申请/专利权人:华中农业大学
申请日:2022-11-21
公开(公告)日:2024-06-21
公开(公告)号:CN116411022B
主分类号:C12N15/85
分类号:C12N15/85;C12N15/65;C12N15/12;C12N5/10;C12N15/877
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.06.21#授权;2023.07.28#实质审查的生效;2023.07.11#公开
摘要:本发明公开了一种指示猪体细胞克隆胚胎基因组激活程度的载体及细胞,涉及哺乳动物体细胞克隆技术领域。该载体插入有指示猪胚胎基因组激活程度的报告系统,包括猪PRD‑Like同源域转录因子的DNA结合基序PRDL‑motif、迷你启动子、红色荧光蛋白mCherry编码框、SV40polyA信号以及酶切位点。使用该载体可以筛选到基因组插入上述报告系统的阳性细胞,以该细胞作为供体细胞进行猪体细胞克隆胚胎的构建,得到的克隆胚胎在体外培养过程中可以通过荧光强度指示猪体细胞克隆胚胎的基因组激活程度,因此该细胞可以用于在植入前阶段筛选优质克隆胚胎进行胚胎移植和克隆猪制备。
主权项:1.一种指示猪体细胞克隆胚胎基因组激活程度的载体,其特征在于,该载体插入含有指示猪胚胎基因组激活程度的报告系统;所述的报告系统含重复6次的猪PRD-Like同源域转录因子的DNA结合基序PRDL-motif,一共89bp,核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示;所述报告系统还在PRDL-motif下游添加了迷你启动子、红色荧光蛋白mCherry编码框、SV40polyA信号以及XhoI酶切位点,上游添加了SwaI酶切位点,一共1111bp,整体核苷酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 华中农业大学 一种指示猪体细胞克隆胚胎基因组激活程度的载体及细胞
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