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申请/专利权人：四川大学华西医院
申请日：2024-03-26
公开（公告）日：2024-06-25
公开（公告）号：CN118236992A
主分类号：B01J20/28
分类号：B01J20/28;B01J20/286;B01J20/24;B01D15/22;B01D15/42;C12N15/10
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.25#公开
摘要：本发明提供了能够特异性吸附硒核酸的亲和层析柱及其合成方法，采用葡聚糖凝胶为载体，3‑氨丙基三乙氧基硅烷APTS作为硅烷化试剂，通过烷基化反应，APTS可以和葡聚糖凝胶表面的‑OH形成Si‑O‑Si键，从而在载体表面引入‑NH2，在pH＝5.0条件下，以1‑乙基‑3‑3‑二甲氨基丙基碳化二亚胺EDC和N‑羟基琥珀酰亚胺NHS作为交联剂，使得‑NH2和含汞化合物发生反应，最终将汞原子引入到材料表面，制备得到的凝胶材料进行铸造填充，用保存液清洗之后将基因组降解产物加载到柱子上并进行吸附，最后再用洗脱液将吸附在柱子上的硒核酸洗脱下来并收集，该亲和层析柱能够特异性吸附硒核酸，富集DNA中的硒核酸，为后续相关研究提供了便捷实用的方法。
主权项：1.一种可吸附硒核酸的凝胶材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤，步骤1、将APTS加入乙醇水溶液中，震荡均匀，然后加入葡聚糖凝胶G-200，震荡或搅拌条件下，反应3～5h，离心去上清液，依次进行清洗、干燥处理，得到松散粉末；步骤2、将DMF与对氯汞苯甲酸进行混合，利用盐酸溶液调节pH，至完全溶清，得到第一混合溶液；然后向MES耦合缓冲液中加入EDAC和Sulfo-NHS，震动溶清，得到第二混合溶液；之后将第二混合溶液缓慢加入第一混合溶液中，震荡至溶清，若有沉淀，加入盐酸溶液进行调节，得到第三混合溶液；步骤3、将步骤1得到的松散粉末加入第三混合溶液中，震荡或搅拌孵育15～30min，得到初凝胶材料；步骤4、利用酸性的DMF洗涤初凝胶材料若干次，离心去上清液，然后用碳酸氢钠溶液洗涤若干次凝胶沉淀，得到凝胶材料，在碳酸氢钠溶液中冷藏保存。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 四川大学华西医院 一种能够特异性吸附硒核酸的亲和层析柱及其合成方法
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