申请/专利权人:山东润德生物科技有限公司
申请日:2024-03-27
公开(公告)日:2024-06-21
公开(公告)号:CN117947130B
主分类号:C12P19/26
分类号:C12P19/26;C12N1/38;C12R1/46
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.06.21#授权;2024.05.17#实质审查的生效;2024.04.30#公开
摘要:本发明公开了一种微生物发酵法生产透明质酸的方法,属于微生物发酵技术领域,本发明将马链球菌兽疫亚种种子液接种于含有黄芪提取物和丝氨酸的发酵培养基中,发酵培养,得到含有透明质酸的发酵液;发酵培养过程中,通过分批补料的方式向发酵培养基中加入N‑乙酰氨基葡萄糖和尿苷二磷酸。本发明通过向培养基中加入黄芪提取物和丝氨酸,并向发酵培养基中补充N‑乙酰氨基葡萄糖和尿苷二磷酸,黄芪提取物的加入提高了马链球菌兽疫亚种的菌活性;丝氨酸的加入有利于碳酸流向HA合成的支路,减少了乳酸的合成;N‑乙酰氨基葡萄糖和尿苷二磷酸的加入缓解了菌体自身细胞生长和HA合成的底物竞争,进一步提高了透明质酸的产量。
主权项:1.一种微生物发酵法生产透明质酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:将马链球菌兽疫亚种种子液接种于含有黄芪提取物和丝氨酸的发酵培养基中,发酵培养,得到含有透明质酸的发酵液;发酵培养过程中,通过分批补料的方式向发酵培养基中加入N-乙酰氨基葡萄糖和尿苷二磷酸;所述发酵培养基的组成为:葡萄糖100gL,蛋白胨10gL,酵母浸粉10gL,MgSO4·7H2O2gL,K2HPO4·3H2O2gL,黄芪提取物10gL,丝氨酸2gL;在发酵至6、10、14h时,分别向发酵培养基中加入初始发酵培养基质量分数0.5%的N-乙酰氨基葡萄糖和0.5%的尿苷二磷酸;所述黄芪提取物由如下方法制备而成:将黄芪根干燥、粉碎后过筛,得到黄芪粉末,向黄芪粉末中加水混匀,采用高压协同微波法提取,过滤,得到水提液;将水提液浓缩、干燥得到黄芪提取物;黄芪粉末和水的料液比为1g:20ml;高压协同微波提取的条件为:压力为10Mpa,温度为65℃,微波提取的功率为400W,提取时间为20min。
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权利要求:
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