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申请/专利权人：广西大学
申请日：2024-05-08
公开（公告）日：2024-06-21
公开（公告）号：CN118222738A
主分类号：C12Q1/689
分类号：C12Q1/689;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/64
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.21#公开
摘要：本发明提供了一种检测甘蔗白条黄单胞菌Xal的方法、引物探针组及试剂盒，属于分子检测技术领域。本发明提供的方法是根据甘蔗白条黄单胞菌Xal的ITX基因序列设计特异性引物，构建标准品，获得线性回归方程，构建针对甘蔗白条黄单胞菌Xal的实时荧光定量PCR检测体系，实现对甘蔗白条黄单胞菌Xal的特异性检测。本发明的检测方法具有特异性好，灵敏度高的特点，比常规半定量PCR检测的灵敏度高10000倍，可准确检测甘蔗白条黄单胞菌Xal。
主权项：1.一种检测甘蔗白条黄单胞菌Xal的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、通过对黄单胞菌属的细菌基因组序列进行序列比对，选择保守序列区域16S～23S之间的ITX区域设计特异性引物FAM-Xal-F1、FAM-Xal-R1和探针FAM-Xal-P1，其核苷酸序列分别如Seq_1～Seq_3所示；S2、采用S1中的特异性引物扩增甘蔗白条黄单胞菌Xal的保守序列区域ITX基因片段，获得标准品，稀释成标准品溶液后进行实时荧光定量PCR，并以标准品的拷贝数浓度的对数值为横坐标，Ct值为纵坐标，得到线性回归方程；S3、分离、纯化待测样品中的病原菌甘蔗白条黄单胞菌Xal后，提取病原菌DNA；S4、以S3中的病原菌DNA为模板，用S1中的特异性引物进行实时荧光定量PCR扩增，根据获得的Ct值和S2中的线性回归方程，实现待测样品中甘蔗白条黄单胞菌Xal的实时荧光定量检测。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 广西大学 一种检测甘蔗白条黄单胞菌Xal的方法、引物探针组及试剂盒
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