHealthService，NationalInstitutesofHealth，Bethesda，MD.1991和或包含来自“高变环”的那些残基（例如，在¥1^中残基26-32仏1，50-52仏2，和91-96仏3，和在VH中26-32HI，53-55H2，和96-101H3;Chothia和LeskJ.Mol.Biol.196:901-9171987。天然重链和轻链的可变结构域分别包含由三个高变区连接的四个FR，主要采用β片构型，所述高变区形成环连接，并且在一些情形中，形成所述β片结构的一部分。每条链中的高变区由FR紧密相邻地保持在一起，其中来自另一条链的高变区有助于形成抗体的抗原结合位点（参见Kabat等人，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest，第5版.PublicHealthService,NationalInstitutesofHealth，Bethesda，MD.1991〇因此，HVR和FR序列通常以下述顺序出现在VH或VL中：FRl-HlLI-FR2-H2L2-FR3-H3L3-FR4。恒定结构域不直接参与抗体与抗原的结合，但是表现出各种效应子功能，诸如抗体在抗体依赖性细胞的细胞毒性ADCC中的参与。[0162]术语“按照Kabat编号的可变结构域残基”或“按照Kabat的氨基酸位置编号”及其变化形式是指Kabat等人（同前）中用于抗体编纂的重链可变结构域或轻链可变结构域的编号系统。使用该编号系统，实际的线性氨基酸序列可以包含更少的或另外的与可变结构域的FR或HVR的缩短或插入相对应的氨基酸。例如，重链可变结构域可以包含在H2的残基52后的单一氨基酸插入按照Kabat的残基52a和在重链FR残基82后的插入的残基例如，按照Kabat的残基82a，82b，和82c等）。可以通过比对抗体序列与“标准”Kabat编号的序列的同源性区域而针对给定的抗体确定残基的Kabat编号。[0163]Kabat编号系统通常在提到可变结构域中的残基（大致地，轻链的残基1-107和重链的残基1_113时使用（例如，Kabat等人·，SequencesofImmunologicalInterest.第5版.PublicHealthService,NationalInstitutesofHealth，Bethesda，Md.1991〇“EU编号系统”或“EU索引”通常在提到免疫球蛋白重链恒定区中的残基时使用例如，Kabat等人（同前）中报道的EU索引）。“按照Kabat的EU索引”是指人IgGlEU抗体的残基编号。除非本文另外指明，提到抗体的可变结构域中的残基号码意指通过Kabat编号系统的残基编号。除非本文另外指明，提高抗体的恒定结构域中的残基号码意指通过EU编号系统的残基编号例如，参见UnitedStatesProvisionalApplicationNo.60640,323,关于EU编号的图）。[0164]除非另外指明，可变结构域（例如，FR残基）中HVR残基和其他残基在本文中按照Kabat等人（同前编号。[0165]“免疫缀合物”是与一个或多个异源分子缀合的抗体，所述异源分子包括，但不限于，细胞毒性剂。[0166]术语“分离的抗体”在用于描述本文公开的各种抗体时，意指已经从表达其的细胞或细胞培养物中鉴定并分离和或回收的抗体。其天然环境的污染成分是通常干扰多肽的诊断或治疗应用的物质，并且可以包括酶、激素和其他蛋白样或非蛋白样溶质。在一些实施方案中，将抗体纯化至大于95%或99%的纯度，如通过例如电泳例如，SDS-PAGE，等电聚焦IEF，毛细管电泳或色谱例如，离子交换或反相HPLC确定的。对于评估抗体纯度的方法的综述，参见，例如，Flatman等人·，J·Chromatogr·B848:79-872007。在优选的实施方案中，抗体将被纯化至：（1使用旋转杯分离器足以获得至少15个残基的N端或内部氨基酸序列的程度，或⑵在非还原或还原条件下使用考马斯蓝或优选地使用银染通过SDS-PAGE的同质性。分离的抗体包括在重组细胞内原位的抗体，原因自傲与，将不存在多肽天然环境的至少一种组分。通常，然而，分离的多肽将通过至少一个纯化步骤制备。[0167]术语“单克隆抗体”在用于本文时指从一群基本上同质的抗体中获得的抗体，即除了可能的变体抗体该变体抗体例如含有天然存在的突变或在产生单克隆抗体制剂的过程中出现，此类变体通常少量存在外，构成群体的个体抗体是相同的和或结合相同的表位。与通常包括针对不同决定簇表位的不同抗体的多克隆抗体制剂相比，单克隆抗体制剂中的每个单克隆抗体针对抗原上的单一决定簇。因此，修饰语“单克隆”表明抗体从基本上同质的抗体群获得的特征，不应解释为要求通过任何特定方法来产生抗体。例如，根据本发明使用的单克隆抗体可通过多种技术来生成，包括但不限于杂交瘤法，重组DNA法，噬菌体展示法，和利用包含所有或部分的人免疫球蛋白基因座的转基因动物的方法，这样的方法和用于制备单克隆抗体的其他示例性方法描述于本文中。[0168]术语“多特异性抗体”以最广义使用，并且特别涵盖包含重链可变结构域VH和轻链可变结构域VL的抗体，其中VH-VL单位具有多表位特异性（S卩，能够结合一个生物分子上两个不同的表位或不同生物分子上的每个表位）。所述多特异性抗体包括，但不限于，全长抗体，具有来那个以上VL和VH结构域的抗体，抗体片段，如Fab，Fab’，Fab-C，Fv，dsFv，scFv，双抗体，双特异性抗体和三抗体，已经共价或非共价连接的抗体片段。“多表位特异性”是指特异性结合同一靶标或不同靶标上两个以上不同表位的能力。“双重特异性”或“双特异性”是指特邀西结合同一靶标或不同靶标上两个不同表位的能力。然而，与双特异性抗体相反，双重特异性抗体具有两个氨基酸序列相同的抗原结合臂，并且每个Fab臂能够识别两个抗原。双重特异性允许抗体作为单Fab或IgG分子以高亲和力与两个不同的抗原相互作用。按照一个实施方案，以IgGl形式的多特异性抗以5以1-0.001?1，3以1-0.001?1，141-O.OOlpM，0.5μΜ-0.OOlpM或O.ΙμΜ-O.OOlpM的亲和力结合每个表位。“单特异性”是指仅结合一个表位的能力。[0169]“天然抗体”是指天然存在的具有变化的结构的免疫球蛋白分子。例如，天然IgG抗体是约150,000道尔顿的异源四聚体糖蛋白，其由两个相同的轻链和两个相同的重链组成，所述链通过二硫键结合。从N-端至C-端，每个重链具有可变区VH，其也被称为可变重结构域或重链可变结构域，其后是三个恒定结构域CHI，CH2和CH3。类似地，从N-端到C-端，每个轻链具有可变区（VL，其也被称为可变轻结构域或轻链可变结构域，其后是恒定轻CL结构域。基于其恒定结构域的氨基酸序列，抗体的轻链可以被分配给称为kappaκ和lambdaλ的两个类型中的一个。[0170]关于抗体与靶分子的结合，术语“特异性结合”或“与……特异性结合”或“特异性”针对特定的多肽或特定多肽靶标上的表位意指与非特异性相互作用测量为不同的结合。特异性结合可以，例如，通过与对照分子的结合相比而确定分子的结合而进行测量。例如，特异性结合可以通过用与靶标相似的对照分子竞争而确定，例如，过量的未标记的靶标。在这一情形中，如果标记的靶标与探针的结合被过量的未标记的靶标竞争性抑制，则表示特异性结合。术语“特异性结合”或“与……特异性结合”或“特异性”针对特定多肽或特定多肽靶标上的表位用在本文中可以例如由具有KT4M或更低、备选地HT5M或更低、备选地KT6M或更低、备选地KT7M或更低、备选地KT8M或更低、备选地KT9M或更低、备选地KT1t3M或更低、备选地HT11M或更低、备选地HT12M或更低的针对靶标的Kd或在HT4M至HT6M或HT6M至HTiqM或HT7M至HT9M的范围内的Kd的分子所表现出来。技术人员应该理解的，亲和力和Kd值是反相关的。针对抗原的高亲和力由低Kd值测量。在一个实施方案中，术语“特异性结合”是指这样的结合，其中分子与特定多肽或特定多肽的表位结合，而基本上不结合任意其他多肽或多肽表位。[0171]“编码抗-VEGF抗体的核酸”是指编码抗体重链和轻链或其片段的一个或多个核酸分子，包括在单一载体或分开的载体中的所述一个或多个核酸分子，和存在于宿主细胞中一个或多个位置的所述一个或多个核酸分子。[0172]术语“载体”当在本文中使用时是指能够使与其相连的另一种核酸增殖的核酸分子。该术语包括作为自我复制核酸结构的载体以及结合到已经引入其的宿主细胞的基因组中的载体。某些载体能够指导与其可操作相连的核酸的表达。这样的载体在本文中被称为“表达载体”。[0173]术语“宿主细胞”、“宿主细胞系”和“宿主细胞培养物”可互换地使用，并且是指其中引入外源核酸的细胞，包括这种细胞的后代。宿主细胞包括“转化体”和“转化的细胞”，其包括原代转化的细胞和来源于其的后代，而不考虑传代的次数。后代在核酸含量上可能与亲本细胞不完全相同，而是可以包含突变。本文中包括与在最初转化的细胞中筛选或选择的具有相同功能或生物学活性的突变体后代。[0174]相对于参比多肽序列的“百分比（％氨基酸序列同一性”定义为在将所述序列进行比对并在必要时引入空位以获取最大百分比序列同一性，且不将任何保守置换视为序列同一性的一部分之后，候选序列中的氨基酸残基与参比多肽序列中的氨基酸残基相同的百分数。可使用本领域技术人员已知的多种方法实现用于测定百分比氨基酸序列同一性目的的比对，例如，使用公众可得到的计算机软件如BLAST、BLAST-2、ALIGN或MegalignDNASTAI?软件。本领域技术人员可以决定用于比对序列的适宜参数，包括对所比较的序列全长获得最大比对所需的任何算法。然而，为此目的，％氨基酸序列同一性值使用序列比较计算机程序ALIGN-2产生。ALIGN-2序列比较计算机程序的作者是Genentech，Inc，并且源代码已经随用户文档提交至美国版权局U.S.CopyrightOffice，WashingtonD.C.，20559，其美国版权注册登记号为TXU510087。公众可从Genentech，Inc.SouthSanFrancisco，California得到ALIGN-2程序，或者可以从源代码编译。ALIGN-2程序应当为在UNIX操作系统、包括数字UNIXV4.OD上使用而进行编译。ALIGN-2程序设定了所有序列比较参数并且不变。[0175]在ALIGN-2应用于氨基酸序列比较的情况中，给定氨基酸序列A相对于（to、与with、或针对against给定氨基酸序列郎勺％氨基酸序列同一1性或者这样说:给定氨基酸序列A具有或含有相对于、与或针对给定氨基酸序列B的特定％氨基酸序列同一性如下计算：100乘以XY比值，其中X是用序列比对程序ALIGN-2在该程序的A和B比对中评分为相同匹配的氨基酸残基数，且其中Y是B中的氨基酸残基总数。可以理解，当氨基酸序列A的长度与氨基酸序列B的长度不相等时，A相对于邮勺％氨基酸序列同一性将不等于B相对于A的％氨基酸序列同一性。除非另外具体说明，在本文用的所有％氨基酸序列同一性的值都是用ALIGN-2计算机程序如前段所描述的那样得到的。[0176]用于本文时，“施用”意指向受试者给予一定剂量的化合物（例如，本发明的抗-VEGF抗体，本发明的抗体缀合物，本发明的融合蛋白，本发明的多聚体制剂，或编码本发明的抗-VEGF抗体的核酸或组合物例如，药物组合物，例如，包含本发明的抗-VEGF抗体、本发明的抗体缀合物、本发明的融合蛋白或本发明的多聚体制剂的药物组合物的方法。用在本文所述的方法中的组合物可以例如玻璃体内（例如，通过玻璃体内注射）、通过滴眼液、肌肉内、静脉内、皮内、经皮、动脉内、腹膜内、病变内、颅内、关节内、前列腺内、胸膜内、气管内、鞘内、鼻内、阴道内、直肠内、局部、瘤内、腹膜、皮下、结膜下、囊泡内、粘膜、心、包内、脐内、眼内、眶内、口服、局部、经皮、通过吸入、通过注射、通过植入、通过输注、通过连续输注、通过直接局部灌注浸浴靶细胞、通过导管、通过灌洗、以霜剂、或以液体组合物施用。用在本文所述的方法中的组合物还可以系统或局部施用。取决于多种因素例如，要施用的化合物或组合物，被治疗的病况、疾病或病症的严重性），施用方法可以不同。[0177]“血管发生Angiogenesis”是指通过其由已存在的血管形成新血管的过程。血管发生不同于“血管生成vasculogenesis”，其是从中胚层细胞前体从头形成内皮细胞。与病理性血管发生相关的病症可以通过本发明的组合物和方法进行治疗。这些病症包括非瘤性病症和细胞增生病症二者。细胞增生病症包括，但不限于下文所述的那些。非瘤性病症包括，但不限于，眼部病症非限制性的眼部病症包括，例如，视网膜病，包括增生性糖尿病视网膜病，脉络膜新生血管化CNV，年龄相关性黄斑变性AMD，糖尿病性和其他缺血相关的视网膜病，糖尿病性黄斑水肿DME，病理性近视，希佩尔-林道病，眼的组织胞浆菌病，视网膜静脉闭塞包括中央性CRVO和分支BRVO形式），角膜新生血管形成，视网膜新生血管形成，早产儿视网膜病ROP，家族性渗出性玻璃体视网膜病FEVR，冠茨病，诺里病，骨质疏松症-假神经胶质瘤综合征（OPPG，结膜下出血，发红，眼新生血管病，新生血管性青光目艮，和高血压视网膜病），自身免疫病例如，类风湿性关节炎rheumatoidarthritis，RA，银肩病（psoriasis，强直性脊柱炎（ankylosingspondylitis，和炎性肠病inflammatoryboweldisease例如，局限性肠炎（Crohn’sdisease和溃疡性结肠炎ulcerativecolitis，不需要或异常的肥大，关节炎，牛皮癣关节炎（psoriaticarthritis，牛皮癣斑（psoriaticplaques，结节病（sarcoidosis，动脉粥样硬化atherosclerosis，粥样硬化斑块（atheroscleroticplaques，动脉的粥样硬化arterialarteriosclerosis，血管再狭窄（vascularrestenosis，动静脉畸形arteriovenousmalformations，AVM，脑膜瘤meningioma，血管瘤（hemangioma，血管纤维瘤angiofibroma，甲状腺增生thyroidhyperplasias包括格雷夫斯病⑹^乂㊀’sdisease，角膜和其他组织移植，肺部炎症，急性肺损伤ARDS，败血病sepsis，原发性肺动脉高压（primarypulmonaryhypertension，恶性肺部溢出（malignantpulmonaryeffusions，脑水肿cerebraledema例如，与急性中风acutestroke闭合性头部外伤（closedheadinjury外伤（trauma相关），滑膜炎症（synovialinflammation，RA中的血管翳形成pannusformation，骨化性肌炎myositisossificans，肥大性骨形成hypertropicbonef〇rmation，骨关节炎（osteoarthritis，0A，顽固性腹水refractoryascites，多囊卵巢病（polycysticovariandisease，子宫内膜异位症endometriosis，第三流体间隔疾病（3rdspacingoffluiddiseases胰腺炎pancreatitis，间隔综合征（compartmentsyndrome，烧伤（burns，肠病（boweldisease，慢性哮喘（chronicasthma，子宫肌瘤（uterinefibroids，早产分挽prematurelabor，慢性炎症chronicinflammation，诸如IBD局限性肠炎和溃疡性结肠炎），炎性肾病（inflammatoryrenaldiseases包括肾小球肾炎glomerulonephritis，特别是系膜增生性肾小球肾炎（mesangioproIiferativeglomerulonephritis，溶血性尿毒综合征haemolyticuremicsyndrome，糖尿病肾病diabeticnephropathy和高血压肾硬化hypertensivenephrosclerosis，移植后发生的疾病，肾同种异体移植物排斥renalallograftrejection，炎性病，肾病综合征，不需要或异常的组织量生长undesiredoraberranttissuemassgrowth非癌），血友病性关节hemophilicjoints，肥厚性瘢痕hypertrophicscars，毛发生长抑制，奥斯陆韦伯综合征（Osler-Webersyndrome，脓性肉芽肿晶状体后纤维增生（pyogenicgranulomaretrolentalfibroplasias，硬皮病（scleroderma，沙眼（trachoma，血管粘连（vascularadhesions，滑膜炎（synovitis，皮炎（dermatitis，先兆子痫preeclampsia，腹水（ascites，心包积液（pericardialeffusion如与心包炎pericarditis相关的），和胸腔积液。另外的眼部病症记载在下文中。[0178]可能与病理性血管发生相关的其他病症包括骨不连合性骨折（nonunionfractures不愈合的骨折），脓性肉芽肿pyogenicgranuloma，沙眼，血友病性关节，血管粘连和肥大性疤痕，移植物排斥，纤维血管组织，红斑痤疮acnerosacea，获得性免疫缺陷综合征（acquiredimmunedeficiencysyndrome，动脉闭塞（arteryocclusion，变应性角膜炎（atopickeratitis，细菌性溃疡（bacterialulcers，白塞病（Bechet’sdisease，颈动脉闭锁性病（carotidobstructivedisease，慢性炎症（chronicinflammation，慢性视网膜脱离chronicretinaldetachment，慢性葡萄膜炎（chronicuveitis，慢性玻璃体炎（chronicvitritis，隐形眼镜过度磨损（contactlensoverwear，角膜移植片排斥（cornealgraftrejection，角膜移植片新生血管化cornealgraftneovascularization，伊尔斯病（Ealesdisease，流行性角结膜炎epidemickeratoconjunctivitis，真菌性溃疡fungalulcers，单纯疱疼感染Herpessimplexinfections，带状疱瘆感染Herpeszosterinfections，粘滞性过高综合征hyperviscositysyndromes，卡波西肉瘤Kaposi’ssarcoma，白血病（leukemia，脂质变性（lipiddegeneration，莱姆病（Lyme’sdisease，边缘性角质层分离marginalkeratolysis，莫伦溃疡Moorenulcer，不同于麻风病（leprosy的分枝杆菌感染，近视myopia，视窝（opticpits，骨关节炎，佩吉特病Paget’sdisease，睫状体扁平部炎parsplanitis，类天疱疮（pemphigoid，phylectenulosis，多动脉炎（polyarteritis，激光后并发症post-lasercomplications，原虫感染protozoaninfections，弹性假黄色瘤（pseudoxanthomaelasticum，翼状胬肉干燥性角膜炎（pterygiumkeratitissicca，放射状角膜切开术（radialkeratotomy，晶状体后纤维增生（retrolentalfibroplasias，结节病，，巩膜炎，镰刀细胞贫血（sicklecellanemia，舍格伦综合征Sjogren’ssyndrome，施塔加特病（Stargartsdisease，史蒂文斯约翰逊病（Steven’sJohnsondisease，上缘角膜炎（superiorlimbickeratitis，梅毒（syphilis，全身性狼疮（systemiclupus，泰里安边缘变性（Terrien’smarginaldegeneration，弓形体病toxoplasmosis，外伤（trauma，静脉闭塞veinocclusion，维生素A缺乏VitaminAdeficiency和韦格纳结节病Wegenerssarcoidosis，与糖尿病相关的不需要的血管发生，寄生虫病，异常的伤口愈合，手术后肥大，损伤或外伤，毛发生长抑制，排卵和黄体形成抑制，子宫内的植入抑制和胚胎发育抑制。[0179]术语“眼部病症”用在本文中包括与病理性血管发生相关的任意眼部病症在本文中还可互换地称为“眼部病况”）。眼部病症可以特征在于改变的或失调的心血管增生和或向眼组织结构如视网膜或角膜）中的侵入。非限制性的眼部病症包括，例如，AMD例如，湿性AMD，干性AMD，中间性AMD，晚期AMD，和地图样萎缩（geographicatrophy，GA，黄斑变性，黄斑水肿，DME例如，局部、非中心DME和弥散性、包括中心的DME，视网膜病，糖尿病视网膜病DR例如，增生性DRPDR，非增生性DRNPDR，和高海拔DR，其他缺血相关的视网膜病，R0P，视网膜静脉闭塞RVO例如，中心性CRVO和分支BRVO形式），CNV例如，近视CNV，角膜新生血管形成，与角膜新生血管形成相关的疾病，视网膜新生血管形成，与视网膜脉络膜新生血管形成相关的疾病，病理性近视，希佩尔-林道病，眼的组织胞浆菌病，FEVR，冠茨病，诺里病，OPPG，结膜下出血，发红，眼新生血管病，新生血管性青光眼，色素性视网膜炎RP，高血压视网膜病，视网膜血管瘤增生，黄斑毛细管扩张，虹膜新生血管形成，眼内新生血管形成，视网膜变性，囊样黄斑水肿CME，血管炎，视盘水肿，视网膜炎，结膜炎例如，传染性结膜炎和非传染性例如，过敏性结膜炎），利伯先天性黑朦还称为利伯氏先天性黑朦Leber’scongenitalamaurosis或LCA，葡萄膜炎包括传染性和非传染性葡萄膜炎），脉络膜炎例如，多病灶脉络膜炎），眼组织胞浆菌病，眼睑炎，干眼，外伤性眼损伤，舍格伦病，和其他眼科疾病，其中所述疾病或病症与眼部新血管生成、血管渗漏和或视网膜水肿相关。另外的示例性的眼部病症包括与发红角的新血管生成相关的疾病和由纤维血管或纤维组织的异常增生引起的疾病，包括所有形式的增生性玻璃体视网膜病proliferativevitreoretinopathy〇[0180]示例性的与角膜新生血管形成相关的疾病包括，但不限于，流行性角结膜炎，维生素A缺乏，隐形眼镜过度磨损，变应性角膜炎，上缘角膜炎，翼状胬肉干燥性角膜炎，舍格伦综合征，红斑痤疮，phylectenulosis，梅毒，分枝杆菌感染，脂质变性，化学烧伤chemicalburns，细菌性溃疡，真菌性溃疡，单纯疱瘆感染，带状疱瘆感染，原虫感染，卡波西肉瘤Kaposisarcoma，莫伦溃疡，泰里安边缘变性，边缘性角质层分离，类风湿性关节炎，全身性狼疮，多动脉炎，外伤，韦格纳结节病，巩膜炎（scIeritis，史蒂文斯约翰逊综合征Stevens-Johnsonsyndrome，periphigoid放身才状角膜切开术（periphigoidradialkeratotomy，和角膜移植排斥（cornealgraphrejection。[0181]示例性的与视网膜脉络膜新血管生成相关的疾病包括，但不限于，糖尿病视网膜病，黄斑变性，镰刀细胞贫血，结节病，梅毒，弹性假黄色瘤，佩吉特病，静脉闭塞，动脉闭塞，颈动脉闭锁性病，慢性葡萄膜炎玻璃体炎，分枝杆菌感染，莱姆病，全身性红斑性狼疮systemiclupuserythematosis，早产儿视网膜病，色素性视网膜炎，视网膜水肿包括黄斑水肿），伊尔斯病，贝切特病Behcet’sdisease，引起视网膜炎或脉络膜炎例如，多病灶脉络膜炎）的传染病，推测的眼组织胞浆菌病，贝斯特病Best’sdisease卵黄状黄斑变性），近视，视窝，施塔加特病，睫状体扁平部炎，视网膜脱离例如，慢性视网膜脱离），高粘滞综合征，弓形体病，外伤，和激光后并发症。[0182]“与不需要的血管通透性相关的病症”用在本文中包括，例如，与脑肿瘤相关的水月中，与恶性肿瘤相关的腹水，梅格斯综合征，肺部炎症，肾病综合征，心包积液，胸腔积液，与心血管病相关的通透性，所述心血管病诸如心肌梗死myocardialinfarctions和中风后的病症等。[0183]应该理解，上述分类不相互排斥，并且一种病症可能落入多个种类中。[0184]术语“细胞增生病症”和“增生性病症”是指与某种程度的异常细胞增生相关的病症。在一个实施方案中，所述细胞增生病症是癌症。[0185]术语“癌症”、“癌性的”“细胞增生病症”、“增生性病症”和“肿瘤”在本文中提及时不相互排斥。[0186]“肿瘤”用在本文中是指所有的肿瘤性细胞生长和增生，不管是恶性的还是良性的，和所有癌前和癌性细胞和组织。[0187]“血管生成因子或试剂”是刺激血管发育的生长因子，例如，促进血管发生，内皮细胞生长，血管稳定性，和或血管发生等。例如，血管生成因子包括，但不限于，例如，VEGF和VEGF家族、P1GF、PDGF家族、成纤维细胞生长因子家族FGF的成员，TIE配体血管生成素），红藻氨酸ephrins，Del-l，成纤维细胞生长因子:酸性的（aFGF和碱性的（bFGF，卵泡抑素Follistatin，粒细胞集落刺激因子G-CSF，肝细胞生长因子HGF散射因子SF，白介素-8IL-8，瘦素，肝素结合细胞因子Midkine，胎盘生长因子，血小板来源的内皮细胞生长因子PD-ECGF，血小板来源的生长因子，特别是TOGF-BB或PDGFR-β，多效蛋白（PTN，颗粒体蛋白原Progranulin，增殖蛋白，转化生长因子-αTGF-α，转化生长因子-βTGF-β，肿瘤坏死因子-aTNF-a，血管内皮生长因子VEGF血管通透性因子VPF等。其还包括加速伤口愈合的因子，诸如生长激素，胰岛素样生长因子-IIGF-I，VIGF，表皮生长因子EGF，CTGF和其家族成员，和TGF-a和TGF-β。参见，例如，Klagsbrun和D’Amore，Annu.Rev.Physiol.，53:217-391991;Streii^PDetmar，0ncogene，22:3172-31792003;FerraraAlitalo，NatureMedicine512:1359-13641999;Tonini等人，Oncogene，22:6549-65562003例如，表I列出了已知的血管生成因子）；和Sato，IntJ·Clin·Oncol·，8:200-2062003〇[0188]“抗-血管生成剂”或“血管生成抑制剂”是指直接或间接地抑制血管生成、血管发生或不需要的血管通透性的小分子量物质、多核苷酸、多肽、分离的蛋白、重组蛋白、抗体或其缀合物或融合蛋白。应该理解，所述抗-血管生成剂包括结合并阻断血管生成因子或其受体的血管生成活性的那些试剂。例如，抗-血管生成剂是针对上文定义的血管生成试剂的抗体或其他结合剂，例如，VEGF拮抗剂例如，针对VEGF-A或针对VEGF-A受体例如，KDR受体或Flt-I受体）的抗体），PDGF拮抗剂（例如，抗-PDGFR抑制剂，如GLEEVEC™ImatinibMesylate。抗-血管生成剂还包括天然的血管生成抑制剂，例如，血管生成抑制因子angiostatin，内皮他丁（endostatin等。参见，例如，Klagsbrun和D’Amore，Annu·Rev·Physiol·，53:217-391991;Streit和Detmar，Oncogene，22:3172-31792003例如，表3列出了恶性黑素瘤的抗-血管生成疗法）；FerraraAlitalo，NatureMedicine512:1359-13641999;Tonini等人·，0ncogene，22:6549-65562003例如，表2列出了已知的抗血管生成因子）；以及，SatoInt.J.Clin.Oncol.,8:200-2062003例如，表1列出了临床试验中使用的抗-血管生成剂）。[0189]术语“VEGF拮抗剂”用在本文中是指能够结合VEGF、减少VEGF表达水平或中和、阻断、抑制、消除、减少、或干扰VEGF生物活性的分子，所述VEGF生物活性包括，但不限于，VEGF与一种或多种VEGF受体的结合，VEGF信号传导，和VEGF-介导的血管生成和内皮细胞存活或增生。例如，能够中和、阻断、抑制、消除、减少或干扰VEGF生物活性的分子可以通过与一种或多种VEGF受体VEGFR例如，VEGFRl，VEGFR2，VEGFR3，膜结合的VEGF受体mbVEGFR，或可溶的VEGF受体sVEGFR结合而发挥其作用。可用于本发明的方法的包括的VEGF拮抗剂是特异性结合VEGF的多肽，抗-VEGF抗体和其抗原结合片段，特异性结合VEGF的受体分子和衍生物，由此隔开其与一种或多种受体的结合，融合蛋白（例如，VEGF-TrapRegeneron和VEGFm-白树毒素PeregrineJEGF拮抗剂还包括VEGF多肽的拮抗剂变体，至少与编码VEGF多肽的核酸分子的片段互补的反义核酸碱基寡聚体;至少与编码VEGF多肽的核酸分子的片段互补的小RNA;靶向VEGF的核酶;VEGF的peptibody;和VEGF适体。VEGF拮抗剂还包括与VEGFR结合的多肽，抗-VEGFR抗体，和其抗原结合片段，以及结合VEGFR由此阻断、抑制、消除、减少或干扰VEGF生物活性例如，VEGF信号传导）的衍生物，或融合蛋白。VEGF拮抗剂还包括非肽小分子，其结合VEGF或VEGFR并且能够阻断、抑制、消除、减少或干扰VEGF生物活性。由此，术语“VEGF活性”特别包括VEGF-介导的VEGF生物活性。在某些实施方案中，VEGF拮抗剂减少或抑制至少10%，20%，30%，40%，50%，60%，70%，80%，90%或更多的VEGF的表达水平或生物活性。在一些实施方案中，被VEGF-特异性拮抗剂抑制的VEGF是VEGF8-109，VEGF1-109，或VEGFi65o[0190]当用于本文时，VEGF拮抗剂可以包括，但不限于，抗-VEGFR2抗体和相关的分子例如，雷莫芦单抗ramucirumab，tanibirumab，阿柏西普），抗-VEGFRl抗体和相关的分子例如，icrucumab，阿柏西普（VEGFTrap_Eye;EYL.EA®.，和ziv-阿柏西普（VEGFTrap;ZA:LTRAP®，双特异性VEGF抗体（例如，MP-0250，vanucizumabVEGF-ANG2，和US20010236388中公开的双特异性抗体），包括抗-VEGF、抗-VEGFRl和抗-VEGFR2臂中的两个的组合的双特异性抗体，抗-VEGF抗体（例如，贝伐珠单抗（bevacizumab，赛伐珠单抗sevacizumab，和雷珠单抗），和非肽小分子VEGF诘抗剂（例如，帕卩坐帕尼（pazopanib，阿西替尼（axitinib，凡德他尼（vandetanib，stivarga，卡博替尼（cabozantinib，乐伐替尼（Ienvatinib，尼达尼布nintedanib，orantinib，拉帕替尼（telatinib，多韦替尼dovitinig，西地尼布cediranib，莫特沙芬motesanib，索凡替尼（sulfatinib，阿帕替尼（apatinib，foretinib，法米替尼（famitinib，和tivozanib。另外的VEGF诘抗剂记载在下文中。[0191]试剂例如药物制剂的“有效量”是指在需要的剂量和时间阶段有效获得所需的治疗或预防结果的量。[0192]“个体”或“受试者”是哺乳动物。哺乳动物包括，但不限于，家养动物例如，牛，羊，猫，狗和马），灵长类动物例如，人和非人灵长类动物如猴），兔，以及啮齿类动物例如，小鼠和大鼠）。在某些实施方案中，个体或受试者是人。“受试者”可以是“患者”。[0193]术语“癌症”或“癌的”是指或描述哺乳动物中典型地以失调的细胞生长为特征的生理状态。癌症的实例包括，但不限于，癌（carcinoma，淋巴瘤（lymphoma，母细胞瘤blastoma，肉瘤（sarcoma，和白血病。此类癌症的更具体的实例包括鳞状细胞癌squamouscellcancer，小细胞肺癌（small-celllungcancer，非小细胞肺癌，胃肠癌，胰腺癌，胶质母细胞瘤，宫颈癌，卵巢癌，肝癌，膀胱癌，肝细胞瘤，乳腺癌，结肠癌，结肠直肠癌，子宫内膜癌，唾液腺癌，肾脏癌，肾癌，前列腺癌，外阴癌，甲状腺癌，肝癌和多种类型的头颈癌。用于治疗目的的“哺乳动物”是指分类为哺乳动物的任意动物，包括人、家养动物和农场动物，非人灵长类动物，和动物园、比赛或宠物动物，如狗、马、猫、牛等。[0194]“病症”是将受益于使用抗体的治疗的任意病况。例如，患有或需要针对异常血管生成过量的、不适当的或失控的血管生成或血管通透性的预防的哺乳动物。这包括慢性和急性病症或疾病，包括使哺乳动物影响与患讨论的病症的那些病理学病况。本文治疗的病症的非限制性实例包括与病理性血管发生相关的病症例如，眼部病症和细胞增生病症）和与不需要的血管通透性相关的病症。[0195]术语“抗瘤组合物”是指可用于治疗癌症的组合物，其包含至少一种活性治疗剂，例如，“抗癌剂”。治疗剂抗癌剂的实例包括，但不限于，例如，化疗剂，生长抑制剂，细胞毒性剂，用于放射疗法中的药剂，抗血管生成剂，凋亡剂，抗微观蛋白剂，和其他治疗癌症的药剂，如抗-HER-2抗体，抗-CD20抗体，表皮生长因子受体EGFR拮抗剂（例如，酪氨酸激酶抑制剂），HER1EGFR抑制剂例如，厄洛替尼erlotinibTARCEVAtm，血小板来源的生长因子抑制剂例如，GLEEVEC™甲磺酸伊马替尼（ImatinibMesylate，C0X-2抑制剂例如，塞来考昔celecoxib，干扰素类，细胞因子，结合下述靶标中的一种或多种的拮抗剂例如，中和抗体）：ErbB2，ErbB3，ErbB4，PDGFR-β，BlyS，APRIL，BCMA或VEGF受体，TRAILApo2，和其他生物活性和有机化学药剂，等等。它们的组合也包括在本发明中。[0196]术语“细胞毒性试剂”用作本文中指抑制或防止细胞功能和或引起细胞死亡或破坏的物质。细胞毒性试剂包括，但不限于，放射性同位素（例如At211，I131，I125，Y9，Re186，1^188,5!11153,81212，？32，？13212和1^的放射性同位素）；化疗剂或药物（例如，甲氨蝶呤methotrexate，adriamicin，长春生物碱（vincaalkaloids长春新碱（vincristine，长春碱（vinblastine，依托泊苷（etoposide，多柔比星（doxorubicin，美法仑meIphalan，丝裂霉素CmitomycinC，苯丁酸氮芥（chlorambuci1，柔红霉素daunorubicin或其他嵌入试剂）；生长抑制剂;酶及其片段，如核水解酶;抗生素类;毒素，如细菌、真菌、植物或动物来源的小分子毒素或酶活性毒素，包括它们的片段和或变体;和下文公开的多种抗肿瘤剂或抗癌剂。[0197]“化疗剂”是有效用于治疗癌症的化合物。化疗剂的实例包括有效用于治疗癌症的化合物C3化疗剂的实例包括焼化剂类（alkylatingagents，如塞替哌（thiotepa和CYTOXAN㊣环磷酰胺;烷基磺酸酯alkylsulfonates，如白消安busulfan，英丙舒凡（improsulfan和哌泊舒凡（piposulfan;B丫丙啶类（aziridines，如苯佐替派benzodopa，卡波醌（carboquone，美妥替哌（meturedopa，和乌瑞替哌（uredopa;乙稀亚胺ethylenimines和甲基蜜胺类methylameIamines，包括六甲蜜胺altretamine，曲他胺（triethylenemelamine，三亚乙基磷酰胺（trietylenephosphoramide，三乙撑硫代磷酰胺（triethiylenethiophosphoramide和三轻甲蜜胺（trimethylolomelamine;acetogenins特别是布拉他辛（bullatacin和布拉他辛酮（bullatacinone;喜树碱camptothecin包括合成的类似物托泊替康（topotecan;苔藓抑素（bryostatin;callystatin;CC_1065包括其阿多来新adozelesin、卡折来新carzelesin和比折来新bizelesin合成类似物）；隐藻素类cryptophycins特别是隐藻素1和隐藻素8;多拉司他汀dolastatin;倍癌霉素duocarmycin包括合成的类似物，KW-2189和CB1-TM1;艾植素（eleutherobin;pancratistatin;匍枝珊瑚醇（sarcodictyin;海绵素spongistatin;氮芥（nitrogenmustards如苯丁酸氮芥（chlorambucil，萘氮芥chlornaphazine，胆磷酰胺（cholophosphamide，雌莫司汀（estramustine，异环磷酰胺ifosfamide，氮芥（mechlorethamine，盐酉爱氧氮芥（mechlorethamineoxidehydiOchloride，美法仑，新氮芥novembichin，苯芥胆留醇phenesterine，泼尼莫司汀prednimustine，曲磷胺（trof〇sfamide，尿喃啶氮芥（uracilmustard;亚硝脈类nitrosureas如卡莫司汀（carmustine，氯脲菌素（chlorozotocin，福莫司汀fotemustine，洛莫司汀（Iomustine，尼莫司汀（nimustine，和雷莫司汀ranimnustine;抗生素类如稀二炔类（enediyne抗生素（例如，加利车霉素calicheamicin，特别是加利车霉素γII和加利车霉素ωIl参见，例如，Agnew，ChemInti.Ed.Engl.，33:183-1861994;稀二炔蒽环类抗生素dynemicin，包括稀二炔蒽环类抗生素AdynemicinA;二膦酸盐类bisphosphonates，如氯膦酸盐clodronate;埃斯波霉素esperamicin;以及新制癌菌素neocarzinostatin发色团和相关色蛋白稀二炔类抗生素发色团），阿克拉霉素aclacinomysins，放线菌素actinomycin，安曲霉素authramycin，偶氮丝氨酸（azaserine，博来霉素（bleomycins，放线菌素Ccactinomycin，carabicin，洋红霉素（carminomycin，嗜癌霉素（carzinophilin，色霉素（chromomycinis，放线菌素Ddactinomycin，柔红霉素（daunorubicin，地托比星detorubicin，6_重氮基-5-氧-L-正亮氨酸，ADRIAMYCIN®多柔比星doxorubicin包括吗啉代-多柔比星morpholino-doxorubicin，氯基吗啉代-多柔比星cyanomorpholino-doxorubicin，2_卩比略啉代-多柔比星和脱氧多柔比星deoxydoxorubicin，表柔比星（epirubicin，依索比星（esorubicin，伊达比星idarubicin，马塞罗霉素marcellomycin，丝裂霉素mitomycins如丝裂霉素C，麦考酷酸mycophenolicacid，诺拉霉素（nogalamycin，橄榄霉素（olivomycins，培洛霉素peplomycin，potfiromycin，卩票呤霉素puromycin，三铁阿霉素（quelamycin，罗多比星rodorubicin，链黑霉素（streptonigrin，链佐星（streptozocin，杀结核菌素tubercidin，乌苯美司ubenimex，净司他丁zinostatin，佐柔比星zorubicin;抗代谢物如甲氨噪呤和5-氟尿喃啶（5-fluorouraciI，5-FU;叶酸类似物如二甲叶酸denopterin，甲氨噪呤，噪罗呤pteropterin，三甲曲沙（trimetrexate;卩票呤类似物，如氟达拉滨（fludarabine，6_疏基嘿呤，硫咪嘿呤（thiamiprine，硫鸟嘿呤thioguanine;喃啶类似物，如安西他滨ancitabine，阿扎胞苷azacitidine，6_氮尿苷，卡莫氟carmofur，阿糖胞苷cytarabine，双脱氧尿苷dideoxyuridine，去氧氟尿苷doxifluridine，依诺他滨enocitabine，氟尿苷floxuridine;雄激素类，诸如卡鲁睾酮（calusterone，丙酸屈他雄酮（dromostanolonepropionate，环硫雄醇epitiostanol，美雄焼mepitiostane，睾内酯（testolactone;抗肾上腺药（anti-adrenals，如氨鲁米特（aminoglutethimide，米托坦（mitotane，曲洛司坦triIostane;叶酸补充剂，如亚叶酸（frolinicacid;醋葡醛内酯（aceglatone;aldophosphamideglycoside;氨基酮戊酸（aminolevulinicacid;恩尿喃啶eniIuraci1;安B丫啶（amsacrine;bestrabuci1;比生群（bisantrene;依达曲沙edatraxate;defofamine;秋水仙胺（demecolcine;地B丫醌（diaziquone;elfornithine;依利醋鞍（elliptiniumacetate;epothilone;依托格鲁（etoglucid;硝酸镓（galIiumnitrate;轻脲（hydroxyurea;香燕多糖（lentinan;氯尼达明Ionidainine;美登木素生物碱类maytansinoids，如美登素maytansine和安丝菌素ansamitocins;米托胍腙（mitoguazone;米托蒽醌（mitoxantrone;莫哌达醇mopidanmol;尼曲卩丫啶nitraerine;喷司他丁pentostatin;异丙嗪phenamet;卩比柔比星（pirarubicin;洛索蒽醌（Iosoxantrone;鬼白酸（podophyllinicacid;2_乙基酰肼（2-ethylhydrazide;丙卡巴肼（procarbazine;PSK㊣多糖复合物（JHSNaturalProducts，Eugene，OR;雷佐生（razoxane;利索新rhizoxin;西佐喃（sizofiran;锗螺胺（spirogermanium;细交链抱菌酮酸（tenuazonicacid;三亚胺醌（triaziquone;2，2’，2”_三氯三乙胺（2,2’，2”_trichlorotriethylamine;单端孢霉稀族化合物trichothecenes特别是T-2毒素，verracurinA，杆抱菌素AroridinAHPanguidine;乌拉坦（urethan;长春地辛（Vindesine;达卡巴嗪（dacarbazine;甘露莫司汀mannomustine;二溴甘露醇（mitobronitol;二溴卫矛醇（mitolactol;哌泊溴焼pipobroman;gacytosine;阿拉伯糖苷（arabinoside“Ara_C”）；环磷酰胺；塞替哌thiotepa;紫杉焼类化合物taxoids，例如，TAXOL⑧紫杉醇Bristol-MyersSquibbOncology，Princeton，N.J.，ABRAXANE™无克列莫佛Cremophor-free，紫杉醇的白蛋白改造的纳米颗粒制剂（albumin-engineerednanoparticleformulationofpaclitaxelAmericanPharmaceuticalPartners，Schaumberg，Illinois，和TAXOTERE®名四他赛（doxetaxelRli3ne._P〇ulencRorer，Antony，France;chloranbuciI;GEMZAR⑧吉西他滨gemcitabine;6-硫鸟卩票呤;疏卩票呤mercaptopurine;甲氨噪呤；钼类似物，如顺钼（cisplatin和卡钼（carboplatin;长春碱；钼；依托泊苷（etoposideVP-16;异环磷酰胺（ifosfamide;米托蒽醌mitoxantrone;长春新碱vincristine;IMAVEU3INE®长春瑞滨（vinorelbine;诺安托（novantrone;替尼泊苷（teniposide;依达曲沙edatrexate;柔红霉素daunomycin;氨基噪呤aminopterin;希罗达xeloda;伊班勝酸盐（ibandronate;伊立替康（irinotecanCamptosar，CPT-11包括伊立替康与5-FU和亚叶酸（Ieucovorin的治疗方案）；拓扑异构酶抑制剂RFS2000;二氟甲基鸟氨酸difluorometlhylornithineDMFO;维甲类retinoids，如视黄酸retinoicacid;卡培他滨（capecitabine;康普瑞汀（combretastatin;亚叶酸（leucovorin，LV;奥沙利铀oxaliplatin，包括奥沙利铂治疗方案FOLFOX;下列的抑制剂:PKC-a，Raf，H-Ras，EGFR例如，厄洛替尼（er1〇tinibTARCEVAtm和VEGF-A，所述抑制剂减少细胞增殖，以及上述任一种的药用盐、酸或衍生物。[0198]抗激素试剂也包含在这一定义中，其起作用调控或抑制激素对肿瘤的作用，如抗雌激素和选择性雌激素受体调节剂（SERM，其包括，例如，他莫昔芬（tamoxifen包括NOLVADEX⑧他莫昔芬），雷洛昔芬raloxifene，屈洛昔芬droloxifene，4-羟基他莫昔芬（4-hydroxytamoxifen，曲沃昔芬（trioxifene，1^«丨€6116，1^117018，奥那司酮onapristone，和FARESTON®托瑞米芬（toremifene;抑制芳香酶的芳香酶抑制剂，其调节肾上腺中的雌激素生产，诸如例如，45-咪卩坐，氨鲁米特aminoglutethimide，MEGASE®醋酸甲地孕酮（megestrolacetate，AROMASIN®依西美坦exemestane，福美坦（formestanie，法倔挫（fadrozoIL'，RIVISOR1®伏氯挫vorozole，FEMARA®来曲唑（letrozole，和ARIMIDEX®阿那曲唑anastrozole;和抗雄激素类，如氟他胺flutamide，尼鲁米特nilutamide，比卡鲁胺bicalutamide，亮丙立德（Ieuprolide，和戈舍瑞林（oserelin;和戈舍瑞林troxacitabine1,3-二氧杂环戊烧核苷胞喃啶类似物）；反义寡核苷酸，特别是抑制异常细胞增殖中所涉及的信号传导途径中的基因（诸如，例如，PKC-α，Raf和Η-Ras表达的那些；核酶如VEGF表达抑制剂（例如，ANGIOZYME®核酶和HER2表达抑制剂;疫苗如基因治疗疫苗，例如，ALLOVECTIN®疫苗，LEUVECTIN®疫苗，和VAXID®:疫苗；PROLEUKIN⑧rIL-2;LURTOTECAN®拓扑异构酶1抑制剂;ABARELIX®rmRH;长春瑞滨和埃斯波霉素Esperamicins参见U.S.Pat.No.4，675，187，以及上述任一种的药用盐、酸或衍生物。[0199]术语“前药”用在本申请中是指药物活性物质的前体或衍生物形式，其较亲本药物对肿瘤细胞的细胞毒性更小并且能够被酶活化或转化为更具活性的亲本形式。参见，例如，WiIman，“ProdrugsinCancerChemotherapy”BiochemicalSocietyTransactions，14，pp.375-382，615thMeetingBelfast1986和Stella等人，“Prodrugs:AChemicalApproachtoTargetedDrugDelivery,’’DirectedDrugDelivery，Borchardt等人（编），pp.247-267，HumanaPress1985。本发明的前药包括，但不限于，含磷酸盐的前药，含硫代磷酸盐的前药，含硫酸盐的前药，含肽的前药，D-氨基酸修饰的前药，糖基化前药，含β-内酰胺的前药，含任选取代的苯氧基乙酰胺的前药或含任选取代的苯基乙酰胺的前药，可以被转化为更具活性的无细胞毒性的药物的5-氟胞嘧啶和其它5-氟尿嘧啶前药。可以被衍生成用于本发明的前药形式的细胞毒性药物的实例包括，但不限于，上述那些化疗剂。[0200]术语“包装插页”用于指通常包括在治疗产品的商品包装中的使用说明，其包含关于适应证、用法、剂量、给药、组合疗法、禁忌症的信息和或关于使用这样的治疗产品的警告。[0201]“药用载体”是指药物制剂中活性成分之外的成分，其对受试者是无毒的。药用载体包括但不限于缓冲剂、赋形剂、稳定剂或防腐剂。[0202]术语“药物制剂”指这样的制剂，其以允许包含在其中的活性成分例如，抗-VEGF抗体，抗体缀合物，融合蛋白，或多聚物制剂的生物学活性有效的形式存在，并且不包含对施用所述制剂的受试者具有不可接受的毒性的另外的成分。[0203]用于本文时，“治疗（treatment”（及其语法变化如“治疗（treat”或“治疗treating”）指在尝试改变被治疗的个体的天然进程中的临床干预，并且可以为了预防或在临床病理学的进程中进行。治疗的理想效果包括，但不限于，防止疾病发生或复发，缓和症状，消除疾病的任何直接或间接病理学后果，防止转移，降低疾病进展速率，改善或减轻疾病状态，和缓和或改善的预后。在一些实施方案中，将本发明的抗体或包含本发明的抗体的其他组合物例如，抗体缀合物、融合蛋白或多聚体制剂）用于延缓疾病的发生或减缓疾病的进展。[0204]“分离的”核酸分子是指这样的核酸分子，其被鉴定并且与在所述核酸分子的天然来源中其通常相关的至少一种污染核酸分子分离。分离的核酸分子不同于其在天然中所发现的形式或设置。因此，分离的核酸分子与其在天然细胞中存在的核酸分子区分开。然而，分离的核酸分子包括包含在通常表达抗体的细胞中的核酸分子，其中，例如，所述核酸分子在不同于其天然细胞位置的染色体位置处。[0205]表述“控制序列”是指在特定的宿主生物体内表达可操作连接的编码序列所需要的DNA序列。适合用于原核生物的控制序列，例如包括启动子，任选地操纵子序列，和核糖体结合位点。已知真核细胞利用启动子、多腺苷酸化信号和增强子。[0206]当核酸在被置于与另一个核酸序列的功能关系中，是“可操作地连接的”。例如，前序列或分泌前导序列的DNA与多肽的DNA可操作地连接，条件是其表达为参与多肽分泌的前蛋白；启动子或增强子与编码序列可操作地连接，条件是其影响序列的转录;或核糖体结合位点与编码序列可操作地连接，条件是其被定位为促进翻译。一般地，“可操作地连接的”意指被连接的DNA序列是连续的，且在分泌前导序列的情形中，是连续的且在可读框中。然而，增强子不必须是连续的。连接通过在方便的限制性位点处的连接来实现。如果所述位点不存在，则根据常规实践使用合成的寡核苷酸适体或接头。[0207]用于本文中时，表述“细胞”、“细胞系”和“细胞培养物”可互换使用，且全部这些名称都包括子代。因此，词语“转化体”和“转化的细胞”包括原代受试细胞和由其来源的培养物，而不考虑转移的次数。还理解所有的子代的DNA含量可能不精确一致，这归因于有意或无意的突变。包括在最初转化的细胞中筛选的具有相同功能或生物学活性的变异子代。在意指不同名称时，通过上下文其将是清楚的。[0208]用于本文时，“文库”是指多个抗体或抗体片段序列（例如，本发明的抗-VEGF抗体），或编码这些序列的核酸，所述序列与根据本发明的方法要引入到这些序列中的变体氨基酸的组合不同。[0209]“突变”是相对于参比核苷酸序列如野生型序列）的核苷酸缺失、插入或置换。[0210]用于本文时，“密码子组”是指用于编码需要的变体氨基酸的一组不同的核苷酸三联体序列。可以合成一组寡核苷酸，例如，通过固相合成，包括表示该密码子组所提供的所有可能的核苷酸三联体组合并且编码需要的氨基酸组的序列。密码子命名的标准形式是IUB密码形式，其在本领域中是已知的并记述在本文中。密码子组典型地由3个斜体大写字母表示，例如，NNK，NNS，XYZ，DVK等。在某些位置具有所选的核苷酸“简并性”的寡核苷酸的合成在本领域中是公知的，例如，TR頂法Knappek等人·，J.Mol.Biol.296:57-861999;Garrard等人.，Gene128:1031993。所述具有特定密码子组的寡核苷酸组可以使用商业核酸合成仪（例如，可购自AppliedBiosystems,FosterCity，CA合成，或可以商业获得例如，购自LifeTechnologies，Rockvilie，MD。因此，具有特定密码子组的合成的寡核苷酸组典型地包括多个具有不同序列的寡核苷酸，不同是由在整体序列中的密码子组建立的。按照本发明使用的寡核苷酸具有允许与可变结构域核酸模板杂交的序列，并且还可以，但是不必须，包括例如用于克隆目的的限制性酶位点。[0211]“噬菌体展示”是将变体多肽作为融合蛋白质至外壳蛋白的至少一部分展示在噬菌体例如丝状噬菌体粒子表面上的技术。噬菌体展示的用途在于这样的事实:可以快速且有效地针对异高亲和力结合靶标抗原的那些序列对随机化蛋白变体的大文库进行分选。肽和蛋白文库在噬菌体上的展示已经用于对上百万多肽筛选具有特异性结合特性的多肽。多价噬菌体展示方法已经用于通过与丝状噬菌体的基因III或基因VIII融合而展示小的随机肽和小蛋白。We11s和Lowman，Curr·Opin·Struct·Biol·，3:355-3621992，以及其中引用的参考文献。在单价噬菌体展示中，蛋白或肽文库融合在基因III或其部分上，并且在野生型基因III蛋白的存在下低水平表达的，使得噬菌体粒子展示一个拷贝的融合蛋白或不展示融合蛋白。相对于多价噬菌体，抗体亲抗原性降低，使得分选是基于固有的配体亲和力，并且使用菌粒载体，其简化DNA操作。Lowman和WelIs,Methods:AcompaniontoMethodsinEnzymology，3:205_02161991〇[0212]“噬菌粒”是具有细菌复制起点（例如，ColEl和一个拷贝的噬菌体基因间区域的质粒载体。噬菌粒可以用于任何已知的噬菌体，包括丝状噬菌体和人字形噬菌体。质粒还通常包含用于抗生素抗性的选择标记。克隆到这些载体中的DNA片段可以随质粒繁殖。当对携带这些载体的细胞提供产生噬菌体粒子所需要的全部基因时，质粒的复制模式变为滚环式复制，从而产生多个拷贝的一条链的质粒DNA和包装噬菌体粒子。噬菌粒可以形成感染性或非传染性噬菌体粒子。该术语包括这样的噬菌粒，其包含作为基因融合体的与异源多肽基因连接的噬菌体外壳蛋白基因或其片段，使得所述异源多肽被展示在噬菌体粒子的表面上。[0213]术语“噬菌体载体”意指包含异源基因并且能够复制的噬菌体的双链复制形式。噬菌体载体具有噬菌体复制起点，允许噬菌体复制和噬菌体粒子形成。噬菌体优选是丝状噬菌体，诸如M13，fl，fd，Pf3噬菌体或其衍生物，或人字形噬菌体，如X，21，phi80，phi81，82，424,434等，或其衍生物。[0214]起始多肽或参比多肽例如，参比抗体或其可变结构域HVR的“变体”或“突变体”是这样的多肽：（1具有与所述起始多肽或参比多肽不同的氨基酸序列，并且2通过天然或人工人造诱变来源于所述起始多肽或参比多肽。所述变体包括，例如，在目的多肽的氨基酸序列内的残基的缺失、和或插入和或置换，本文中称为“氨基酸残基变化”。因此，变体HVR是指相对于起始多肽或参比多肽序列诸如源抗体或抗原结合片段的序列包含变异序列的HVR。在该情形中，氨基酸残基变化是指与在起始多肽或参比多肽序列（如参比抗体或其片段的序列）中相应位置的氨基酸不同的氨基酸。可以进行缺失、插入和置换的任意组合，以得到最终的变体或突变体构建体，条件是所述最终的构建体具有需要的功能特征。氨基酸变化还可以改变多肽的翻译后过程，诸如改变糖基化位点的数目或位置。[0215]“野生型WT”或“参比”序列或“野生型”或“参比”蛋白多肽的序列，诸如参比抗体的HVR或可变结构域，可以是通过引入突变衍生变体多肽的参比序列。通常，关于给定蛋白的“野生型”序列是自然中最常见的序列。类似地，“野生型”基因序列是自然中最常见的基因的序列。可以通过天然过程或通过人为诱导方式向“野生型”基因（以及因此其编码的蛋白）中引入突变。所述过程的产物是原始“野生型”蛋白或基因的“变体”或“突变体”。[0216]“参比抗体”用在本文中是指这样的抗体或其片段:其抗原结合序列在按照本文所述的标准进行多样化时作为模板序列。抗原结合序列通常包括抗体可变区，优选至少一个HVR，优选包括构架区。[0217]“大规模地平行测序”或“大规模平行测序”在本领域中也称为“下一代测序”或“第二代测序”，意指任意高通量的核酸测序方法。这些方法典型地包括大量例如，数千、数百万或数十亿）空间上隔开的、克隆扩增的DNA模板或单个DNA分子的平行测序。参见，例如，Metzker，NatureReviewsGenetics11:31_36,2010。[0218]用于本文时，“富集的”意指，与相应的参比文库例如，未分选的文库，或已经针对不同的或不相关抗原分选的文库相比，在分选的文库中以较高的频率存在的实体例如，氨基酸残基变化）。相反，“消耗的”意指，与相应的参比文库例如，未分选的文库，或已经针对不同的或不相关抗原分选的文库相比，在分选的文库中以较低频率存在的实体例如，氨基酸残基变化）。术语“中性的”用于提及鉴定氨基酸残基变体的方法时意指没有富集也没有消耗的实体，换言之，与相应的参比文库例如，未分选的文库，或已经针对不同的或不相关抗原分选的文库相比，其在分选的文库中以大致相同的频率存在。[0219]“等电点pi”意指这样的pH，在该pH，分子例如，蛋白，如抗体不携带净电荷，在本领域中也称为“pHI”或“IEP”。[0220]用于本文时，“抗体缀合物”是共价连接一个或多个聚合物的抗体。任意适当的聚合物可以缀合到抗体上，例如，亲水聚合物例如，透明质酸HA聚乙二醇PEG或疏水聚合物例如，聚乳酸-共-乙醇酸）（PLGA。[0221]用于本文时，术语“聚合物”意指包括通过线性、环形、分支、交联的或树枝状方式或它们的组合的化学键连接的重复结构范围（即，单体的分子。聚合物是合成的或天然存在的，或是它们的组合。应该理解，术语“聚合物”包括共聚物，其是包括两个以上不同的单体的聚合物。聚合物还可以是同型聚合物，其是仅包含单种类型的单体的聚合物。[0222]术语“透明质酸”、“hyaluranon”或“HA”在本文中可互换使用，是指聚合的糖胺聚糖GAG，其包含重复的N-乙酰基葡糖胺和葡糖醛酸的二糖单位。HA是阴离子、非硫酸化的GAG，其可以例如存在于细胞外基质例如，眼睛的玻璃体）、结缔组织、表皮和神经组织中。[0223]术语“聚乙二醇”或“PEG”用在本文中是指已知为聚氧化乙烯（TOO或聚氧乙烯POE的聚醚化合物取决于其分子量）JEG可以具有H-O-CH2-CH2n-OH的结构，其中η是任意适当的整数。PEG可以是分支的PEG，星形PEG，或蜂巢型PEG。例如，PEG可以是PEG四聚体、PEG六聚体或PEG八聚体。[0224]当用于本文时，术语“融合蛋白”是指这样蛋白，其中第一肽、蛋白或多肽，例如，抗体例如，抗-VEGF抗体例如，本文所述的任一种抗-VEGF抗体，例如，G6.31AARR，直接或间接连接在第二肽、蛋白、或多肽上，例如，眼部结合结构域例如，HA结合结构域）。在一个实施例中，第一肽、蛋白或多肽（例如，抗体可以通过接头连接在第二肽、蛋白或多肽（例如，眼部结合结构域例如，HA结合结构域）上。在融合蛋白的情形中，术语“连接”和“连接的”和其语法变化与术语“共价连接的”可互换使用，并且是指融合蛋白的两个部分之间的直接或间接的共价键合例如，肽键）。通常，本发明的融合蛋白是抗体融合蛋白。所述抗体可以是抗体片段，例如，Fab，Fab’，或Fab-C。在一些情形中，抗体片段是Fab。[0225]术语“眼部结合结构域”是指结合眼中存在的生物物质（例如，角膜，玻璃体，视网膜，视网膜色素上皮或脉络膜的肽、蛋白、多肽或其片段。作为一个实例，在一些情形中，目艮中存在的生物物质是细胞外基质组分，例如，碳水化合物（例如，带电荷的碳水化合物（例如，糖胺聚糖），糖蛋白（例如，微纤维蛋白和opticin，或蛋白（例如，胶原蛋白（例如，I-XXVII型胶原蛋白，特别是胶原蛋白II，胶原蛋白IX，胶原蛋白V，胶原蛋白VI，胶原蛋白XI，和其异型胶原蛋白原纤维），或例如在LeGoff等人，Eye22:1214-1222,2008中所述的其他细胞外基质组分。在一些情形中，所述细胞外基质组分是糖胺聚糖，例如，HA或蛋白聚糖例如，硫酸软骨素或硫酸肝素）。在一个实例中，眼部结合结构域是透明质酸结合结构域。[0226]当用于本文时，术语“透明质酸结合结构域”或“HA结合结构域”是指结合HA的肽、蛋白、多肽或它们的片段。HA结合结构域可以来源于HA结合蛋白（本领域中也称为“透明质酸粘素hyaladherin”），包括，例如，肿瘤坏死因子-刺激基因6TSG6，淋巴管内皮乙酰透明质酸受体ILYVE-I，乙酰透明质酸和蛋白聚糖连接蛋白（HAPLN1，HAPLN2，HAPLN3，HAPLN4,聚集蛋白聚糖，短蛋白聚糖，神经聚糖，磷酸聚糖，多功能蛋白聚糖，CAB61358，KIA0527，stabiIin-1，stabiIin-2，RHAMM，细菌HA合酶，和胶原蛋白VI。其他HA结合蛋白在本领域中是已知的。示例性的HA结合结构域包括连接模块（linkmodule，G1结构域和富含赖氨酸的寡肽。[0227]“连接模块”（在本领域中也称为“连接结构域”）是约100个氨基酸的结合HA的结构性结构域参见，例如，Yang等人·EMBOJ·，132:286-296;Mahoney等人，J·Bio1·Chem·27625:22764-22771，2001;和Blundell等人.J.Biol.Chem.27849:49261-49270,2003。示例性的非限制性连接模块包括来自下述的那些：TSG6，CD44，LYVE-I，HAPLNl，HAPLN2，HAPLN3，HAPLN4,聚集蛋白聚糖，短蛋白聚糖，神经聚糖，磷酸聚糖，多功能蛋白聚糖，CAB61358，KIA0527，stabilin-l，和stabilin-2连接模块，或它们的变体。作为一个实例，HA结合蛋白TSG6的连接模块包括人TSG6UniProtAccessionNo.P98066的氨基酸残基36-128。变体连接模块结合HA，并且可以例如与野生型或参比连接模块具有至少80%的氨基酸序列同一性（例如，80%，85%，90%，91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，99%，或更高的序列同一性），并且相对于野生型或参比连接模块氨基酸序列，可以包括序列变异，诸如插入、缺失和置换例如，保守氨基酸置换）。[0228]在融合蛋白的情形中，“接头”可以是连接例如，共价连接第一部分例如，抗体例如，抗-VEGF抗体例如，本文所述的任一种抗-VEGF抗体，例如，G6.31AARR与第二部分例如，眼部结合结构域例如，HA结合结构域）的肽或多肽。接头可以包括任意适当长度的氨基酸序列，例如，1，2,3,4,5,6,7,8,9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，19,20,或更多个氨基酸残基。在一些情形中，接头包含约3个，约4个，约5个，约6个，约7个，或约8个残基。在一些情形中，接头包含GGGGSSEQIDNO:61的氨基酸序列。[0229]“水凝胶”用在本文中是指由同型聚合物或共聚物构成的亲水或两亲性聚合物网络，由于存在共价化学交联，所述聚合物网络是不可溶的。交联可以提供网络结构和物理完整性。水凝胶可以表现出与水的热动力性相容性，这允许它们在水性介质中溶胀。[0230]用于本文时，术语“可逆的前药接头”意指这样的部分，其一端通过可逆的键连接在生物活性部分例如，药物，诸如抗-VEGF抗体上并且另一端通过永久性键连接在载体例如，水凝胶上，由此将生物活性部分与载体连接。所述可逆的前药接头是在生理条件下例如，pH7.4的水性缓冲液，37°C非酶促水解降解的，S卩，切割的，半衰期例如在一小时至十二个月的范围内。可逆的连接包括，例如，乌头基aconityls，乙缩醛，酰胺，羧酸酐，酯，亚胺，腙，马来酰胺酸酰胺，原酸酯，磷酰胺，磷酸酯，磷酸甲硅烷基酯，甲硅烷基酯，磺酸酯，芳香氨基甲酸酯，和它们的组合。相反，永久性连接是在生理条件下pH7.4的水性缓冲液，37°C非酶促水解降解的，半衰期超过十二个月。示例性的可逆前药接头记述在，例如，国际专利申请公布号WO2014056923中，其通过引用完全结合在本文中。[0231]术语“清除”用在本文中是指每单位时间从区室（例如，眼睛（例如，玻璃体）清除的物质（例如，抗-VEGF抗体，抗体缀合物，融合蛋白（例如，Fab融合蛋白），或聚合物制剂）的体积。[0232]术语“半衰期”是指在体内（例如，在眼睛（例如，玻璃体）内）或在体外物质（例如，抗-VEGF抗体，抗体缀合物，融合蛋白（例如，Fab融合蛋白），或聚合物制剂浓度减少一半所需要的时间。[0233]II.组合物和方法[0234]本发明提供结合VEGF的新型抗体，和制备与使用所述抗体的方法，例如，用于诊断和治疗应用。本发明还提供包含抗-VEGF抗体包括本文所述的任一种抗-VEGF抗体的组合物，包括抗体缀合物，融合蛋白，和聚合物制剂，以及制备和使用它们的方法，例如，用于诊断和治疗应用。本发明还提供鉴别具有改善的特性例如，提高的结合亲和力、稳定性和或表达的抗体变体的方法。[0235]A.示例性抗-VEGF抗体[0236]在一方面，本发明部分基于特异性结合VEGF的抗体。本发明的抗体例如可用于减少血管发生并且用于治疗或减缓与病理性血管发生相关的病症（例如，眼部病症或细胞增生病症）的进展。本发明的抗体还可用于例如抑制血管通透性和治疗与不需要的血管通透性相关的病症。[0237]在一些情形中，所述抗-VEGF抗体可以包含至少一个、两个、三个、四个、五个或六个选自下述的HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:l的氨基酸序列；⑹HVR-H2，其包含GXiTPX2GGX3X4X5YX6DSVX7X8SEQIDN0:2的氨基酸序列，其中Xi是Ile或His，X2是Ala或Arg，X3是Tyr或Lys，X4是Thr或Glu，X5是Arg，Tyr，Gln，或Glu，X6是Ala是Glu，X7是Lys或Glu，并且X8是Gly或Glu;cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDN0:3的氨基酸序列；（dHVR-L1，其包含RASQXiVSTAVASEQIDN0:4的氨基酸序列，其中乂1是厶8?或Arg;eHVR-L2其包含XiASFLYSSEQIDN0:5的氨基酸序列，其中X1是Ser或Met;和（fHVR-L3,其包含XiqGYGX2PFTSEQIDN0:6的氨基酸序列，其中乂1是6111，六811，或11^，并且乂2是六13，厶811，Gln，或Arg，或上述HVR中的一个或多个和它们的一个或多个变体的组合，所述变体与SEQIDNO:1-6中任一项具有至少约80%的序列同一性（例如，81%，82%，83%，84%，85%，86%，87%，88%，89%，90%，91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，或99%的同一性。[0238]例如，所述抗-VEGF抗体可以包含至少一个、两个、三个、四个、五个或六个选自下述的HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；（bHVR-H2,其包含GITPAGGYTRYADSVKGSEQIDNO:7、GITPAGGYEYYADSVKGSEQIDN0:21或GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDNO:22的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDN0:3的氨基酸序列；⑹HVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和fHVR-L3，其包含QQGYGAPFTSEQIDN0:10或QQGYGNPFTSEQIDN0:23的氨基酸序列，或上述HVR中的一个或多个和它们的一个或多个变体的组合，所述变体与SEQIDNO:1，3,7-10,或21-23中任一项具有至少约80%的序列同一性（例如，81%，82%，83%，84%，85%，86%，87%，88%，89%，90%，91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，或99%的同一性）。[0239]例如，在一些情形中，所述抗-VEGF抗体可以包含至少一个、两个、三个、四个、五个或六个选自下述的HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:l的氨基酸序列；⑹HVR-H2，其包含GITPAGGYTRYADSVKGSEQIDNO:7的氨基酸序列；（cHVR-H3,其包含FVFFLPYAMDYSEQIDN0:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2,其包含SASFLYSSEQID_:9的氨基酸序列；和（〇狀1?-1^3其包含QQGYGAPFTSEQIDNO:10的氨基酸序列，或上述HVR中的一个或多个和它们的一个或多个变体的组合，所述变体与SEQIDNO:1，3,或7-10中任一项具有至少约80%的序列同一性例如，81%，82%，83%，84%，85%，86%，87%，88%，89%，90%，91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，或99%的同一性）。在一个具体的实例中，在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2,其包含GITPAGGYTRYADSVKGSEQIDNO:7的氨基酸序列；（cHVR-H3,其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDNO:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和fHVR-L3，其包含QQGYGAPFTSEQIDNO:10的氨基酸序列。[0240]在一些情形中，任一种前述抗-VEGF抗体可以包含下述重链可变结构域构架FR中的一个、两个、三个或四个：（aFR-Hl，其包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTISSEQIDNO:13的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQAPGKGLEWVASEQIDNO:14的氨基酸序列；cFR-H3,其包含RFTISADTSKNTAYLQMRSLRAEDTAVYYCARSEQIDN0:15的氨基酸序列；和⑹FR-H4，其包含WGQGTLVTVSSSEQIDN0:16的氨基酸序列。[0241]在一些情形中，任一种前述抗-VEGF抗体可以包含下述轻链可变结构域FR中的一个、两个、三个或四个：（aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDN0:17的氨基酸序列；（bFR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDNO:18的氨基酸序列；（cFR-L3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDN0:19的氨基酸序列；和⑹FR-L4,其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。[0242]例如，在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2,其包含GITPAGGYTRYADSVKGSEQIDN0:7的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDN0:9的氨基酸序列；和fHVR-L3,其包含QQGYGAPFTSEQIDN0:10的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个重链可变结构域FR:aFR-Hl，其包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTISSEQIDN0:13的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQAPGKGLEffVASEQIDN0:14的氨基酸序列；（cFR_H3其包含RFTISADTSKNTAYLQMRSLRAEDTAVYYCARSEQIDN0:15的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGTLVTVSSSEQIDN0:16的氨基酸序列。在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个轻链可变结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDN0:17的氨基酸序列；⑹FR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDNO:18的氨基酸序列；（cFR-L3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDN0:19的氨基酸序列；和（dFR-L4,其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含：（a包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的VH结构域和⑹包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。[0243]例如，在一些情形中，所述抗-VEGF抗体可以包含至少一个、两个、三个、四个、五个或六个选自下述的HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:l的氨基酸序列；⑹HVR-H2，其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDN0:22的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDN0:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2,其包含SASFLYSSEQID_:9的氨基酸序列；和（〇^^-1^，其包含QQGYGNPFTSEQIDN0:23的氨基酸序列，或上述HVR中的一个或多个和它们的一个或多个变体的组合，所述变体与SEQIDNO:1，3,8,9,22,或23中任一项具有至少约80%的序列同一性（例如，81%，82%，83%，84%，85%，86%，87%，88%，89%，90%，91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，或99%的同一性）。在一个具体的实例中，在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDNO:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2，其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDN0:22的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDN0:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和fHVR-L3，其包含QQGYGNPFTSEQIDN0:23的氨基酸序列。[0244]在一些情形中，任一种前述抗-VEGF抗体可以包含下述重链可变结构域构架区FR中的一个、两个、三个或四个：（aFR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLELSCAASGFEISSEQIDNO:29或EEQLVEEGGGLVQPGESLRLSCAASGFEISSEQIDN0:51的氨基酸序列；⑹FR-H2,其包含WVRQEPGEGLEWVASEQID:30的氨基酸序列；（：）？1?-!13，其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGELVTVSSSEQIDN0:32的氨基酸序列。[0245]在一些情形中，任一种前述抗-VEGF抗体可以包含下述轻链可变结构域FR中的一个、两个、三个或四个：（aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDN0:17的氨基酸序列；（bFR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDNO:18的氨基酸序列；（cFR-L3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCSEQIDNO:24的氨基酸序列；和⑹FR-L4，其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。[0246]例如，在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2,其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDNO:22的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和（fHVR-L3，其包含QQGYGNPFTSEQIDNO:23的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个重链可变结构域FR:aFR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLELSCAASGFEISSEQIDN0:29的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQEPGEGLEffVASEQIDN0:30的氨基酸序列；（cFR_H3,其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGELVTVSSSEQIDN0:32的氨基酸序列。在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个轻链可变结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDN0:17的氨基酸序列；⑹FR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDNO:18的氨基酸序列；（cFR-L3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCSEQIDN0:24的氨基酸序列；和（dFR-L4,其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含：（a包含SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域和⑹包含SEQIDNO:38的氨基酸序列的VL结构域。[0247]在一些情形中，抗-VEGF抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；（bHVR-H2,其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDN0:22的氨基酸序列；（cHVR-H3,其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2,其包含SASFLYSSEQIDN0:9的氨基酸序列；和fHVR-L3,其包含QQGYGNPFTSEQIDNO:23的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个重链可变结构域FR:aFR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLRLSCAASGFEISSEQIDN0:51的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQEPGEGLEffVASEQIDN0:30的氨基酸序列；（cFR_H3,其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGELVTVSSSEQIDN0:32的氨基酸序列。在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个轻链可变结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDN0:17的氨基酸序列；⑹FR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDNO:18的氨基酸序列；（cFR-L3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCSEQIDN0:24的氨基酸序列；和（dFR-L4,其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含：（a包含SEQIDNO:51的氨基酸序列的VH结构域和⑹包含SEQIDNO:38的氨基酸序列的VL结构域。[0248]例如，在一些情形中，所述抗-VEGF抗体可以包含至少一个、两个、三个、四个、五个或六个选自下述的HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:l的氨基酸序列；⑹HVR-H2，其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDNO:22的氨基酸序列；（cHVR-H3,其包含FVFFLPYAMDYSEQIDN0:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2,其包含SASFLYSSEQID_:9的氨基酸序列；和（〇^^-1^，其包含QQGYGAPFTSEQIDN0:10的氨基酸序列，或上述HVR中的一个或多个和它们的一个或多个变体的组合，所述变体与SEQIDNO:1，3,8-10,或22中任一项具有至少约80%的序列同一性例如，81%，82%，83%，84%，85%，86%，87%，88%，89%，90%，91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，或99%的同一性）。在一个具体的实例中，在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDNO:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2，其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDN0:22的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDN0:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和fHVR-L3，其包含QQGYGAPFTSEQIDN0:10的氨基酸序列。[0249]在一些情形中，任一种前述抗-VEGF抗体可以包含下述重链可变结构域构架区FR中的一个、两个、三个或四个：（aFR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLELSCAASGFEISSEQIDNO:29或EEQLVEEGGGLVQPGESLRLSCAASGFEISSEQIDN0:51的氨基酸序列；⑹FR-H2,其包含WVRQEPGEGLEWVASEQID:30的氨基酸序列；（：）？1?-!13，其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGELVTVSSSEQIDN0:32的氨基酸序列。[0250]在一些情形中，任一种前述抗-VEGF抗体可以包含下述轻链可变结构域FR中的一个、两个、三个或四个：（aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDN0:17、DIQMTQSPESLSASVGDEVTITCSEQIDN0:25SDIQMTQSPSSLSASVGDEVTITCSEQIDN0:26的氨基酸序列；（bFR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDNO:18或WYQQKPGEAPKLLIYSEQIDN0:27的氨基酸序列；（cFR-L3,其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDN0:19或GVPSRFSGSGSGTDFTLTIESLQPEDAATYYCSEQIDN0:28的氨基酸序列；和⑹FR-L4，其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。[0251]例如，在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2,其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDNO:22的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和fHVR-L3，其包含QQGYGAPFTSEQIDNO:10的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个重链可变结构域FR:aFR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLELSCAASGFEISSEQIDN0:29的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQEPGEGLEffVASEQIDN0:30的氨基酸序列；（cFR_H3,其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGELVTVSSSEQIDN0:32的氨基酸序列。在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个轻链可变结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPESLSASVGDEVTITCSEQIDN0:25的氨基酸序列；⑹FR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDNO:18的氨基酸序列；（cFR-L3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDN0:19的氨基酸序列；和（dFR-L4,其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含：（a包含SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域和⑹包含SEQIDNO:34的氨基酸序列的VL结构域。[0252]例如，在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2，其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDN0:22的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和fHVR-L3，其包含QQGYGAPFTSEQIDNO:10的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个重链可变结构域FR:aFR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLELSCAASGFEISSEQIDN0:29的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQEPGEGLEffVASEQIDN0:30的氨基酸序列；（cFR_H3,其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGELVTVSSSEQIDN0:32的氨基酸序列。在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个轻链可变结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDEVTITCSEQIDN0:26的氨基酸序列；⑹FR-L2，其包含WYQQKPGEAPKLLIYSEQIDN0:27的氨基酸序列；（cFR-L3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTIESLQPEDAATYYCSEQIDNO:28的氨基酸序列；和（dFR-L4，其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含：（a包含SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域和⑹包含SEQIDNO:35的氨基酸序列的VL结构域。[0253]例如，在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2,其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDNO:22的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和fHVR-L3，其包含QQGYGAPFTSEQIDNO:10的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个重链可变结构域FR:aFR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLRLSCAASGFEISSEQIDN0:51的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQEPGEGLEffVASEQIDN0:30的氨基酸序列；（cFR_H3,其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGELVTVSSSEQIDN0:32的氨基酸序列。在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个轻链可变结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDEVTITCSEQIDN0:26的氨基酸序列；⑹FR-L2，其包含WYQQKPGEAPKLLIYSEQIDN0:27的氨基酸序列；（cFR-L3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTIESLQPEDAATYYCSEQIDNO:28的氨基酸序列；和（dFR-L4，其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含：（a包含SEQIDNO:51的氨基酸序列的VH结构域和⑹包含SEQIDNO:35的氨基酸序列的VL结构域。[0254]例如，在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2,其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDNO:22的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和fHVR-L3，其包含QQGYGAPFTSEQIDNO:10的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个重链可变结构域FR:aFR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLELSCAASGFEISSEQIDN0:29的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQEPGEGLEffVASEQIDN0:30的氨基酸序列；（cFR_H3,其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGELVTVSSSEQIDN0:32的氨基酸序列。在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个轻链可变结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPESLSASVGDEVTITCSEQIDN0:25的氨基酸序列；⑹FR-L2，其包含WYQQKPGEAPKLLIYSEQIDN0:27的氨基酸序列；（cFR-L3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDN0:19的氨基酸序列；和（dFR-L4,其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含：（a包含SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域和⑹包含SEQIDNO:36的氨基酸序列的VL结构域。[0255]例如，在另外的情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2,其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDNO:22的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和fHVR-L3，其包含QQGYGAPFTSEQIDNO:10的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个重链可变结构域FR:aFR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLELSCAASGFEISSEQIDN0:29的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQEPGEGLEffVASEQIDN0:30的氨基酸序列；（cFR_H3,其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGELVTVSSSEQIDN0:32的氨基酸序列。在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个轻链可变结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDEVTITCSEQIDN0:26的氨基酸序列；⑹FR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDNO:18的氨基酸序列；（cFR-L3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDN0:19的氨基酸序列；和（dFR-L4,其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含：（a包含SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域和⑹包含SEQIDNO:37的氨基酸序列的VL结构域。[0256]在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2，其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDN0:22的氨基酸序列；（cHVR-H3,其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDN0:9的氨基酸序列；和OOHVR-L3,其包含QQGYGAPFTSEQIDNO:10的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个重链可变结构域FR:aFR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLRLSCAASGFEISSEQIDN0:51的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQEPGEGLEffVASEQIDN0:30的氨基酸序列；（cFR_H3,其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGELVTVSSSEQIDN0:32的氨基酸序列。在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个轻链可变结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDEVTITCSEQIDN0:26的氨基酸序列；⑹FR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDNO:18的氨基酸序列；（cFR-L3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDN0:19的氨基酸序列；和（dFR-L4,其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含：（a包含SEQIDNO:51的氨基酸序列的VH结构域和⑹包含SEQIDNO:37的氨基酸序列的VL结构域。[0257]例如，在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2,其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDNO:22的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和fHVR-L3，其包含QQGYGAPFTSEQIDNO:10的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个重链可变结构域FR:aFR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLELSCAASGFEISSEQIDN0:29的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQEPGEGLEffVASEQIDN0:30的氨基酸序列；（cFR_H3,其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGELVTVSSSEQIDN0:32的氨基酸序列。在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个轻链可变结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDN0:17的氨基酸序列；⑹FR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDNO:18的氨基酸序列；（cFR-L3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDN0:19的氨基酸序列；和（dFR-L4,其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含：（a包含SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域和⑹包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。[0258]在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2，其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDN0:22的氨基酸序列；（cHVR-H3,其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDN0:9的氨基酸序列；和OOHVR-L3,其包含QQGYGAPFTSEQIDNO:10的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个重链可变结构域FR:aFR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLRLSCAASGFEISSEQIDN0:51的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQEPGEGLEffVASEQIDN0:30的氨基酸序列；（cFR_H3,其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGELVTVSSSEQIDN0:32的氨基酸序列。在另一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述四个轻链可变结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDN0:17的氨基酸序列；⑹FR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDNO:18的氨基酸序列；（cFR-L3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDN0:19的氨基酸序列；和（dFR-L4,其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含：（a包含SEQIDNO:51的氨基酸序列的VH结构域和⑹包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。[0259]在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含：（a重链可变VH结构域，其包含与SEQIDNOs:11，40或42中任一项的序列具有至少90%的序列同一性例如，至少91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，或99%的序列同一性）的氨基酸序列或SEQIDN0:ll，40或42中任一项的序列，⑹轻链可变VL结构域，其包含与SEQIDN0s:12,41或46中任一项的序列具有至少90%的序列同一性（例如，至少91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，或99%的序列同一性）的氨基酸序列或SEQIDNOs:12,41或46中任一项的序列；或（ca中的VH结构域和⑹中的VL结构域。例如，在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:11的氨基酸序列的VH结构域和含有SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDN0:40的氨基酸序列的VH结构域和含有SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDN0:42的氨基酸序列的VH结构域和包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDN0:42的氨基酸序列的VH结构域和含有SEQIDN0:41的氨基酸序列的VL结构域。在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:11的氨基酸序列的VH结构域和含有SEQIDN0:46的氨基酸序列的VL结构域。[0260]在一些情形中，任一种前述抗-VEGF抗体可以包含下述重链可变结构域构架区FR中的一个、两个、三个或四个：（aFR-Hl，其包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTISSEQIDN0:13的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQAPGKGLEWVASEQIDN0:14或WVRQEPGKGLEffVASEQIDN0:39的氨基酸序列；（cFR_H3,其包含RFTISADTSKNTAYLQMRSLRAEDTAVYYCARSEQIDN0:15的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGTLVTVSSSEQIDN0:16的氨基酸序列。[0261]在一些情形中，任一种前述抗-VEGF抗体可以包含下述轻链可变结构域FR中的一个、两个、三个或四个：（aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDN0:17或DIQMTQSPSSLSASVGDRVTIDCSEQIDN0:45的氨基酸序列；（bFR-L2,其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQID~0:18的氨基酸序列；（^1?-1^3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVATYYCSEQIDN0:54的氨基酸序列；和⑹FR-L4,其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20或FGQGTKVEVKSEQIDN0:55的氨基酸序列。[0262]在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:11的氨基酸序列的VH结构域和含有的氨基酸序列的VL结构域。[0263]在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDN0:33的氨基酸序列的VH结构域，和含有的氨基酸序列的VL结构域。[0264]在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDN0:40的氨基酸序列的VH结构域和含有的氨基酸序列的VL结构域。[0265]在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDN0:42的氨基酸序列的VH结构域和含有的氨基酸序列的VL结构域。[0266]在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:51的氨基酸序列的VH结构域和含有的氨基酸序列的VL结构域。[0267]在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:11的氨基酸序列的VH结构域和含有的氨基酸序列的VL结构域。[0268]在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域和含有的氨基酸序列的VL结构域。[0269]在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDN0:40的氨基酸序列的VH结构域和含有的氨基酸序列的VL结构域。[0270]在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDN0:42的氨基酸序列的VH结构域和含有的氨基酸序列的VL结构域。[0271]在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:51的氨基酸序列的VH结构域和含有的氨基酸序列的VL结构域。例如，在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含：（aVH结构域，其包含与SEQIDN0:11的序列具有至少90%的序列同一性例如，至少91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，或99%的序列同一性）的氨基酸序列或SEQIDNO:11的序列；（bVL结构域，其包含与SEQIDNO:11的序列具有至少90%的序列同一性（例如，至少91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，或99%的序列同一性的氨基酸序列或SEQIDNO:11的序列;或ca中的VH结构域和⑹中的VL结构域。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体可以包含：（aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDN0:1的氨基酸序列；⑹HVR-H2，其包含GITPAGGYTRYADSVKGSEQIDN0:7的氨基酸序列；（cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDN0:3的氨基酸序列；（dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDN0:8的氨基酸序列；（eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDN0:9的氨基酸序列；和OOHVR-L3,其包含QQGYGAPFTSEQIDN0:10的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述重链构架区：（aFR-Hl，其包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTISSEQIDN0:13的氨基酸序列；（bFR-H2,其包含WVRQAPGKGLEffVASEQID~0:14的氨基酸序列；（^1?-!13，其包含RFTISADTSKNTAYLQMRSLRAEDTAVYYCARSEQIDN0:15的氨基酸序列；和⑹FR-H4,其包含WGQGTLVTVSSSEQIDN0:16的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含下述轻链构架区：（aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDN0:17的氨基酸序列；（bFR-L2,其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQID:18的氨基酸序列；（：）？1?-1^3，其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDN0:19的氨基酸序列；和⑹FR-L4,其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含含有下述的结合结构域：（a包含SEQIDNO:11的氨基酸序列的VH结构域和⑹包含SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。在一些情形中，示例性的抗-VEGF为N94A.F83A.N82aR.Y58R。[0272]在一些情形中，所述抗-VEGF抗体包含：（aVH结构域，其包含与SEQIDNO:33或51的序列具有至少90%的序列同一性例如，至少91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，或99%的序列同一性的氨基酸序列或SEQIDN0:33或51的序列；⑹VL结构域，其包含与SEQID勵8:12,34,35,36,37或38中任一项的序列具有至少90%的序列同一性例如，至少91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，或99%的序列同一性的氨基酸序列或SEQIDNOs:12,34,35,36,37或38中任一项的序列；或ca中的VH结构域和⑹中的VL结构域。例如，在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域和含有SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域和含有SEQIDNO:34的氨基酸序列的VL结构域。在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域和含有SEQIDNO:35的氨基酸序列的VL结构域。在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域和含有SEQIDNO:36的氨基酸序列的VL结构域。在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域和含有SEQIDNO:37的氨基酸序列的VL结构域。在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:33的氨基酸序列的VH结构域和含有SEQIDNO:38的氨基酸序列的VL结构域。在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDN0:51的氨基酸序列的VH结构域和含有SEQIDN0:38的氨基酸序列的VL结构域。在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:51的氨基酸序列的VH结构域和含有SEQIDNO:35的氨基酸序列的VL结构域。在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:51的氨基酸序列的VH结构域和含有SEQIDNO:37的氨基酸序列的VL结构域。在一些情形中，所述抗体包含含有SEQIDNO:51的氨基酸序列的VH结构域和含有SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。[0273]在一些情形中，任一种前述抗-VEGF抗体可以包含下述重链可变结构域构架区FR中的一个、两个、三个或四个：FR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLELSCAASGFEISSEQIDNO:29或EEQLVEEGGGLVQPGESLRLSCAASGFEISSEQIDNO:52的氨基酸序列；（bFR-H2，其包含WVRQEPGEGLEWVASEQIDN0:30或WVRQEPGKGLEWVASEQIDN0:39的氨基酸序列；cFR-H3,其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列；和⑹FR-H4，其包含WGQGELVTVSSSEQIDN0:32的氨基酸序列。[0274]在一些情形中，任一种前述抗-VEGF抗体可以包含下述轻链可变结构域FR中的一个、两个、三个或四个：（aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDN0:17、DIQMTQSPESLSASVGDEVTITCSEQIDN0:25SDIQMTQSPSSLSASVGDEVTITCSEQIDN0:26的氨基酸序列；（bFR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDNO:18或WYQQKPGEAPKLLIYSEQIDN0:27的氨基酸序列；（cFR-L3,其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDNO:19^GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCSEQIDN0:24或GVPSRFSGSGSGTDFTLTIESLQPEDAATYYCSEQIDNO:28的氨基酸序列；和⑹FR-L4，其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20的氨基酸序列。[0275]在一些情形中，本发明提供包含下述的抗体：（a含有SEQIDN0:48的氨基酸序列的重链和或⑹含有SEQIDNO:50的氨基酸序列的轻链。在某些实施方案中，所述抗体是以Fab格式表达的G6.31AARR。[0276]在一些情形中，本发明提供包含下述的抗体：（a含有SEQIDN0:49的氨基酸序列的重链和或⑹包含SEQIDNO:50的氨基酸序列的轻链。在某些实施方案中，所述抗体是缺少与抗-人IgG的反应性的G6.31AARR变体。[0277]在另一方面，上述任一实施方案所述的抗-VEGF抗体可以结合下文1-8节中所述的任意特征单个的或组合的特征）：[0278]1.抗体亲和力[0279]在某些实施方案中，本文提供的抗体具有的解离常数（Kd90%的D2O含量，以在20°C开始标记反应。以跨越30秒到1〇〇〇分钟的六个对数型间隔的时间间隔，通过pH降低pH2.5和添加2M氯化胍GdmCl和0.25M三（2-羧基乙基）膦（TCEP淬灭标记反应，然后注射到冷的在线系统（参见，例如，Mayne等人J.Am.Soc.MassSpectrom.2211:1898-1905，2011〇[0625]简言之，淬灭的样品首先在0°C通过固定的胃蛋白酶柱（2.lx30mm，AppliedBiosystems，用于蛋白水解，然后结合到截留柱上，用于脱盐ACQUITYVANGUARD™C8，然后通过反相色谱ACQUITYUPLC®BEHC18，1.7μπι粒度，1.0x50mm分离，并引入到质谱仪Thermo0RBITRAPELITE™，120kHz分辨率mz400用于测量氘含量。色谱移动相与之前所述制备Walters等人J.Am.Soc.MassSpectrom.2312:2132-2139,2012，以pH2.25从而最大化氘回收，通过测量完全氘化的对照平均为82%。突变体和野生型实验交错进行，并且一式三份收集随机化的时间点；通过进行所有样品操作步骤的LEAPvl机器人平台（LeapTechnoIogies，Carrboro，NC使整个过程自动化。该过程产生152种独特的肽，对于野生型和突变体样品一致通过ExMS程序鉴别（Kan等人J.Am.Soc.MassSpectrom.2211:1906-1915,2011，提供约95%的序列覆盖。氘含量的分析包括使用之前所述的常规python脚本Kan等人，同前;Walters等人Proc·Natl·Acad·Sci·USA11047:18898-18903，2013;和Hu等人Proc.Natl.Acad.Sci.USA11019:7684-7689,2013，并且通过斯氏t检验（Student’st-test鉴定野生型与突变体之间氘摄取水平的显著差异，具有的p-值〈0.05,如之前关于HDX-MS实验所述（Leurs等人Anal.Chem.8623:11734-11741，2014。[0626]实施例8:人抗体中的体细胞高突变靶标LC-83和LC-106[0627]在IGKV1-39种系轻链基因中，位置LC-83接近AID热点基序RGYW，其中R是嘌呤，Y是嘧啶，W是A或T1C-F83A突变引起的热稳定的增加可转移给与G6.31来源于相同的种系的其他抗体。因此，评估人抗体中位置LC-83的体细胞突变的频率。另外，在该分析中还包括LC-106〇[0628]使用两种方法来检验来源于IGKVl种系的轻链序列中的体细胞高突变SHM的分布。第一种是核对在一些公众可获得的数据库中可用的4623种独特的人IGKVl轻链序列的体细胞突变（图10A，上图）。第二种是通过从来源于超过1000个个体人淋巴组织的RNA扩增IGKVl序列然后进行高保真单分子实时测序SMRT和SHM校对。尽管两个数据组来源不同，但是观察到非常相似的体细胞突变分布（图10A-10C1C-83是VL区段中最常突变的位置之一;在两个数据组中，全部IGKVl序列中分别有7%和19%在LC-83携带突变。有趣的是，位置LC-106在IGKVl序列中也频繁突变分别为9%和20%，并且最常见的突变是缬氨酸。G6VL最接近的种系基因区段是IGKV1-39和IGJ1。因此，检验IGKV1.39种系来源的抗体，其揭示了在LC-F83的体细胞突变主要导致更小的侧链包括丝氨酸、缬氨酸和亮氨酸）（图10A-10C。没有观察到IGKVl.39的抗体中的丙氨酸置换，这可能是由于丙氨酸突变体需要在LC-F83密码子中置换两个碱基，这极少发生。[0629]然后，产生G6.31Fab变体，其携带位置LC-83和LC-106最常见的体细胞突变，并且确定它们对抗原结合和热稳定性的作用（图10D。所有单个突变变体使Tm增加4.8°C至6°C，这可能是通过减小Fab弯角和增加VL-CL界面面积导致的。一致地，双重突变LC-F83ALC-I106V没有导致1„显著增加。不希望受到理论束缚，同时减小两个侧链的尺寸将在通常由LC-F83或LC-1106占据的疏水洞中留下空隙，并且减小VL针对CL稳定包裹的能力。LC-83突变对VEGF亲和力的影响是混合的。LC-F83V导致亲和力增加3倍，与LC-F83A相似，而突变LC-F83S和LC-I106V几乎不表现亲和力的增加。LC-83突变对抗原亲和力的影响可以是环境依赖性的。将LC-F83A突变引入到与G6.31来源于相同的种系的另一种抗体，观察到相似的热稳定性和亲和力增加。另外，已经报道LC-F83S突变增加抗-雌二醇抗体的亲和力。[0630]综上所述，在人抗体中，LC-83和LC-106频繁突变。给出这两个位置对亲和力和稳定性的影响，对整个Fab结构域动力学的优化是可以在体内抗体亲和性成熟过程中高度使用的分子机制。[0631]材料和方法[0632]从多种公众可获得的来源获得人轻链序列:Abysis可从bioinf.org.ukabysis网址获得），Kabat数据库（Martin，Proteins251:130-1331996，IMGT数据库Lefranc，MolecularBiotechnology401:101-1112008，GenBankBenson等人，NucleicAcidsResearch43:D30_352015，和蛋白数据库（Berman等人，NucleicAcidsResearch28I:235-2422000。去掉重复的序列，并且使用IGBlastYe等人，NucleicAcidsResearch41:W34-402013将最接近的种系基因分配各自的V-片段。从数据组中去掉分配为小鼠或大鼠种系的序列。序列按照Kabat编号（参见，例如，Wu等人，J.Exp.Med.1322:211-2501970，并且鉴别V-片段构架中的体细胞突变。在本分析中不考虑在HVR区中的突变如通过Kabat编号方案定义的）。[0633]人抗体序列的第二个来源是来自从源自1088名个体的人脾、扁桃体、骨髓和外周血淋巴细胞得到的商购RNAClonetech和Amsbio。首先使用.SMARTER⑧RACEcDNA扩增试剂盒（Clonetech将RNA转录成cDNA。使用5’RACEAdvantage2PCR试剂盒，Clonetech，用在IGKC区的5’区退火的常规引物（5’-CATCAGATGGCGGGAAGATGAAGACAGATGGTGC-3’（SEQIDNO:56，扩增IGKV-特异性DNA，而在第二个PCR步骤，使用引物：正向：5’-GCCATCCAGATGACCCAGTCTCC-3’（SEQIDN0:57和反向：5’-GGCTGCACCATCTGTCTTC-3’（SEQIDN0:58，富集IGKVl片段。将PCR产物凝胶纯化，并且使用PacificBioscienceRSIIEAGenomicServices测序。总共获得994.8Mbp。使用PacificBioscience’sSMRTAnalysis2.3软件包产生每个读数的共有序列。使用VDJFastaGlanville等人Proc.Natl.Acad.Sci.USA10648:20216-20221进行共有序列的种系注释。序列按照Kabat编号，并且鉴别在V-片段的构架中的体细胞突变。总计，19034个序列注释为IGKVl，其中3796各包含至少三个构架区和两个HVR，并且包括其用来产生SHM分布。[0634]实施例9:鉴别G6.31的表面电荷变体[0635]为了分析可能用于减低G6.31的pi的突变，使用来自G6晶体结构的结构信息，鉴别可变结构域内表面暴露的位置。选择基于NNKwalkVH和VL文库的VEGF淘选实施例2其中的谷氨酸置换表现出1或更大的富集率的位置，以使用BIACORE®_T200系统通过单循环动力学分析检测其对VEGF结合亲和力的影响和检测其对热稳定性DSF的影响表3A。如上述产生包含置换为谷氨酸、以及其他带电荷残基例如，精氨酸、赖氨酸）的突变体变体，表达并纯化见[0636]实施例2，材料和方法）。在一些情形中，注意到，与表4的结果相比，表3A中关于一些变体列出的整体Kd较弱，这是由于单循环动力学分析表3A与多循环动力学分析表4之间的拟合差异。表3B显示所示的变体的产量、单体百分数单体和洗脱时间。[0637]表3A:表面暴露的电荷变体的表征[0640]表3B:表面暴露的电荷变体的纯化参数[0644]如表3A所示，鉴定了一些表面暴露的电荷变体，其与G6.31相比，具有相当的或提供的针对VEGF的结合亲和力。[0645]实施例10:具有提高的针对VEGF的结合亲和力和提高的稳定性的组合变体的产生和表征[0646]A.产生具有提高的针对VEGF的结合亲和力和提高的稳定性的变体[0647]G6.31在HVR-L3N94-P95中包含自我切割位点，所述位点可能影响其稳定性。将实施例2所述的单个变体组合参见，例如，表2组合起来，以鉴别具有提高的结合亲和力和提高的稳定性的克隆。四个突变具体集中在:LC-F83A提供提高的热稳定性和亲和力），LC-N94A去除自我切割位点），HC-Y58R提高亲和力）和HC-N82aR提高亲和力）。还通过多循环动力学测量检测了在位置LC-N94处的一些旨在去除自我切割位点的其他的置换，检测它们对与VEGF的结合亲和力的影响，以及通过DSF检测其稳定性表4。去除自我切割位点总是减少片段化，如通过使用非还原毛细管电泳十二烷基硫酸钠CE-SDS确定的低分子量实体百分数所测定的（图12。[0648]表4:自切割位点变体的亲和力和热稳定性[0650]LC-F83A、LC-N94A、HC-Y58R和HC-N82aR变体组合成单个克隆“Y58R·N94A·N82aR·F83A”，还称作“G6·31AARR”）导致显著增加的针对VEGF的结合亲和力Kd=80pM，与G6·31相比提高6·6倍。与G6·31相比，Y58R·N94A·N82aR·F83A也具有显著提高的热稳定性，Tm升高4.8°C表5。Y58R.N94A.N82aR.F83A的VH结构域的氨基酸序列显示在SEQIDNO:11中，VL结构域的氨基酸序列显示在SEQIDNO:12中。[0651]表5:与G6.31相比，组合变体Y58R.N94A.N82aR.F83A具有提高的针对VEGF的结合亲和力和提高的稳定性[0653]B.产生具有改变的pI的表面暴露的带电荷变体[0654]为了产生具有较低pi的变体，向G6.31的序列中引入一些谷氨酸置换。基于单个表面暴露的带电荷变体突变数据表3A-3B，选择对VEGF结合不具有大的负面影响的变体进一步改造。在选择突变时还考虑表达水平通过产量测定和减少的聚集通过高％单体测定）。利用APBSBaker等人ProcNatl.Acad.Sci.USA9818:10037-100412001计算G6.31的等电表面。将所选的谷氨酸突变绘制到该等电表面上，并且选择谷氨酸突变的组合，其（i避免空间上位置接近在一起的突变，和（ii其有利于位于强正电荷片内的突变。产生两个重链组合变体具有和不具有R19E和五个轻链组合变体进行进一步表征表6。所有的轻链组合变体包含LC-N94A突变，以去除自我切割位点，并且包含LC-F83A突变，以提高抗体的热稳定性。变体中的一些表现出提高的针对VEGF的亲和力（参见表6、表7和表9。与G6.31相比，例如，HCLC2和HCLC5表现出提高的亲和力和显著减小的pI与G6.31的pI8.9相比，分别为Pl5.3和5.6参见表7和表9。[0655]表6:组合表面暴露的电荷变体[0657]表7:组合表面暴露电荷变体针对VEGF的结合动力学[0659]另外，产生一些其他的包含所选的表面暴露的谷氨酸置换的组合变体和提高亲和力和或稳定性的单一变体表8。[0660]表8:另外的组合变体的结合动力学[0662]表9显示所选的组合变体的结合亲和力、稳定性和pi数据的总结。抗体的pi使用内部程序并通过运行带有标准Pl对照的等电聚焦（IEF凝胶计算。表10显示这些抗体相应的VH和VL氨基酸序列。表11显示这些抗体的VLHVR氨基酸序列。表12显示这些抗体的VHHVR氨基酸序列。[0663]表9:所选的组合变体的总结[0665]表10:表9的抗体的VH和VL氨基酸序列[0667]表11:表9的抗体的VLHVR序列[0670]表12:表9的抗体的VHHVR序列[0672]以上列出的任一种抗体的Fab重链的上部铰链区，例如，G6.31AARR，可以突变，以去除参考文献中报道的与抗-IgGl铰链自身抗体的反应性。参见，例如，Brezski等人，J.Immunol·181:3183-3192，2008和Brezski等人，mAbs2:3,212-220,2010。由此，G6.31AARR重链的C-端氨基酸可以是T野生型WT版本或L变体版本，其缺少与抗-人IgGFab的反应性）。野生型G6.31AARR的全长重链氨基酸序列是SEQIDNO:48。缺少与抗-人IgGFab的反应性的变体版本的全长重链氨基酸序列是SEQIDNO:49A6.31AARR和缺少与抗-人IgGFab的反应性的变体版本的全长轻链氨基酸序列为SEQIDNO:50。[0673]总之，通过深度扫描诱变鉴别的变体的组合产生具有改善的特性的抗体。在一些情形中，与G6.31相比，所述抗体具有提高的针对VEGF的结合亲和力和提高的稳定性通过显著增加的Tm判断的）。变体中的一些例如，抗体HCcombo，HCLCl，HCLC2，HCLC3，HCLC4，和HCLC5具有提高的针对VEGF的结合亲和力和显著减小的pi二者。对于具有减小的pi的变体，将重链中的R19E突变回复成位置19的初始精氨酸（例如，在R19HCcombo，R19HCLC2，R19HCLC4,和R19HCLC5中），产生具有进一步的亲和力提高和增加的Tm增加约2.2-2.8°C的变体。[0674]实施例11:在兔中玻璃体内施用后G6.31变体的眼部和系统药物代谢动力学[0675]为了评估G6.31变体的体内药物代谢动力学（PK特征，使用新西兰白（NewZealandWhite，NZW兔进行下述实验。对两种不同的G6.31变体，SPG6.31AAEELC-N94A·LC-F83A·HC-A40E·HC-T57E和G6·3IAARRY58R·N94A·N82aR·F83A，以及母本G6.31WT确定眼部半衰期。在每种情形中，将每种抗体的Fab以lOmgmL的浓度配制在PBS中。将50yL0.5mg玻璃体内注射到麻醉的兔中。兔分组，每组10只）剂量给药一次眼。组1用G6.3IAAEE剂量给药，组2用G6.3IWT剂量给药，组3用G6.3IAARR剂量给药。在剂量给药之前、剂量给药后2小时、6小时、1天、2天、4天、8天、15天和21天采集组织玻璃体液，眼房水和血清）。使用下文所述的总FabELISA测定样品的抗-VEGF水平。[0676]每种变体和WT在玻璃体液和眼房水中每一种中的药物代谢动力学分析结果显示在图IIA中。结果显示，在玻璃体液和眼房水二者中，G6.31AAEE和G6.31AARR的PK基本上与WTG6.31的PK相同。计算玻璃体和房水半衰期，并且在下表13中显示这些结果。变体G6.31Fab的半衰期与WT相似，并且还与在参考文献中报道的Fab眼部半衰期一致。[0677]表13:G6.31变体和G6.31WT的半衰期[0679]通过测量血清中的抗-VEGF水平，评估玻璃体内注射后对Fab的系统暴露。分析血清样品的抗-VEGF。结果显示在图IlB中。计算清除率mlkg天），并在下表14中显示这些结果。还测定血清的抗-治疗性抗体ATA。在所有动物中自第14天起存在ΑΤΑ。[0680]表14Χ6·31变体和G6·31WT的清除率[0682]如表14所述的结果所示，如果所有三种Fab具有相同的生物利用度，那么G6.31AARR具有最快的清除率，这表示与G6.31WT和G6.31AAEE相比较低的系统暴露。所述较低的系统暴露可能为G6.31AARR导致比G6.31WT和GG6.31ΑΑΕΕ更好的安全性特性。[0683]材料和方法[0684]A·总FabELISA[0685]将ELISA平板在4°C用AffiniPureFab’）2片段山羊抗-人IgG包被过夜。然后将平板清洗3次，然后用封闭缓冲液PBSpH7.4,0.5%BSA，和15ppmPR0CLIN™温育。清洗3次后，将从用WTG6.31、G6.31AARR或G6.31AAEE剂量给药的NZW兔采集的房水和玻璃体样品在该平板中在室温轻摇培育2小时。然后，在室温用Fab’）2过氧化物酶缀合的山羊抗-人IgG检测与包被抗体结合的G6.31分子1小时。清洗3次后，向平板中加入TMBE-1000底物溶液持续30分钟，并且用IMH3PO4终止反应。在450620nm记录信号。[0686]G6.31分子的浓度利用标准曲线确定。[0687]实施例12:VEGF-诱导的HUVEC迀移测定[0688]检测G6.31变体抑制VEGF-诱导的HUVEC迀移的能力。使用Falcon24-多孔插板系统BDBiosciencescat.351184，进行表15所示的变体的HUVEC迀移测定。将插板用8mgml小鼠层粘连蛋白（LifeTechnologies23017-015预先包被过夜。将HUVEC饥饿过夜，收集，并且重悬在测定培养基EBM-2，0.1%BSA中。向上室加入细胞5xl04，向下室加入20ngmLVEGF，以在存在或不存在不同剂量水平的封闭抗体的条件下刺激迀移16小时。在固定并从上面膜上刮下后，将在底面上的细胞用甲醇固定，并用SYTOX⑧greeηLifeTechnologiesS7020染色。使用倒置荧光显微镜获得图像，并且使用ImageJ软件分析细胞数目。[0689]图13显示在不同Fab浓度下，与母本G6.31相比，G6.31LC-N94A对VEGF-诱导的HUVEC迀移的抑制的图。从图13可以看出，在VEGF-诱导的HUVEC迀移测定中，单一LC-N94A突变的效力明显低于WTG6.31母本，低约五倍。如表15所示，在该测定中，双重突变体LC-N94A.LC-F83A的效力也比WTG6.31母本低约五倍。四重突变体0湘44丄：冲834.»：-A40E.HC-T57EG6.31AAEE恢复并且效力略微提高（表15。令人惊讶地，四重突变体N94A.F83A.N82aR.Y58R¢6·31AARR具有明显提高的效力，比WTG6·31母本提高约两倍表15〇[0690]表15.在HUVEC迀移测定中通过IC50确定的G6.31变体的细胞效力[0693]实施例13:透明质酸HA与G6.31AARR和其他抗体的缀合[0694]目前用于治疗与病理性血管发生相关的眼部病症（例如，AMD例如，湿性AMD，DME，DR，或RV0的方法通常涉及玻璃体内注射VEGF拮抗剂例如，抗-VEGFFab雷珠单抗）。由于抗-VEGFFab的作用位点是在眼后视网膜处，并且还由于Fab可能在眼中具有相对短的停留时间，因此，通常通过相对频繁的经由玻璃体内注射剂量给药例如，Q4W获得抗-VEGFFab的最大患者受益。对于眼部病症，抗-VEGF抗体或抗体片段例如，Fab的长久作用递送可能是需要的，至少部分降低剂量给药频率，这导致改善的患者便利性和依从性。在本实施例中，评价了在G6.31变体G6.31AARR上缀合线性、不交联的透明质酸HA的效果。分析了缀合物的分子特性、药物代谢动力学参数例如，玻璃体半衰期和清除率）、热动力学稳定性和VEGF抑制性效力。[0695]使用模式兔FabrabFab;Shatz等人Mo1·Pharmaceutics2016;PubMedidentifierPMID27244474作为该分析的一部分。蛋白治疗剂递送技术的开发通常涉及检测相关的动物模型，以证明体内用途。在眼药物代谢动力学的早期研究中常用兔模型。不幸的是，大部分人抗体和人源化抗体在兔中是免疫原性的，这妨碍估测使用长久作用递送技术的关键药物代谢动力学参数。为了解决这一问题，开发了替代化合物，其为可用于在兔模型中评价递送技术的物种-匹配的兔Fab“rabFab”）。此处所述的rabFab来源于与人磷酸c-Met结合的兔单克隆抗体。制备兔抗体包括兔单克隆抗体的方法在本领域中是公知的。参见，例如，美国专利号5，675，063和或7，429，487。与人磷酸c-Met结合的示例性的兔单克隆抗体可从AbeamCambridge，MA，USA商购得到，产品编号为ab68141。[0696]在本实验中，将G6.31AARR或rabFabFab-C分子与不同重均摩尔质量Mw的线性、不交联的HA缀合，所述重均摩尔质量包括40kDaHA40K-，100kDaHA100K-，200kDaHA200K-和600kDaHA600K-Aab-C分子是这样的Fab分子:表达其使序列在第一个铰链半胱氨酸处截短，直接从表达产生具有一个游离的半胱氨酸的Fab。还可以使用Fab’分子，其为通过消化全长单克隆抗体产生的具有一个有利的半胱氨酸的Fab分子。对于本实施例中所述的HA缀合物，Fab-C分子共价连接在HA的葡糖醛酸糖单位上的羧酸基团上。在合成的第一步，将HA上一定百分数的这些酸基团转化为马来酰亚胺（通常2-10%的酸基团被转化）。然后，通过Fab-C分子上的游离半胱氨酸将Fab-C分子缀合到马来酰亚胺基团上。然而，可以使用缀合化学的略微修饰，以将Fab分子或其他抗体形式缀合到HA上。[0697]利用大小排阻色谱法（SEC、折射率RI多角度光散射MALS和准弹性光散射quasi-elasticlightscattering，QELS的组合还称为SEC-RI-MALS-QELS测定所选的HA-Fab缀合物的HAMw、缀合物Mw、百分数Fab负载定义为被共价连接的Fab分子占据的HA羧酸基团的百分数）、流体动力学半径Rh、游离Fab定义为在溶液中游离的且不与HA分子共价连接的Fab分子的百分数和蛋白质量分数定义为蛋白质量蛋白重量+HA重量）（表16。图14显示评估HA40K-rabFab，HA200K-rabFab和HA600K-rabFab的重均摩尔质量Mw的示例性SEC-RI-MALS-QELS的结果注意在图14中没有显示QELS数据）。[0698]表16.通过SEC-RI-MALS-QELS评估的所选HA-Fab缀合物的特性[0701]*近似Rh值[0702]**在兔PK研究中研究的样品（参见，例如，图16和下文）[0703]对于眼部病症诸如AMD的治疗，可以需要长久的眼部半衰期和短的系统半衰期，例如，以最小化系统抗-VEGF暴露。HA从系统循环的清除由携带透明质酸酶的肝细胞调节。之前的报道表明对天然HA的透明质酸酶活性包括通过葡糖醛酸羧酸基团的识别。由于这些羧酸基团被修饰来连接Fab-C分子，测定缀合的HA被透明质酸酶酶解消化的能力。HA-缀合的rabFab保留对透明质酸酶-2HYAL2消化的酶敏感性，如通过HYAL2-温育的HA和HA100K-rabFab的SEC-MALS分析所评估的（图15。[0704]确定Fab片段的HA缀合在玻璃体内施用后在兔玻璃体内对眼部药物代谢动力学参数例如，半衰期和清除率）的影响。与未缀合的rabFab或雷珠单抗相比，rabFab与HA100K的缀合HA100K-I125-rabFab导致清除率的显著减小和玻璃体半衰期的显著增加（图16和表17。由历史数据可知，与未缀合的rabFab相比，HA100K-缀合的rabFab的玻璃体半衰期t12具有约四倍的增加分别地，11.9天相对于3.2天）（图16和表17。表17还显示rabFab和HA100K-I125-rabFab的Rh。这些数据表明HA缀合增加Fab的流体动力学半径，并且导致减慢的玻璃体清除率和增加的玻璃体半衰期。[0705]表17.在玻璃体内施用后rabFab和HA100K-125I_rabFab自兔玻璃体的清除率[0707]关于rabFab、缀合到20KDa聚乙二醇（PEG上的rabFabrabFab-20kDaPEG和缀合到40kDaPEG上的rabFabrabFab-40kDaPEG的流体动力学尺寸例如，流体动力学半径）和玻璃体停留时间（例如，半衰期之间的线性相关性以及历史数据Shatz等人，同前连通上文关于HAlOOK-rabFab所述的数据允许预测与HA100K或HA200K缀合的G6.31和与HA300K缀合的G6.31的玻璃体半衰期（图17。HA100K-G6.31具有约11天的预测玻璃体半衰期，而HA200K-G6.31具有甚至更大的约17天的预测玻璃体半衰期（图17。说3001-66.31具有约19天的预测玻璃体半衰期（图17。这些结果提供的进一步的证据表明G6.31AARR或本文所述的其他G6.31变体与线性、不交联HA的缀合导致在玻璃体内注射后增加的眼部停留时间（例如，半衰期和减小的清除率。[0708]还评价了HA缀合对Fab热动力学稳定性的影响（表18dabFab与三种不同摩尔质量的HA的共价连接没有改变Fab的热动力学稳定性，如通过与母本Fab相比缀合物具有相似的Tm起始和峰值Tm证明的（表18。[0709]表18.Fab与HA的缀合没有显著改变Fab的热动力学稳定性[0711]最后，测定HA缀合对G6.31AARR的VEGF抑制效力的影响。令人惊讶的，在关于VEGF抑制的PKDR测定中比较时，G6.31AARR与线性、不交联HA的缀合导致比母本Fab明显提高的效力（表19。表19中的qAC50值显示在活性测定格式中引发50%响应所需要的浓度。qAC50值与IC50值等价。与未缀合的目标Fab相比，HA-缀合的G6.31AARR在效力上具有约7倍的增加表19。因此，G6.31AARR和本文所述的其他G6.31变体的缀合可以用于改善玻璃体药物代谢动力学参数包括半衰期和清除率以及VEGF抑制效力二者。[0712]表19·G6·3IAARR与HA的缀合导致提高的VEGF抑制效力[0714]基于前述实验数据，HA-缀合的G6.31AARR分子具有显著改善的用于治疗眼部病症包括AMD例如，湿性AMD，DME，DR，和RV0的特征。这些改善的特征包括提高的效力和由于提高的玻璃体停留时间较不频繁剂量给药的机会。[0715]材料和方法[0716]A.合成马来酰亚胺-官能化的HAHA-mal[0717]从LifecoreBiomedical获得不同摩尔质量的线性、不交联HA聚合物。利用与偶联剂氯化4-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基）-4-甲基吗啉（4-4,6-1比6他《7-1，3,5-triazin-2-yl-4-methylmorpholiniumchloride，DMTMM和接头N-2-氨基乙基）马来酰亚胺三氟乙酸盐（AEM的水性反应，用马来酰亚胺基团修饰HA。将HA以2.5mgmL溶解在IOOmM2-N-吗啉代）乙磺酸pH5.5中，并且在搅拌下向该溶液中加入1.5摩尔过量的DMTMM和3.75摩尔过量的AEM摩尔过量基于HA中羧酸的摩尔量计算）。将溶液加热至70°C持续2小时。[0718]通过脱盐程序从反应中去除过量的AEM和DMI¥M。将HiPrep™2610脱盐柱固装在纯化系统中，并用IOmM乙酸钠pH4.0150mMNaCl平衡。将反应液不掺水neat注入到柱中，并按照在302nm的吸光度收集HA-mal峰，并且使用离心超滤装置浓缩到大于5mgmL。使用UV-可见分光光度计以302nm的吸光度测量HA-mal储液中的马来酰亚胺浓度，并且利用多角度光散射SEC-MALS通过大小排阻色谱法测定每个HA链马来酰亚胺基团的摩尔比例。[0719]B.Fab-C与HA-mal的缀合[0720]将Fab-C溶液的pH用IM磷酸pH6.5调节至6.5，至磷酸终浓度为50mM。将乙二胺四乙酸EDTA掺加到溶液中至终浓度为2.5mM。搅拌Fab-C溶液，并向其中加入在反应缓冲液IOmM磷酸，150mMNaCl，2.5mMEDTApH6.5中稀释的HA-mal。在终反应中，将化学计量设置为每摩尔马来酰亚胺1.2摩尔Fab-C，并且设置体积以给出lmgmL的终蛋白浓度。在室温搅拌下进行缀合反应。在3小时，以每摩尔马来酰亚胺2摩尔加入巯基乙醇，从而封端未反应的马来酰亚胺基团。在加入巯基乙醇后30分钟，将反应液用IOmM磷酸pH6.5稀释至少于50mMNaCl，以进行纯化。[0721]使用阴离子交换层析进行纯化，以将游离的Fab-C和Fab二聚体与缀合物分离。将HiTrap™QFF5mL柱固装在纯化系统上，并用IOmMHisHClpH5.5平衡。将稀释的反应液流过柱，捕获HA-Fab缀合物，并且同时洗脱游离的Fab-C而二聚体。在用IOmMHisHClpH5.5IOOmMNaCl洗涤后，通过至IOmMHisHClpH5.5500mMNaCl的不连续梯度stepgradient洗脱所述缀合物。将洗脱的缀合物汇集并用IOmMHisHClpH5.5稀释至IJlOmMHisHClpH5.5150mMNaCl的最终组合物。通过离心超滤浓缩配制的缀合物。[0722]C.HA-Fab缀合物的分析[0723]通过在具有内部串联（in-line的WyattOptilabT_rEXRI检测器和WyattHELEOS-IIMALS检测器的Agilent1200高效液相色谱HPLC系统上组合大小排阻色谱法SEC与折射率RI多角度光散射MALS和准弹性光散射QELS还称为SEC-RI-MALS-QELS，测定残余的游离Fab含量、总缀合物摩尔质量和蛋白质量分数。使用TosohG6000PWxl柱以PBSpH7.4作为运行缓冲液进行分析。使用BSA对照以标准化MALS检测器并校正检测器之间的谱带增宽bandbroadening。通过积分对应Fab和HA-Fab缀合物的UVA280峰测量游离Fab含量。缀合物摩尔质量视为缀合物峰的重均分子量Mw还称作重均摩尔质量）。蛋白质量分数利用差示RIdRI和UVA28q信号使用蛋白缀合物分析计算。[0724]D.HA-rabFab缀合物的动态扫描量热法DSC研究[0725]在IOmMHisHClpH5.5150mMNaCl中以0.5mgmL基于蛋白提供的浓度）制备下述的溶液:rabFab，与具有39kDa的重均摩尔质量Mw的HA缀合的rabFabHA39K_rabFab，与具有IOOkDa的Mw的HA缀合的rabFabHAlOOK-rabFab和与具有300kDa的Mw的HA缀合的rabFabHA300K-rabFab。在VP-DSC微量热计MicroCal，Inc.上从15至105°C以l°Cmin的升温速率进行DSC研究。从每个样品扫描中减去单独的缓冲液的参比扫描。使用配套的ORIGIN软件套件评价解链温度Tm和Tm起始。[0726]E.磷酸化的KDRpKDR受体激活测定[0727]将经改造过表达KDR的CHO细胞KDR-CH0细胞;参见Bingtruy-Tournaire等人EMBOJ.197:1525-1533，2000和Benzinger等人BBABiomembranes1466:71-78,2000,它们通过引用完全结合在本文中）在8^1细胞涂板培养基（50:50高葡萄糖01^1此111’8?-12，0.2%BSA，0.25%diafiltered胎牛血清FBS，25mMHEPES，和2mML-glutamax中以IxlO4个细胞孔涂布在平底96孔组织培养板上。将细胞在37°C培育过夜。平行地，将NUNODMAXIS〇RB:®384孔ELISA平板（ThermoCatalogNo.439454用25μ1稀释在PBS中的抗-gD抗体^Genentech包被，并且在4°C温育过夜。[0728]次日，在细胞刺激前2小时，轻敲组织培养板并夯实，将培养基更换为40μ1无血清细胞刺激培养基50:50高葡萄糖DMEMHam’sF-12,0.5%BSA，和25mMHEPES并在37°C培育2小时。在细胞刺激培养基中制备G6.31AARR或HA100K-G6.31AARR的三倍连续稀释液。还在细胞刺激培养基中制备人VEGF165的稀释液（lOOngml。使用深孔封闭平板，将来自G6.31AARR或HA100K-G6.31AARR连续稀释液的样品与稀释的VEGF样品混合并在37°C温育1小时。向每个细胞孔中加入40yL得到的混合物至总培养体积为80yL。还制备仅具有VEGF的孔或不添加VEGF的孔作为对照。将细胞在37°C培育15分钟。轻敲培养基并夯实，并加入25yL冰冷的细胞裂解缓冲液（150mMNaCl，50mMHEPES，0.5%TRIT0N™X-100，IxHALT®蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物ThermoCatalogNo.78444,使用之前立即由IOOx储液添加），5mMEDTA。在进行ELISA之前，将细胞在冰上裂解15分钟。[0729]将抗-gD包被的ELISA平板的孔用洗涤缓冲液具有0.05%TWEEN®20的PBS，pH7·4洗涤3次。将孔用80μ1封闭缓冲液具有0·5%BSARDSystems，CatalogNo·#DY995的PBS在室温封闭I小时。然后，将孔用洗涤缓冲液洗涤三次。接着，向每个孔中加入25μ1细胞裂解物孔，并在室温温育2小时，然后用洗涤缓冲液将孔洗涤四次。向每个孔中加入25μ1在测定缓冲液具有〇.5%BSA的I3BS;与封闭缓冲液相同）中的1:2000稀释的抗-磷酸酪氨酸Clone4G10生物素-缀合的抗体0.5ygmlMilliporeCatalogNo.16-103，并将得到的混合物在室温温育2小时，然后用洗涤缓冲液洗涤三次。向每个孔中加入25μ1在测定缓冲液中的1:1〇,〇〇〇稀释的辣根过氧化物酶HRP-链霉抗生物素蛋白（GEHealthCareUK;CatalogNo.RPN440IV并在室温温育30分钟，然后再用洗涤缓冲液洗涤三次。然后向每个孔中加入25μ1TMB，并且允许显色20分钟，然后加入25的H2SO4以终止反应。最后，在平板读数仪上在450620nm读取孔的光学密度。[0730]F.HAlΟΟΚ-rabFab的透明质酸酶消化[0731]为了证实多至10%基于HA上可用的酸基团表示的百分数）的Fab缀合不改变HA-Fab缀合物的透明质酸酶敏感性，将具有IOOkDa的Mw的HAHA100K和缀合到HA100K上的rabFabHAlOOK-rabFab以200ygmLHA调节HAlOOK-rabFab浓度以关于HA骨架得到200μgmL的浓度与4ygmL透明质酸酶-2在IOmM乙酸钠，pH4·5中温育。将样品在37。。温育并以30分钟的时间间隔立即注入到SEC-RI-MALS上进行Mw分析，如上文所述。[0732]G.PK研究以测定HA-Fab自兔玻璃体清除的速率[0733]如下文所述，将HAlOOK-rabFab在兔玻璃体中的眼部药物代谢动力学特性与rabFab的历史数据相比较。[0734]在剂量给药前一天，将HAlOOK-rabFab用125I标记。为了制备剂量给药制剂，使用Mi11iporeAMICON®30K离心过滤管，将适当量的HAlOOK-rabFab更换为Tris碘化缓冲液25mMTrisHC1，0.4MNaCl，pH7.5。将Pierce预先包被的碘化管用Tris碘化缓冲液润湿并且倒出。向管底加入适当量的Tris碘化缓冲液，然后加入适当量的Na1251PerkinElmer。每30秒旋动，允许碘活化15分钟。向NUNC®微量粒型中加入适当体积的测试样品、Tris碘化缓冲液和活化的碘，并且通过轻轻摇动混合约1至5分钟。通过加入清除缓冲液酪氨酸，2mgmLTris缓冲液终止碘化反应，并且将制剂混合并温育5分钟，其中在第1分钟和第4分钟轻拍混合。对于蛋白纯化，通过用PBS以6,OOORPM离心15分钟准备AMICON®30K离心过滤管。将NTOOf管内容物加入到AMICON⑧30K离心过滤管中，并在I3BS中洗涤四次，以得到大约400yL最终放射性标记的测试物品体积。确定每种测试物品的放射性、蛋白浓度和放射化学纯度。使用移液管，将AMICON®管的内容物转移到NUNC®管中，并且使制剂至约10mgmL的终浓度。[0735]将拟1001-抑匕?13-1251玻璃体内注射50^只眼）到新西兰白兔的眼中（11=24只眼）。为了玻璃体内注射，用异氟烷将兔镇静麻醉至生效，并且以侧卧位放置。向两只眼睛应用托卩比卡胺（Tropicamide眼用液（两滴）和2.5%盐酸苯福林phenylephrineHC1—滴）。在制备和剂量给药之前，立即向每只眼睛应用局部丙美卡因（proparacaine。将结膜穹窿部用1:50的聚维酮碘betadine溶液稀释液冲洗，并且眼睑边缘用未稀释的5%聚维酮碘溶液擦洗。颞上球结膜用未稀释的聚维酮碘溶液擦洗。使用Jameson测径器在颞上球结膜上边缘后部1.5至2.Omm标记一个点。用左手使用结膜钳子固定眼球位置，同时用右手在所标记的点插入固定在注射器上的针头，穿过巩膜并且向前5mm进入玻璃体液。放置注射针头以面对眼球的后轴，并且通过缓慢按压注射器柱塞将内容物递送到中部玻璃体中。抽出固定在注射器上的针头，并且将接近插入位点的巩膜上组织用结膜钳子夹住30秒，以减少所注射的物质的回流。擦拭给药部位以去掉残余的放射性。对第二只眼睛以相同的方式重复制备和剂量施用。将适当的测试物品保持在湿冰上持续程序的持续时间，并且以每只眼睛50yL的剂量体积施用一次。注射后进行间接检眼镜检查，以确保没有晶体或视网膜接触。采集每个注射部位的剂量擦拭物，并且在通过液体闪烁计数LSC确定残余的放射性之前保持在室温。从施用量中减去回收的放射性，给出施用的实际放射性剂量。[0736]在剂量给药前，剂量给药后6小时和剂量给药后1、2、4、7、11、14、21和28天，在室温从动物的颈静脉采集血液样品到不含抗凝血药的管中。采集全血的等分试样约〇.ImL并处理，以用于放射性分析。将残余的血液在环境温度下离心，以得到血清，并处理用于放射性分析。[0737]通过静脉内注射安乐死溶液而处死每个时间点的两只动物，然后听诊。结束时间点为:剂量给药前6小时，和剂量给药后2、7、14、21和28天。从指定的动物采集房水、晶体、玻璃体液、视网膜脉络膜和巩膜。将眼睛摘下，并且剪下眼球外的任何无关组织。用带有结核菌素针的注射器取出房水，并且收集到预先称重的γ管中。将剩余的眼睛在液氮中冷冻约30秒。在冷冻的切割表面上，摘除角膜、虹膜和晶体。将晶体用少量PBS润洗，并将润洗液收集到γ管中。将晶体吸干并放置在预先称重的γ管中。当需要时，将眼睛在液氮中再次冷冻。将巩膜切下并从玻璃体液上剥下。取出玻璃体液并放置在预先称重的容器中用于增溶。将粘附视网膜脉络膜的巩膜浸在ImlPBS润洗液中，将其与之前的润洗液汇合，并且将组织轻轻吸干。将视网膜脉络膜从巩膜上取下并放置在分开的预先称重的γ管中。将适当的表面和工具用湿纱布擦拭并收集到γ管中用于计数。将所有的组织、润洗液和擦拭物收集到塑料容器中并处理以用于放射性分析。[0738]将每个时间点来自所选动物包括来自剂量给药后2、14和28天的时间点的动物）的一只眼睛处理，以用于玻璃体液的放射色谱分析。摘下右眼并剪下眼球外的无关组织。用带有结核菌素针的注射器取出房水，并且放置到预先称重的γ管中使用带有18号针头的IOml注射器收集最大量的玻璃体液。将内容物转移到预先称重的容器中，以通过HPLC-Ga_a-RAM™进行分析。将玻璃体液样品保持冷冻或保持在湿冰上，以用于放射色谱分析。将剩余的右眼组织放置在预先称重的容器中，用于增溶，并处理，以用于放射性分析。[0739]将剂量给药制剂、血清和全血的单份或双份整分试样充分混合并取样，以通过γ计数器进行直接的放射性分析。眼组织直接计数，稀释在PBS中，或在设为约50°C的温育炉中在3NKOH甲醇TRIT0N™X-100溶液中增溶，并且一式三份取样，以通过γ计数器分析放射性活性。所有采集的放射性样品以允许的样品尺寸一式两份或一式三份计数至少5分钟或者100,000次计数。所有具有大于200dpm的放射性的样品结果（以dpmg样品计算都在平均值的15%内。[0740]对在剂量给药后2、14和28小时来自一只动物的右眼玻璃体液进行放射色谱分析。通过HPLC-Gamma-RAM™按照目的拟合方法fit-for-purposemethod分析样品。比较峰面积和停留时间，以随时间测定测试物品完整性。为了准备样品，将PRECELLYS®24匀浆器用冷却的氮气流预冷到-10至〇°C。在适当的管中加入氧化锆珠子。使用正配置的移液管，将玻璃体液样品添加到包含氧化锆珠子的管中。将样品放置在预冷的PRECELLYS®24匀浆器中并且以6，500RPM匀化六个60秒的循环。在分析之前，将管以14，000RPM离心10分钟。[0741]使用PHOENIX®WinNon丨in®版本6.2.1CertaraUSA，Inc.，Princeton，NJ估测药物代谢动力学参数。使用与玻璃体内施用途径一致的不分区方法（non-compartmentalapproach进行参数估测。HA100K-rabFab-125I在兔玻璃体中的半衰期值为11·9天，相较而言，由历史数据知rabFab的半衰期为3·2天（Shatz等人Mol.Pharmaceutics2016;PubMedidentifierPMID27244474〇[0742]虽然为了理解清楚的目的，已经借助于示例和实例详细描述了上述发明，但是描述和实例不应当解释为限制本发明的范围。本文中引用的所有专利和科学文献的公开内容通过引用完整地清楚引入。
权利要求：1.特异性结合血管内皮生长因子VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含下述六个高变区HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDNO:1的氨基酸序列；bHVR-H2,其包含GXiTPX2GGX3X4X5YX6DSVX7X8SEQIDN0:2的氨基酸序列，其中Xi是11e或His，X2是Ala或Arg，X3是Tyr或Lys，X4是Thr或Glu，X5是Arg，Tyr，Gln，或Glu，X6是Ala或Glu，X7是Lys或Glu，并且X8是Gly或Glu;cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；dHVR-Ll，其包含RASQXiVSTAVASEQIDN0:4的氨基酸序列，其中乂1是厶8?或Arg;eHVR-L2,其包含XiASFLYSSEQIDN0:5的氨基酸序列，其中X^Ser或Met;和fHVR-L3,其包含X1QgygX2PFI^SEQIDNO:6的氨基酸序列，其中乂1是6111，Asn，或Thr，并且X2是Ala，Asn，Gln或Arg。2.权利要求1的抗体，其中所述抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDNO:1的氨基酸序列；bHVR-H2,其包含GITPAGGYTRYADSVKGSEQIDN0:7、GITPAGGYEYYADSVKGSEQIDNO:21或GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDNO:22的氨基酸序列；cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDNO:8的氨基酸序列；eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和fHVR-L3，其包含QQGYGAPFTSEQIDNO:10或QQGYGNPFTSEQIDNO:23的氨基酸序列。3.权利要求1或2的抗体，其中所述抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDNO:1的氨基酸序列；bHVR-H2，其包含GITPAGGYTRYADSVKGSEQIDNO:7的氨基酸序列；cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDNO:8的氨基酸序列；eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和fHVR-L3，其包含QQGYGAPFTSEQIDNO:10的氨基酸序列。4.权利要求1-3中任一项的抗体，其中所述抗体还包含下述重链可变VH结构域构架区FR:aFR-Hl，其包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTISSEQIDNO:13的氨基酸序列；bFR-H2，其包含WVRQAPGKGLEWVASEQIDNO:14的氨基酸序列；cFR-H3,其包含RFTISADTSKNTAYLQMRSLRAEDTAVYYCARSEQIDN0:15的氨基酸序列;和dFR-H4，其包含WGQGTLVTVSSSEQIDNO:16的氨基酸序列。5.权利要求1-4中任一项的抗体，其中所述抗体还包含下述轻链可变VL结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDNO:17的氨基酸序列；bFR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLUYSEQIDNO:18的氨基酸序列；cFR-L3,其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDN0:19的氨基酸序列;和dFR-L4，其包含FGQGTKVEIKSEQIDNO:20的氨基酸序列。6.权利要求1或2的抗体，其中所述抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDNO:1的氨基酸序列；bHVR-H2，其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDNO:22的氨基酸序列；cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDNO:8的氨基酸序列；eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和fHVR-L3，其包含QQGYGNPFTSEQIDNO:23的氨基酸序列。7.权利要求6的抗体，其中所述抗体还包含下述VL结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDNO:17的氨基酸序列；bFR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLUYSEQIDNO:18的氨基酸序列；cFR-L3,其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCSEQIDN0:24的氨基酸序列;和dFR-L4，其包含FGQGTKVEIKSEQIDNO:20的氨基酸序列。8.权利要求1或2的抗体，其中所述抗体包含下述六个HVR:aHVR-Hl，其包含DYWIHSEQIDNO:1的氨基酸序列；bHVR-H2，其包含GITPAGGYEYYADSVEGSEQIDNO:22的氨基酸序列；cHVR-H3，其包含FVFFLPYAMDYSEQIDNO:3的氨基酸序列；dHVR-Ll，其包含RASQDVSTAVASEQIDNO:8的氨基酸序列；eHVR-L2，其包含SASFLYSSEQIDNO:9的氨基酸序列；和fHVR-L3，其包含QQGYGAPFTSEQIDNO:10的氨基酸序列。9.权利要求8的抗体，其中所述抗体还包含下述VL结构域FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDN0:17、DIQMTQSPESLSASVGDEVTITCSEQIDN0:25SDIQMTQSPSSLSASVGDEVTITCSEQIDN0:26的氨基酸序列；bFR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDN0:18或WYQQKPGEAPKLLIYSEQIDN0:27的氨基酸序列；cFR-L3,其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDN0:19或GVPSRFSGSGSGTDFTLTIESLQPEDAATYYCSEQIDNO:28的氨基酸序列；和dFR-L4，其包含FGQGTKVEIKSEQIDNO:20的氨基酸序列。1〇.权利要求6-9中任一项的抗体，其中所述抗体还包含下述VH结构域FR:aFR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLELSCAASGFEISSEQIDNO:29或EEQLVEEGGGLVQPGESLRLSCAASGFEISSEQIDN0:51的氨基酸序列；bFR-H2，其包含WVRQEPGEGLEWVASEQIDNO:30的氨基酸序列；cFR-H3,其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列;和dFR-H4，其包含WGQGELVTVSSSEQIDNO:32的氨基酸序列。11.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a包含与SEQIDN0:ll，40，或42的氨基酸序列具有至少95%的序列同一性的氨基酸序列的VH结构域；（b包含与SEQIDNO:12,41，或46的氨基酸序列具有至少95%的序列同一性的氨基酸序列的VL结构域;或ca中的VH结构域和b中的VL结构域。12.权利要求11的抗体，其中所述VH结构域进一步包含下述FR:aFR-Hl，其包含EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTISSEQIDNO:13的氨基酸序列；bFR-H2，其包含WVRQAPGKGLEWVASEQIDN0:14或WVRQEPGKGLEWVASEQIDN0:39的氨基酸序列；cFR-H3,其包含RFTISADTSKNTAYLQMRSLRAEDTAVYYCARSEQIDN0:15的氨基酸序列;和dFR-H4，其包含WGQGTLVTVSSSEQIDNO:16的氨基酸序列。13.权利要求12的抗体，其中所述VH结构域包含SEQIDNO:11的氨基酸序列。14.权利要求11-13中任一项的抗体，其中所述VL结构域进一步包含下述FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDN0:17或DIQMTQSPSSLSASVGDRVTIDCSEQIDN0:45的氨基酸序列；bFR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLUYSEQIDNO:18的氨基酸序列；cFR-L3,其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDN0:19、GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDSATYYCSEQIDN0:44或GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDVATYYCSEQIDNO:54的氨基酸序列；和dFR-L4，其包含FGQGTKVEIKSEQIDN0:20或FGQGTKVEVKSEQIDN0:55的氨基酸序列。15.权利要求14的抗体，其中所述VL结构域包含SEQIDNO:12的氨基酸序列。16.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDNO:11的氨基酸序列的VH结构域和b含有SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。17.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDN0:40的氨基酸序列的VH结构域和b含有SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。18.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDN0:42的氨基酸序列的VH结构域和b含有SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。19.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDN0:42的氨基酸序列的VH结构域和b含有SEQIDNO:41的氨基酸序列的VL结构域。20.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a包含与SEQIDN0:33或51的氨基酸序列具有至少95%的序列同一性的氨基酸序列的VH结构域；（b包含与SEQIDNO:12，34，35，36，37，或38的氨基酸序列具有至少95%的序列同一性的氨基酸序列的VL结构域;或ca中的VH结构域和b中的VL结构域。21.权利要求20的抗体，其中所述抗体还包含下述FR:aFR-Hl，其包含EEQLVEEGGGLVQPGESLELSCAASGFEISSEQIDNO:29或EEQLVEEGGGLVQPGESLRLSCAASGFEISSEQIDN0:52的氨基酸序列；bFR-H2，其包含WVRQEPGEGLEWVASEQIDNO:30的氨基酸序列；cFR-H3,其包含RFTISADTSENTAYLQMNELRAEDTAVYYCARSEQIDN0:31的氨基酸序列;和dFR-H4，其包含WGQGELVTVSSSEQIDNO:32的氨基酸序列。22.权利要求21的抗体，其中所述VH结构域包含SEQIDN0:33的氨基酸序列。23.权利要求21的抗体，其中所述VH结构域包含SEQIDN0:51的氨基酸序列。24.权利要求20-23中任一项的抗体，其中所述抗体还包含下述FR:aFR-Ll，其包含DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSEQIDNO:17、DIQMTQSPESLSASVGDEVTITCSEQIDNO:25SDIQMTQSPSSLSASVGDEVTITCSEQIDNO:26的氨基酸序列；bFR-L2，其包含WYQQKPGKAPKLLIYSEQIDNO:18或WYQQKPGEAPKLLIYSEQIDNO:27的氨基酸序列；cFR-L3,其包含GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDAATYYCSEQIDNO:19、GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCSEQIDNO:24或GVPSRFSGSGSGTDFTLTIESLQPEDAATYYCSEQIDNO:28的氨基酸序列；和dFR-L4，其包含FGQGTKVEIKSEQIDNO:20的氨基酸序列。25.权利要求24的抗体，其中所述VL结构域包含SEQIDNO:34的氨基酸序列。26.权利要求24的抗体，其中所述VL结构域包含SEQIDNO:35的氨基酸序列。27.权利要求24的抗体，其中所述VL结构域包含SEQIDNO:36的氨基酸序列。28.权利要求24的抗体，其中所述VL结构域包含SEQIDNO:37的氨基酸序列。29.权利要求24的抗体，其中所示VL结构域包含SEQIDNO:12的氨基酸序列。30.权利要求24的抗体，其中所示VL结构域包含SEQIDNO:38的氨基酸序列。31.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDN0:33的氨基酸序列的VH结构域和b含有SEQIDNO:38的氨基酸序列的VL结构域。32.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDN0:33的氨基酸序列的VH结构域和b含有SEQIDNO:34的氨基酸序列的VL结构域。33.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDN0:33的氨基酸序列的VH结构域和b含有SEQIDNO:35的氨基酸序列的VL结构域。34.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDN0:33的氨基酸序列的VH结构域和b含有SEQIDNO:36的氨基酸序列的VL结构域。35.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDN0:33的氨基酸序列的VH结构域和b含有SEQIDNO:37的氨基酸序列的VL结构域。36.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDN0:33的氨基酸序列的VH结构域和b含有SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。37.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDN0:51的氨基酸序列的VH结构域和b含有SEQIDNO:38的氨基酸序列的VL结构域。38.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDN0:51的氨基酸序列的VH结构域和b含有SEQIDNO:35的氨基酸序列的VL结构域。39.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDN0:51的氨基酸序列的VH结构域和b含有SEQIDNO:37的氨基酸序列的VL结构域。40.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDN0:51的氨基酸序列的VH结构域和b含有SEQIDNO:12的氨基酸序列的VL结构域。41.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDN0:48的氨基酸序列的重链和b含有SEQIDNO:50的氨基酸序列的轻链。42.特异性结合VEGF的分离的抗体，其中所述抗体包含：（a含有SEQIDN0:49的氨基酸序列的重链和b含有SEQIDNO:50的氨基酸序列的轻链。43.权利要求1-42中任一项的抗体，其中所述抗体能够抑制VEGF与VEGF受体的结合。44.权利要求43的抗体，其中所述VEGF受体是VEGF受体IFlt-I。45.权利要求43的抗体，其中所述VEGF受体是VEGF受体2KDR。46.权利要求1-45中任一项的抗体，其中所述抗体以约2nM或更低的Kd结合人VEGFhVEGF。47.权利要求46的抗体，其中所述抗体以约75pM至约2nM的Kd结合hVEGF。48.权利要求47的抗体，其中所述抗体以约75pM至约600pM的Kd结合hVEGF。49.权利要求48的抗体，其中所述抗体以约75pM至约500pM的Kd结合hVEGF。50.权利要求49的抗体，其中所述抗体以约60pM的Kd结合hVEGF。51.权利要求1-5、11-19和41-50中任一项的抗体，其中所述抗体具有大于约83.5°C的解链温度Tm。52.权利要求51的抗体，其中所述抗体具有约85°C至约91°C的Tm。53.权利要求52的抗体，其中所述抗体具有约89°C的Tm。54.权利要求1、2、6-10、20-40和43-50中任一项的抗体，其中所述抗体具有低于8的等电点pi。55.权利要求54的抗体，其中所述抗体具有约5至约7的pI。56.权利要求55的抗体，其中所述抗体具有约5至约6的pi。57.权利要求1-56中任一项的抗体，其中所述抗体是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。58.权利要求1-57中任一项的抗体，其中所述抗体是结合VEGF的抗体片段。59.权利要求58的抗体，其中所述抗体片段选自由下述组成的组:Fab，Fab-C，Fab’-SH，Fv，scFv，和Fab’）2片段。60.权利要求59的抗体，其中所述抗体片段是Fab。61.权利要求1-60中任一项的抗体，其中所述抗体是单特异性抗体。62.权利要求1-60中任一项的抗体，其中所述抗体是多特异性抗体。63.权利要求62的抗体，其中所述多特异性抗体是双特异性抗体。64.权利要求62的抗体，其中所述双特异性抗体结合VEGF和第二生物学分子，所述第二生物学分子选自由下述组成的组：IL-Ιβ;白介素-6IL-6;白介素-6受体IL-6R;白介素-13IL-13;IL-13受体（IL-13R;PDGF;血管生成素;血管生成素2;Tie2;SlP;整联蛋白ανβ3，ανβ5和α5β1;β动物纤维素;apelinAPJ;红细胞生成素；补体因子D;TNFa;HtrAl;VEGF受体;ST-2受体;和遗传上与年龄相关性黄斑变性AMD风险相关联的蛋白。65.权利要求64的抗体，其中所述VEGF受体是VEGFRl，VEGFR2，VEGFR3，膜结合的VEGF-受体mbVEGFR，或可溶的VEGF受体sVEGFR。66.权利要求64的抗体，其中所述遗传上与AMD风险相关联的蛋白选自由下述组成的组：补体途径组分C2，因子B，因子H，CFHR3，C3b，C5，C5a，和C3a;HtrAl;ARMS2;ΊΊΜΡ3;HLA;白介素-8IL-8;CX3CR1;TLR3;TLR4;CETP;LIPC，C0L10A1;和TNFRSF10A。67.编码权利要求1-66中任一项的抗体的多核苷酸。68.包含权利要求67的多核苷酸的载体。69.包含权利要求68的载体的宿主细胞。70.制备权利要求1-66中任一项的抗体的方法，所述方法包括培养包含权利要求65的载体的宿主细胞和回收所述抗体。71.权利要求70的方法，其中所述宿主细胞是原核的。72.权利要求71的方法，其中所述宿主细胞是大肠杆菌^Escherichiacoli。73.权利要求72的方法，其中所述宿主细胞是真核的。74.权利要求73的方法，其中所述宿主细胞是293细胞，CHO细胞，酵母细胞或植物细胞。75.减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的权利要求1-66中任一项的抗体，由此减少或抑制所述受试者中的血管发生。76.权利要求75的方法，其中所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症或细胞增生病症。77.权利要求76的方法，其中所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症。78.权利要求77的方法，其中所述眼部病症选自由下述组成的组:年龄相关性黄斑变性AMD，黄斑变性，黄斑水肿，糖尿病性黄斑水肿DME包括局部、非中心DME和弥散性、包括中心的DME，视网膜病，糖尿病视网膜病DR包括增生性DRPDR，非增生性DRNPDR，和高海拔DR，其他缺血相关的视网膜病，早产儿视网膜病ROP，视网膜静脉闭塞RVO包括中央性CRVO和分支BRVO形式），CNV包括近视CNV，角膜新生血管形成，与角膜新生血管形成相关的疾病，视网膜新生血管形成，与视网膜脉络膜新生血管形成相关的疾病，病理性近视，希佩尔-林道病，眼的组织胞浆菌病，家族性渗出性玻璃体视网膜病FEVR，冠茨病，诺里病，骨质疏松症-假神经胶质瘤综合征OPPG，结膜下出血，发红，眼新生血管病，新生血管性青光眼，色素性视网膜炎RP，高血压视网膜病，视网膜血管瘤增生，黄斑毛细管扩张，虹膜新生血管形成，眼内新生血管形成，视网膜变性，囊样黄斑水肿CME，血管炎，视盘水肿，视网膜炎，结膜炎包括传染性结膜炎和非传染性例如，过敏性结膜炎），利伯先天性黑朦，葡萄膜炎包括传染性和非传染性葡萄膜炎），脉络膜炎，眼组织胞浆菌病，眼睑炎，干眼，外伤性眼损伤，和舍格伦病。79.权利要求78的方法，其中所述眼部病症是AMD，DME，DR或RV0。80.权利要求78或79的方法，其中所述眼部病症是AMD。81.权利要求78-80中任一项的方法，其中所述AMD是湿性AMD。82.权利要求76的方法，其中所述与病理性血管发生相关的病症是细胞增生病症。83.权利要求82的方法，其中所述细胞增生病症是癌症。84.权利要求83的方法，其中所述癌症选自由下述组成的组:乳腺癌，结肠直肠癌，非小细胞肺癌，非霍奇金淋巴瘤NHL，肾癌，前列腺癌，肝癌，头颈癌，黑素瘤，卵巢癌，间皮瘤，和多发性骨髓瘤。85.治疗与病理性血管发生相关的病症的方法，所述方法包括向需要所述治疗的受试者施用有效量的权利要求1-66中任一项的抗体。86.权利要求85的方法，其中所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症或细胞增生病症。87.权利要求86的方法，其中所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症。88.权利要求87的方法，其中所述眼部病症选自由下述组成的组:AMD，黄斑变性，黄斑水肿，DME包括局部、非中心DME和弥散性、包括中心的DME，视网膜病，DR包括PDR，NPDR，和高海拔DR，其他缺血相关的视网膜病，ROP，RVO包括CRVO和BRVO形式），CNV包括近视CNV，角膜新生血管形成，与角膜新生血管形成相关的疾病，视网膜新生血管形成，与视网膜脉络膜新生血管形成相关的疾病，病理性近视，希佩尔-林道病，眼的组织胞浆菌病，FEVR，冠茨病，诺里病，OPPG，结膜下出血，发红，眼新生血管病，新生血管性青光眼，RP，高血压视网膜病，视网膜血管瘤增生，黄斑毛细管扩张，虹膜新生血管形成，眼内新生血管形成，视网膜变性，CME，血管炎，视盘水肿，视网膜炎，结膜炎包括传染性结膜炎和非传染性例如，过敏性结膜炎），利伯先天性黑朦，葡萄膜炎包括传染性和非传染性葡萄膜炎），脉络膜炎，眼组织胞浆菌病，眼睑炎，干眼，外伤性眼损伤，和舍格伦病。89.权利要求88的方法，其中所述眼部病症是AMD，DME，DR或RV0。90.权利要求88或89的方法，其中所述眼部病症是AMD。91.权利要求88-90中任一项的方法，其中所述AMD是湿性AMD。92.权利要求86的方法，其中所述与病理性血管发生相关的病症是细胞增生病症。93.权利要求92的方法，其中所述细胞增生病症是癌症。94.权利要求93的方法，其中所述癌症选自由下述组成的组:乳腺癌，结肠直肠癌，非小细胞肺癌，非霍奇金淋巴瘤NHL，肾癌，前列腺癌，肝癌，头颈癌，黑素瘤，卵巢癌，间皮瘤，和多发性骨髓瘤。95.抑制患有与不需要的血管通透性相关的病症的受试者中的血管通透性的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的权利要求1-66中任一项的抗体，由此抑制所述受试者中的血管通透性。96.治疗与不需要的血管通透性相关的病症的方法，所述方法包括向需要所述治疗的受试者施用有效量的权利要求1-66中任一项的抗体。97.权利要求95或96的方法，其中所述与不需要的血管通透性相关的病症选自由下述组成的组:与脑肿瘤相关的水肿，与恶性肿瘤相关的腹水，梅格斯综合征，肺部炎症，肾病综合征，心包积液，胸腔积液，和与心血管病相关的通透性。98.权利要求75-97中任一项的方法，所述方法还包括向所述受试者施用有效量的第二药剂，其中所述第二药剂选自由下述组成的组:另一种抗体，化疗剂，细胞毒性剂，抗血管生成剂，免疫抑制剂，前药，细胞因子，细胞因子拮抗剂，细胞毒性放射疗法，皮质类固醇，止吐药，癌症疫苗，止痛剂，生长抑制剂，和与第二生物分子结合的化合物。99.权利要求98的方法，其中所述抗血管生成剂是VEGF拮抗剂。100.权利要求99的方法，其中所述VEGF拮抗剂是抗-VEGF抗体，抗-VEGF受体抗体，可溶性VEGF受体融合蛋白，适体，抗-VEGFDARPin®，或VEGFR酪氨酸激酶抑制剂。101.权利要求1〇〇的方法，其中所述抗-VEGF抗体是雷珠单抗LUCENTIS敗,RTH-258，或双特异性抗-VEGF抗体。102.权利要求101的方法，其中所述双特异性抗-VEGF抗体是抗-VEGF抗-Ang2抗体。103.权利要求102的方法，其中所述抗-VEGF抗-Ang2抗体是RG-7716。104.权利要求100的方法，其中所述可溶性VEGF受体融合蛋白是阿柏西普EYLEA®。105.权利要求100的方法，其中所述适体是培加尼布MACUGEN®。106.权利要求100的方法，其中所述抗-'\^?1入尺卩0^是313；[^31口68〇1。107.权利要求100的方法，其中所述VEGFR酪氨酸激酶抑制剂选自由下述组成的组:4-4-溴-2-氟苯胺基-6-甲氧基-7-1-甲基哌啶-4-基甲氧基喹唑啉ZD6474，4-4-氟-2-甲基吲哚-5-基氧基-6-甲氧基-7-3-吡咯烷-1-基丙氧基）喹唑啉AZD2171，伐他拉尼PTK787,semaxaminibSU5416，和SUTENT®舒尼替尼）。108.权利要求98的方法，其中所述第二生物分子选自由下述组成的组：IL-1β;IL-6;几-61?;几-13;几-131?;?06?;血管生成素；血管生成素2;1162;31?;整联蛋白€[冰3，€[冰5，和€[5β1;β动物纤维素;apeIinAPJ;红细胞生成素；补体因子D;TNFa;HtrAl;VEGF受体；ST-2受体;和遗传上与AMD风险相关联的蛋白。109.权利要求108的方法，其中所述VEGF受体是VEGFRl，VEGFR2，VEGFR3，mbVEGFR或SVEGFR011〇.权利要求108的方法，其中所述遗传上与AMD风险相关联的蛋白选自由下述组成的组：补体途径组分C2，因子B，因子H，CFHR3，C3b，C5，C5a，和C3a;HtrAl;ARMS2;TIMP3;HLA;IL-8;CX3CR1;TLR3;TLR4;CETP;LIPC，C0L10A1;和TNFRSF10A。111.权利要求98和108-110中任一项的方法，其中所述与第二生物分子结合的化合物是抗体或其抗原结合片段。112.权利要求111的方法，其中所述抗原结合抗体片段选自由下述组成的组:？13^313-113.权利要求75-112中任一项的方法，其中所述抗体以玻璃体内、眼部、眼内、近巩膜、眼球筋膜囊下、脉络膜表面、局部、静脉内、肌肉内、皮内、经皮、动脉内、腹膜内、病变内、颅内、关节内、前列腺内、胸膜内、气管内、鞘内、鼻内、阴道内、直肠内、局部、瘤内、腹膜内、腹膜、心室内、皮下、结膜下、囊泡内、粘膜、心包内、脐内、眶内、口服、经皮、通过吸入、通过注射、通过滴眼液、通过植入、通过输注、通过连续输注、通过直接局部灌注浸浴靶细胞、通过导管、通过灌洗、以霜剂、或以液体组合物施用。114.权利要求113的方法，其中所述抗体以玻璃体内、眼部、眼内、近巩膜、眼球筋膜囊下、脉络膜表面或局部施用。115.权利要求114的方法，其中所述抗体通过注射玻璃体内施用。116.权利要求114的方法，其中所述抗体通过滴眼液或软膏局部施用。117.权利要求113或114的方法，其中所述抗体通过通道递送装置施用。118.权利要求75-117中任一项的方法，其中所述受试者是人。119.包含权利要求1-66中任一项的抗体的药物组合物。120.权利要求119的药物组合物，其还包含聚合物。121.权利要求120的药物组合物，其中所述聚合物是可生物降解的聚合物。122.权利要求120的药物组合物，其中所述药物组合物配制成聚合物溶剂贮库制剂、聚合物植入物或聚合物胶束。123.权利要求120-122中任一项的药物组合物，其中所述聚合物是聚乳酸聚乙醇酸PLGA共聚物。124.权利要求123的药物组合物，其中所述药物组合物配制成PLGA棒状物。125.权利要求119-124中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物用于治疗哺乳动物中与病理性血管发生相关的病症或与不需要的血管通透性相关的病症。126.权利要求125的药物组合物，其中所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症或细胞增生病症。127.权利要求126的药物组合物，其中所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症。128.权利要求127的药物组合物，其中所述眼部病症选自由下述组成的组:AMD，黄斑变性，黄斑水肿，DME包括局部、非中心DME和弥散性、包括中心的DME，视网膜病，DR包括PDR，NPDR，和高海拔DR，其他缺血相关的视网膜病，ROP，RVO包括CRVO和BRVO形式），CNV包括近视CNV，角膜新生血管形成，与角膜新生血管形成相关的疾病，视网膜新生血管形成，与视网膜脉络膜新生血管形成相关的疾病，病理性近视，希佩尔-林道病，眼的组织胞浆菌病，FEVR，冠茨病，诺里病，OPPG，结膜下出血，发红，眼新生血管病，新生血管性青光眼，RP，高血压视网膜病，视网膜血管瘤增生，黄斑毛细管扩张，虹膜新生血管形成，眼内新生血管形成，视网膜变性，CME，血管炎，视盘水肿，视网膜炎，结膜炎包括传染性结膜炎和非传染性例如，过敏性结膜炎），利伯先天性黑朦，葡萄膜炎包括传染性和非传染性葡萄膜炎），脉络膜炎，眼组织胞浆菌病，眼睑炎，干眼，外伤性眼损伤，和舍格伦病。129.权利要求128的药物组合物，其中所述眼部病症是AMD，DME，DR或RVO。130.权利要求128或129的药物组合物，其中所述眼部病症是AMD。131.权利要求128-130中任一项的药物组合物，其中所述AMD是湿性AMD。132.权利要求126的药物组合物，其中所述与病理性血管发生相关的病症是细胞增生病症。133.权利要求132的药物组合物，其中所述细胞增生病症是癌症。134.权利要求133的药物组合物，其中所述癌症选自由下述组成的组：乳腺癌，结肠直肠癌，非小细胞肺癌，非霍奇金淋巴瘤NHL，肾癌，前列腺癌，肝癌，头颈癌，黑素瘤，卵巢癌，间皮瘤，和多发性骨髓瘤。135.权利要求125的药物组合物，其中所述与不需要的血管通透性相关的病症选自由下述组成的组:与脑肿瘤相关的水肿，与恶性肿瘤相关的腹水，梅格斯综合征，肺部炎症，肾病综合征，心包积液，胸腔积液，和与心血管病相关的通透性。136.权利要求119-135中任一项的药物组合物，其还包含第二药剂，其中所述第二药剂选自由下述组成的组:另一种抗体，化疗剂，细胞毒性剂，抗血管生成剂，免疫抑制剂，前药，细胞因子，细胞因子拮抗剂，细胞毒性放射疗法，皮质类固醇，止吐药，癌症疫苗，止痛剂，生长抑制剂，和与第二生物分子结合的化合物。137.权利要求136的药物组合物，其中所述抗血管生成剂是VEGF拮抗剂。138.权利要求137的药物组合物，其中所述VEGF拮抗剂是抗-VEGF抗体，抗-VEGF受体抗体，可溶性VEGF受体融合蛋白，适体，抗-VEGFDARPin®，或VEGFR酪氨酸激酶抑制剂。139.权利要求138的药物组合物，其中所述抗-VEGF抗体是雷珠单抗LUCENTIS®，RTH-258，或双特异性抗-VEGF抗体。140.权利要求139的药物组合物，其中所述双特异性抗-VEGF抗体是抗-VEGF抗-Ang2抗体。141.权利要求140的药物组合物，其中所述抗-VEGF抗-Ang2抗体是RG-7716。142.权利要求138的药物组合物，其中所述可溶性VEGF受体融合蛋白是阿柏西普EYLEAFc143.权利要求138的药物组合物，其中所述适体是培加尼布MACUGEN®。144·权利要求138的药物组合物，其中所述抗-VEGFDARPin⑯是abiciparpegol。145.权利要求138的药物组合物，其中所述VEGFR酪氨酸激酶抑制剂选自由下述组成的组:4_4-溴-2-氟苯胺基-6-甲氧基-7-1-甲基哌啶-4-基甲氧基喹唑啉ZD6474，4-4-氟-2-甲基吲哚-5-基氧基-6-甲氧基-7-3-吡咯烷-1-基丙氧基）喹唑啉AZD2171，伐他拉尼PTK787，semaxaminibSU5416，和SU’TENT®舒尼替尼）。146.权利要求136的药物组合物，其中所述第二生物分子选自由下述组成的组：IL-Ιβ;IL-6;IL-6R;IL-13;IL-13R;PDGF;血管生成素；血管生成素2;Tie2;SlP;整联蛋白ανβ3，ανβ5，和α5β1;β动物纤维素；apeIinAPJ;红细胞生成素；补体因子D;TNFa;HtrAl;VEGF受体；ST_2受体;和遗传上与AMD风险相关联的蛋白。147.权利要求146的药物组合物，其中所述VEGF受体是VEGFRl，VEGFR2，VEGFR3，mbVEGFR或sVEGFR。148.权利要求146的药物组合物，其中所述遗传上与AMD风险相关联的蛋白选自由下述组成的组：补体途径组分C2，因子B，因子H，CFHR3，C3b，C5，C5a，和C3a;HtrAl;ARMS2;ΊΊΜΡ3;HLA;IL-8;CX3CR1;TLR3;TLR4;CETP;LIPC，C0L10A1;和TNFRSF10A。149.权利要求136和146-148中任一项的药物组合物，其中所述与第二生物分子结合的化合物是抗体或其抗原结合片段。150.权利要求149的药物组合物，其中所述抗原结合抗体片段选自由下述组成的组：Fab，Fab_C，Fab’_5!1，卩¥，8〇卩¥，和史13’）2片段。151.抗体缀合物，其包含（i权利要求1-66中任一项的抗体和（ii与所述抗体共价连接的亲水聚合物。152.权利要求151的抗体缀合物，其中所述亲水聚合物是透明质酸HA聚合物或聚乙二醇PEG聚合物。153.权利要求152的抗体缀合物，其中所述亲水聚合物是HA聚合物。154.权利要求153的抗体缀合物，其中所述HA聚合物具有约1兆道耳顿MDa以下的分子量。155.抗体缀合物，其包含⑴特异性结合VEGF的抗体，和（ii与所述抗体共价连接的HA聚合物，其中所述HA聚合物具有IMDa以下的分子量。156.权利要求154或155的抗体缀合物，其中所述HA聚合物具有约25kDa至约500kDa的分子量。157.权利要求156的抗体缀合物，其中所述HA聚合物具有约IOOkDa至约250kDa的分子量。158.权利要求157的抗体缀合物，其中所述HA聚合物具有约200kDa的分子量。159.权利要求151-158中任一项的抗体缀合物，其中所述HA聚合物不是交联的。160.权利要求151-159中任一项的抗体缀合物，其中所述抗体是结合VEGF的抗体片段。161.权利要求160的抗体缀合物，其中所述抗体片段选自由下述组成的组:Fab，Fab-C，Fab’，Fab’_5!1，卩¥，8〇卩¥，和史13’）2片段。162.权利要求161的抗体缀合物，其中所述抗体片段是Fab，Fab-C或Fab’。163.权利要求151-162中任一项的抗体缀合物，其中所述抗体缀合物具有约IOnm至约60nm的流体动力学半径。164·权利要求163的抗体缀合物，其中所述抗体缀合物具有约25nm至约35nm的流体动力学半径。165.权利要求164的抗体缀合物，其中所述流体动力学半径为约28nm。166.权利要求151-165中任一项的抗体缀合物，其中，相对于没有共价连接到所述亲水聚合物上的参比抗体，所述抗体缀合物具有增加的眼部半衰期。167.权利要求166的抗体缀合物，其中，相对于参比抗体，所述眼部半衰期增加至少约2倍。168.权利要求167的抗体缀合物，其中，相对于参比抗体，所述眼部半衰期增加至少约4倍。169.权利要求166-168中任一项的抗体缀合物，其中所述眼部半衰期是玻璃体半衰期。170.权利要求166-169中任一项的抗体缀合物，其中所述参比抗体与所述抗体缀合物的抗体相同。171.权利要求151的抗体缀合物，其中所述抗体通过可逆的前药接头共价连接在所述聚合物上。172.权利要求171的抗体缀合物，其中所述聚合物是水凝胶。173.权利要求172的抗体缀合物，其中所述水凝胶是基于PEG的水凝胶。174.权利要求172或173的抗体缀合物，其中所述水凝胶是微粒珠子的形状。175.融合蛋白，其包含与HA结合结构域共价连接的权利要求1-66中任一项的抗体。176.权利要求175的融合蛋白，其中所述HA结合结构域共价连接至所述抗体的重链或轻链。177.权利要求176的融合蛋白，其中所述HA结合结构域共价连接至所述重链的C-端或所述轻链的C-端。178.权利要求177的融合蛋白，其中所述HA结合结构域共价连接至所述重链的C-端。179.权利要求177的融合蛋白，其中所述HA结合结构域共价连接至所述轻链的C-端。180.权利要求175-179中任一项的融合蛋白，其还包含接头，所述接头位于所述抗体与所述HA结合结构域之间。181.权利要求180的融合蛋白，其中所述接头包含GGGGSSEQIDNO:61的氨基酸序列。182.权利要求181的融合蛋白，其中所述接头由GGGGSSEQIDNO:61的氨基酸序列组成。183.权利要求175-182中任一项的融合蛋白，其中所述抗体是结合VEGF的抗体片段。184.权利要求183的融合蛋白，其中所述抗体片段选自由下述组成的组:Fab，Fab-C，Fab’，Fab’_5!1，卩¥，8〇卩¥，和史13’）2片段。185.权利要求184的融合蛋白，其中所述抗体片段是Fab。186.权利要求185的融合蛋白，其中所述HA结合结构域共价连接至所述Fab的CHl结构域的C-端。187.权利要求185的融合蛋白，其中HA结合蛋白共价连接至所述Fab的CL结构域的C-端。188.权利要求175-187中任一项的融合蛋白，其中所述HA结合结构域选自由下述组成的组:连接模块，Gl结构域，和富含赖氨酸的寡肽。189.权利要求188的融合蛋白，其中所述HA结合结构域是连接模块。190.权利要求189的融合蛋白，其中所述连接模块选自由下述组成的组:肿瘤坏死因子刺激的基因6TSG6，CD44,淋巴管内皮乙酰透明质酸受体ILYVE-I，乙酰透明质酸和蛋白聚糖连接蛋白（HAPLNI，HAPLN2，HAPLN3，HAPLM，聚集蛋白聚糖，短蛋白聚糖，神经聚糖，磷酸聚糖，多功能蛋白聚糖，CAB61358，KIA0527，stabiIin-Ι，和stabiIin-2连接模块。191.权利要求190的融合蛋白，其中所述连接模块是TSG6连接模块。192.权利要求191的融合蛋白，其中所述TSG6连接模块是人TSG6连接模块或兔TSG6连接模块。193.权利要求192的融合蛋白，其中所述TSG连接模块是人TSG6连接模块。194.权利要求193的融合蛋白，其中所述人TSG6连接模块包含人TSG6的氨基酸残基36-128〇195.权利要求175-194中任一项的融合蛋白，其还包含至少一个另外的HA结合结构域。196.权利要求195的融合蛋白，其中所述至少一个另外的HA结合结构域共价连接至所述抗体的重链或轻链。197.权利要求195或196的融合蛋白，其中所述至少一个另外的HA结合蛋白通过接头与所述抗体连接。198.权利要求197的融合蛋白，其中所述接头包含GGGGSSEQIDNO:61的氨基酸序列。199.权利要求198的融合蛋白，其中所述接头由GGGGSSEQIDNO:61的氨基酸序列组成。200.权利要求195-199中任一项的融合蛋白，其中第一HA结合结构域共价连接至所述重链，并且第二HA结合结构域共价连接至所述轻链。201.权利要求200的融合蛋白，其中第一HA结合结构域连接至所述重链的C-端，并且第二HA结合结构域连接至所述轻链的C-端。202.权利要求195-201中任一项的融合蛋白，其中所述至少一个另外的HA结合蛋白选自由下述组成的组:连接模块，Gl结构域，和富含赖氨酸的寡肽。203.权利要求202的融合蛋白，其中所述至少一个另外的HA结合蛋白是连接模块。204.权利要求203的融合蛋白，其中所述连接模块是TSG6连接模块。205.权利要求204的融合蛋白，其中所述TSG6连接模块是人TSG6连接模块或兔TSG6连接模块。206.权利要求205的融合蛋白，其中所述TSG6连接模块是人TSG6连接模块。207.权利要求205或206的融合蛋白，其中所述人TSG6连接模块包含人TSG6的氨基酸残基36_128。208.权利要求175-207中任一项的融合蛋白，其中所述融合蛋白特异性结合VEGF和HA。209.权利要求208的融合蛋白，其中所述融合蛋白以约2μΜ以下的Kd结合HA。210.权利要求209的融合蛋白，其中所述融合蛋白以约InM至约500nM的Kd结合HA。211.权利要求210的融合蛋白，其中所述融合蛋白以约InM至约50nM的Kd结合HA。212.权利要求211的融合蛋白，其中所述融合蛋白以约IOnM的Kd结合HA。213.权利要求175-212中任一项的融合蛋白，其中，相对于没有共价连接到HA结合结构域的参比抗体，所述融合蛋白具有增加的眼部半衰期。214.权利要求213的融合蛋白，其中，相对于参比抗体，所述眼部半衰期增加至少约2倍。215.权利要求214的融合蛋白，其中，相对于参比抗体，所述眼部半衰期增加至少约4倍。216.权利要求213-215中任一项的融合蛋白，其中所述眼部半衰期是玻璃体半衰期。217.权利要求213-216中任一项的融合蛋白，其中所述参比抗体与所述融合蛋白的抗体相同。218.减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的权利要求151-174中任一项的抗体缀合物，由此减少或抑制所述受试者中的血管发生。219.用于治疗与病理性血管发生相关的病症的方法，所述方法包括向需要所述治疗的受试者施用有效量的权利要求151-174中任一项的抗体缀合物。220.减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的权利要求175-217中任一项的融合蛋白，由此减少或抑制所述受试者中的血管发生。221.用于治疗与病理性血管发生相关的病症的方法，所述方法包括向需要所述治疗的受试者施用有效量的权利要求175-217中任一项的融合蛋白。222.权利要求218-221中任一项的方法，其中所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症。223.权利要求222的方法，其中所述眼部病症选自由下述组成的组:AMD，黄斑变性，黄斑水肿，DME包括局部、非中心DME和弥散性、包括中心的DME，视网膜病，DR包括PDR，NPDR，和高海拔DR，其他缺血相关的视网膜病，ROP，RVO包括CRVO和BRVO形式），CNV包括近视CNV，角膜新生血管形成，与角膜新生血管形成相关的疾病，视网膜新生血管形成，与视网膜脉络膜新生血管形成相关的疾病，病理性近视，希佩尔-林道病，眼的组织胞浆菌病，FEVR，冠茨病，诺里病，OPPG，结膜下出血，发红，眼新生血管病，新生血管性青光眼，RP，高血压视网膜病，视网膜血管瘤增生，黄斑毛细管扩张，虹膜新生血管形成，眼内新生血管形成，视网膜变性，CME，血管炎，视盘水肿，视网膜炎，结膜炎包括传染性结膜炎和非传染性例如，过敏性结膜炎），利伯先天性黑朦，葡萄膜炎包括传染性和非传染性葡萄膜炎），脉络膜炎，眼组织胞浆菌病，眼睑炎，干眼，外伤性眼损伤，和舍格伦病。224.权利要求223的方法，其中所述眼部病症是AMD，DME，DR或RV0。225.权利要求224的方法，其中所述眼部病症是AMD。226.权利要求223-225中任一项的方法，其中所述AMD是湿性AMD。227.权利要求218-226中任一项的方法，其还包括向所述受试者施用有效量的第二药剂，其中所述第二药剂选自由下述组成的组:另一种抗体，抗血管生成剂，细胞因子，细胞因子拮抗剂，皮质类固醇，止痛剂，和与第二生物分子结合的化合物。228.权利要求227的方法，其中所述抗血管生成剂是VEGF拮抗剂。229.权利要求228的方法，其中所述VEGF拮抗剂是抗-VEGF抗体，抗-VEGF受体抗体，可溶性VEGF受体融合蛋白，适体，抗-VEGFDARPin®，或VEGFR酪氨酸激酶抑制剂。230.权利要求229的方法，其中所述抗-VEGF抗体是雷珠单抗LUCENTIS®，RTH-258，或双特异性抗-VEGF抗体。231.权利要求230的方法，其中所述双特异性抗-VEGF抗体是抗-VEGF抗-Ang2抗体。232.权利要求231的方法，其中所述抗-VEGF抗-Ang2抗体是RG-7716。233.权利要求229的方法，其中所述可溶性VEGF受体融合蛋白是阿柏西普EYLEΑΦ。234.权利要求229的方法，其中所述适体是培加尼布MACUGEN®。235·权利要求229的方法，其中所述抗-VEGFD:ARPin®是abiciparpegol。236.权利要求229的方法，其中所述VEGFR酪氨酸激酶抑制剂选自由下述组成的组:4-4-溴-2-氟苯胺基-6-甲氧基-7-1-甲基哌啶-4-基甲氧基喹唑啉ZD6474，4-4-氟-2-甲基吲哚-5-基氧基-6-甲氧基-7-3-吡咯烷-1-基丙氧基）喹唑啉AZD2171，伐他拉尼PTK787,semaxaminibSU5416，和SUTENT®舒尼替尼）。237.权利要求227的方法，其中所述第二生物分子选自由下述组成的组：IL-Ιβ;IL-6;几-61?;几-13;几-131?;?06?;血管生成素；血管生成素2;1162;31?;整联蛋白€[冰3，€[冰5，和€[5β1;β动物纤维素;apeIinAPJ;红细胞生成素；补体因子D;TNFa;HtrAl;VEGF受体；ST-2受体;和遗传上与AMD风险相关联的蛋白。238.权利要求237的方法，其中所述VEGF受体是VEGFRl，VEGFR2，VEGFR3，mbVEGFR或SVEGFR0239.权利要求237的方法，其中所述遗传上与AMD风险相关联的蛋白选自由下述组成的组：补体途径组分C2，因子B，因子H，CFHR3，C3b，C5，C5a，和C3a;HtrAl;ARMS2;TIMP3;HLA;IL-8;CX3CR1;TLR3;TLR4;CETP;LIPC，C0L10A1;和TNFRSF10A。240.权利要求227和237-239中任一项的方法，其中所述与第二生物分子结合的化合物是抗体或其抗原结合片段。241.权利要求240的方法，其中所述抗原结合抗体片段选自由下述组成的组:？13^313-242.权利要求218、219和222-241中任一项的方法，其中所述抗体缀合物以玻璃体内、眼部、眼内、近巩膜、眼球筋膜囊下、脉络膜表面、局部、静脉内、肌肉内、皮内、经皮、动脉内、腹膜内、病变内、颅内、关节内、前列腺内、胸膜内、气管内、鞘内、鼻内、阴道内、直肠内、局部、瘤内、腹膜内、腹膜、心室内、皮下、结膜下、囊泡内、粘膜、心包内、脐内、眶内、口服、经皮、通过吸入、通过注射、通过滴眼液、通过植入、通过输注、通过连续输注、通过直接局部灌注浸浴靶细胞、通过导管、通过灌洗、以霜剂、或以液体组合物施用。243.权利要求242的方法，其中所述抗体缀合物以玻璃体内、眼部、眼内、近巩膜、眼球筋膜囊下、脉络膜表面或局部施用。244.权利要求243的方法，其中所述抗体缀合物通过注射玻璃体内施用。245.权利要求243的方法，其中所述抗体缀合物通过滴眼液或软膏局部施用。246.权利要求242或243的方法，其中所述抗体缀合物通过通道递送装置施用。247.权利要求220-246中任一项的方法，其中所述融合蛋白以玻璃体内、眼部、眼内、近巩膜、眼球筋膜囊下、脉络膜表面、局部、静脉内、肌肉内、皮内、经皮、动脉内、腹膜内、病变内、颅内、关节内、前列腺内、胸膜内、气管内、鞘内、鼻内、阴道内、直肠内、局部、瘤内、腹膜内、腹膜、心室内、皮下、结膜下、囊泡内、粘膜、心包内、脐内、眶内、口服、经皮、通过吸入、通过注射、通过滴眼液、通过植入、通过输注、通过连续输注、通过直接局部灌注浸浴靶细胞、通过导管、通过灌洗、以霜剂、或以液体组合物施用。248.权利要求247的方法，其中所述融合蛋白以玻璃体内、眼部、眼内、近巩膜、眼球筋膜囊下、脉络膜表面或局部施用。249.权利要求248的方法，其中所述融合蛋白通过注射玻璃体内施用。250.权利要求248的方法，其中所述融合蛋白通过滴眼液或软膏局部施用。251.权利要求247或248的方法，其中所述融合蛋白通过通道递送装置施用。252.权利要求218-251中任一项的方法，其中所述受试者是人。253.包含权利要求151-174中任一项的抗体缀合物的药物组合物。254.包含权利要求175-217中任一项的融合蛋白的药物组合物。255.权利要求253或254的药物组合物，其中所述药物组合物用于治疗哺乳动物中与病理性血管发生相关的病症。256.权利要求255的药物组合物，其中所述与病理性血管发生相关的病症是眼部病症。257.权利要求256的药物组合物，其中所述眼部病症选自由下述组成的组:AMD，黄斑变性，黄斑水肿，DME包括局部、非中心DME和弥散性、包括中心的DME，视网膜病，DR包括PDR，NPDR，和高海拔DR，其他缺血相关的视网膜病，ROP，RVO包括CRVO和BRVO形式），CNV包括近视CNV，角膜新生血管形成，与角膜新生血管形成相关的疾病，视网膜新生血管形成，与视网膜脉络膜新生血管形成相关的疾病，病理性近视，希佩尔-林道病，眼的组织胞浆菌病，FEVR，冠茨病，诺里病，OPPG，结膜下出血，发红，眼新生血管病，新生血管性青光眼，RP，高血压视网膜病，视网膜血管瘤增生，黄斑毛细管扩张，虹膜新生血管形成，眼内新生血管形成，视网膜变性，CME，血管炎，视盘水肿，视网膜炎，结膜炎包括传染性结膜炎和非传染性例如，过敏性结膜炎），利伯先天性黑朦，葡萄膜炎包括传染性和非传染性葡萄膜炎），脉络膜炎，眼组织胞浆菌病，眼睑炎，干眼，外伤性眼损伤，和舍格伦病。258.权利要求257的药物组合物，其中所述眼部病症是AMD，DME，DR或RV0。259.权利要求257或258的药物组合物，其中所述眼部病症是AMD。260.权利要求257-259中任一项的药物组合物，其中所述AMD是湿性AMD。261.权利要求253-260中任一项的药物组合物，其还包含第二药剂，其中所述第二药剂选自由下述组成的组：另一种抗体，抗血管生成剂，细胞因子，细胞因子拮抗剂，皮质类固醇，止痛剂，和与第二生物分子结合的化合物。262.权利要求261的药物组合物，其中所述抗血管生成剂是VEGF拮抗剂。263.权利要求262的药物组合物，其中所述VEGF拮抗剂是抗-VEGF抗体，抗-VEGF受体抗体，可溶性VEGF受体融合蛋白，适体，抗-VEGFDARPitL®，或VEGFR酪氨酸激酶抑制剂。264.权利要求263的药物组合物，其中所述抗-VEGF抗体是雷珠单抗LUCENTTS®，RTH-258，或双特异性抗-VEGF抗体。265.权利要求264的药物组合物，其中所述双特异性抗-VEGF抗体是抗-VEGF抗-Ang2抗体。266.权利要求265的药物组合物，其中所述抗-VEGF抗-Ang2抗体是RG-7716。267.权利要求263的药物组合物，其中所述可溶性VEGF受体融合蛋白是阿柏西普EYLEA®。268.权利要求263的药物组合物，其中所述适体是培加尼布MACUGEN®。269·权利要求263的药物组合物，其中所述抗-VEGFDARPilT®是abiciparpegol。270.权利要求263的药物组合物，其中所述VEGFR酪氨酸激酶抑制剂选自由下述组成的组:4_4-溴-2-氟苯胺基-6-甲氧基-7-1-甲基哌啶-4-基甲氧基喹唑啉ZD6474，4-4-氟-2-甲基吲哚-5-基氧基-6-甲氧基-7-3-吡咯烷-1-基丙氧基）喹唑啉AZD2171，伐他拉尼PTK787，semaxaminibSU5416，和SUTBNT®舒尼替尼）。271.权利要求261的药物组合物，其中所述第二生物分子选自由下述组成的组：IL-Ιβ;IL-6;IL-6R;IL-13;IL-13R;PDGF;血管生成素；血管生成素2;Tie2;SlP;整联蛋白ανβ3，ανβ5，和α5β1;β动物纤维素；apeIinAPJ;红细胞生成素；补体因子D;TNFa;HtrAl;VEGF受体；ST_2受体;和遗传上与AMD风险相关联的蛋白。272.权利要求271的药物组合物，其中所述VEGF受体是VEGFRl，VEGFR2，VEGFR3，mbVEGFR或sVEGFR。273.权利要求271的药物组合物，其中所述遗传上与AMD风险相关联的蛋白选自由下述组成的组：补体途径组分C2，因子B，因子H，CFHR3，C3b，C5，C5a，和C3a;HtrAl;ARMS2;ΊΊΜΡ3;HLA;IL-8;CX3CR1;TLR3;TLR4;CETP;LIPC，C0L10A1;和TNFRSF10A。274.权利要求261和272-273中任一项的药物组合物，其中所述与第二生物分子结合的化合物是抗体或其抗原结合片段。275.权利要求274的药物组合物，其中所述抗原结合抗体片段选自由下述组成的组：Fab，Fab_C，Fab’_5!1，卩¥，8〇卩¥，和史13’）2片段。276.鉴别赋予提高的抗体与靶分子结合的氨基酸残基改变的方法，所述方法包括：a提供包含编码候选抗体变体的核酸的展示文库，其中，与参比抗体相比，每种候选抗体变体在VH或VL中包含氨基酸残基变化，并且，其中在所述VH或VL的每个位置处的氨基酸残基变化存在于所述展示文库中；b基于所述候选抗体变体与靶分子的结合对所述展示文库进行分选，以形成分选的文库，其中所述分选的文库包含与参比抗体相比具有提高的与靶分子的结合的候选抗体变体;和c比较通过大规模平行测序确定的每个氨基酸残基变化在展示文库和分选的文库中存在的频率，由此确定与展示文库相比，每个氨基酸残基变化是否在分选的文库中富集，由此，如果与展示文库相比，所述氨基酸残基变化在分选的文库中富集，则将所述氨基酸残基变化鉴别为赋予提高的与靶分子的结合。277.鉴别赋予抗体提高的稳定性的氨基酸残基变化的方法，所述方法包括：a提供包含编码候选抗体变体的核酸的展示文库，其中，与参比抗体相比，每种候选抗体变体在VH或VL中包含氨基酸残基变化，并且，其中在所述VH或VL的每个位置处的氨基酸残基变化存在于所述展示文库中；b基于候选抗体变体与靶分子的结合对所述展示文库进行分选，以形成分选的文库，其中所述分选的文库包含与参比抗体相比具有提高的稳定性的候选抗体变体;和C比较通过大规模平行测序确定的每个氨基酸残基变化在展示文库和分选的文库中存在的频率，由此确定与展示文库相比，每个氨基酸残基变化是否在分选的文库中富集，由此，如果与展示文库相比，所述氨基酸残基变化在分选的文库中富集，则将所述氨基酸残基变化鉴别为赋予所述抗体提高的稳定性。278.权利要求276或277的方法，其还包括在步骤b后通过大规模平行测序确定每个氨基酸变化在展示文库和分选的文库中存在的频率。279.权利要求276-278中任一项的方法，其中，与展示文库相比，所述氨基酸残基变化在分选的文库中富集至少2倍。280.权利要求276-279中任一项的方法，其中所述展示文库选自由下述组成的组:噬菌体展示文库，细菌展示文库，酵母展示文库，哺乳动物展示文库，核糖体展示文库，和mRNA展示文库。281.权利要求280的方法，其中所述展示文库是噬菌体展示文库。282.权利要求276-281中任一项的方法，其中所述氨基酸残基变化由简并密码子组编码。283.权利要求282的方法，其中所述简并密码子组是NNK或NNS密码子组，其中N是A，C，G或T;K是G或T;并且S是C或G。284.权利要求283的方法，其中所述简并密码子组是NNK密码子组。285.权利要求276-284中任一项的方法，其中步骤b的分选包括使所述展示文库与固定的靶分子或表位接触。286.权利要求276-285中任一项的方法，其中步骤b的分选包括使所述展示文库与可溶的靶分子或表位接触。287.权利要求276-286中任一项的方法，其中所述展示文库包含至少IxlO6个候选抗体变体。288.权利要求287的方法，其中所述展示文库包含至少IxlO8个抗体变体。289.权利要求288的方法，其中所述展示文库包含至少IxlO9个抗体变体。290.权利要求276-289中任一项的方法，其中所述大规模平行测序包括深度测序、超深度测序和或下一代测序。291.权利要求276-290中任一项的方法，其中所述抗体是单克隆抗体。292.权利要求276-291中任一项的方法，其中所述抗体是IgG抗体。293.权利要求276-291中任一项的方法，其中所述抗体是抗体片段。294.权利要求293的方法，其中所述抗体片段选自由下述组成的组：Fab，scFv，Fv，Fab’，Fab-C，Fab’-SH，Fab’）2,和双抗体。295.权利要求294的方法，其中所述抗体片段是Fab。296.权利要求276-295中任一项的方法，其中所述方法还包括产生包含由所述方法的各步骤鉴别的氨基酸残基变化的抗体。297.权利要求1-66中任一项的抗体在制备用于减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的药物中的应用。298.权利要求1-66中任一项的抗体在制备用于治疗需要此类治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的药物中的应用。299.权利要求1-66中任一项的抗体在制备用于抑制患有与不需要的血管通透性相关的病症的受试者中的血管通透性的药物中的应用。300.权利要求1-66中任一项的抗体，其用于减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法。301.权利要求1-66中任一项的抗体，其用于治疗需要此类治疗的受试者中的与病理性血管发生相关的病症的方法。302.权利要求1-66中任一项的抗体，其用于抑制患有与不需要的血管通透性相关的病症的受试者中的血管通透性的方法。303.包含权利要求1-66中任一项的抗体的组合物，其用于减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法。304.包含权利要求1-66中任一项的抗体的组合物，其用于治疗需要此类治疗的受试者中的与病理性血管发生相关的病症的方法。305.包含权利要求1-66中任一项的抗体的组合物，其用于抑制患有与不需要的血管通透性相关的病症的受试者中的血管通透性的方法。306.权利要求151-174中任一项的抗体缀合物在制备用于减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的药物中的应用。307.权利要求151-174中任一项的抗体缀合物在制备用于治疗需要此类治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的药物中的应用。308.权利要求151-174中任一项的抗体缀合物，其用于减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法。309.权利要求151-174中任一项的抗体缀合物，其用于治疗需要此类治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的方法。310.包含权利要求151-174中任一项的抗体缀合物的组合物，其用于减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法。311.包含权利要求151-174中任一项的抗体缀合物的组合物，其用于治疗需要此类治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的方法。312.权利要求175-217中任一项的融合蛋白在制备用于减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的药物中的应用。313.权利要求175-217中任一项的融合蛋白在制备用于治疗需要此类治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的药物中的应用。314.权利要求175-217中任一项的融合蛋白，其用于减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法。315.权利要求175-217中任一项的融合蛋白，其用于治疗需要此类治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的方法。316.包含权利要求175-217中任一项的融合蛋白的组合物，其用于减少或抑制患有与病理性血管发生相关的病症的受试者中的血管发生的方法。317.包含权利要求175-217中任一项的融合蛋白的组合物，其用于治疗需要此类治疗的受试者中与病理性血管发生相关的病症的方法。
百度查询： 豪夫迈·罗氏有限公司 抗-VEGF抗体的优化的变体
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